Kim, Iksoo;Park, Yong-Soo;Sohn, Hung-Dae;Jin, Byung-Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.7
no.1
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pp.51-57
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2003
A cDNA encoding a putative alcohol dehydrogenase (ADH) class III was cloned from the silkworm, Bombyx mono The full length cDNA is 1,385 nucleotides long and contains an open reading frame of 1,128 bp encoding 376 amino acid residues. The B. mon ADH III protein sequence was aligned with ADH III known from various organisms. Interestingly, the protein sequence of B. mon ADH III showed 87% and 85% identity to ADH III from marine fish Sparus aurata and Branchiostoma floridae, respectively, whereas rather low sequence identity (83%) to Drosophila melanogaster ADH III was observed. Northern blot analysis revealed that B. mon ADH III mRNA is expressed in all tissues from larva examined: fat body, midgut, epidermis, silk gland and ovary, with the highest level found in the fat body.
Megagametophyte tissues of Pinus densiflora were subjected to study the inheritance of acid phosphatase (ACP), alcohol dehydrogenase (ADH) and catalase (CAT) isozymes by starch gel zone-electrophoresis. At least three or four zones were segregated for ACP isozyme. However, as one isozyme of ACP-A zone was separated clearly, only that isozyme was analysed. Five isozyme phenotypes (A1-A5), observed in ACP-A zone, were segregated to a simple Mendelian ratio, suggesting that these are controlled by five codominant alleles existed at ACP-A locus. Two zones of activity were segregated in the gels after staining for ADH, the more anodal zone (ADH-A) of the two was invariant in our materials. Three isozyme phenotypes (B1-B3) were observed in ADH-B zone and these variants showed a 1:1 segregation pattern, suggesting that each variant is controlled by three codominant alleles at ADH-B locus. A total of five isozyme phenotypes, composed of multiple bands, were observed in CAT isozyme. The segregation of these phenotypes in heterozygous trees did not show any significant deviation from a 1:1 segregation. Therefore, the genetic control of CAT isozyme in Pinus densiflora seeds seems to be based on a single locus (CAT-A) with Five codominant alleles ($A_1-A_5$).
Drosophila melanogaster Oregon-R had been bred in a large quantity and the crude alcohol dehydrogenase (ADH) obtained was purified and the activity of the enzyme was measured, analyzed and its patterns were examined. The results obtained are presented below: 1. Through this experiment, it was found that the specific activity of ADH of the D. melanogaster is about more than five times as strong as that of the D. mlanogaster Samarkands which was found by Jacobson et al. in 1970. 2. It was learned that the ADH isozyme patterns of this strain was found to be $ADH_1$ and $AHD_2$ in the fast form and $ADH_5$ in the slow form. 3. It was learned that, $ADH_1, ADH_2$, and $ADH_5A$ are found as the ADH patterns of crude enzyme, and that $ADH_1, ADH_5A$ and $ADH_5B$ as the ADH patterns of the purified enzyme. 4. After the isolation andpurification of $ADH_5A$ and $ADH_1$ isozymes, specfic activity of $ADH_5A$ was found to be 4,330 (units/mg) and that of $ADH_1$ to be 3,670 (units/mg), and the exact position of their zymogram on the 7% acrylamide disc gel was distinguished.
Objectives : It is well-known that Korean people show distinctive drinking behaviors depending on the gene polymorphisms of alcohol metabolizing enzymes. This study examined the gene polymorphisms of ALDH2 and ADH1B and their combination on the drinking behaviors of Korean young adults. Methods : Through a follow-up survey performed for a cohort consisting of 551 university freshmen for six years, the authors attempted to identify genetic factors affecting drinking behaviors. In 2000, drinking behaviors and scores of CAGE questionnaires were assessed and ALDH2 gene polymorphism was determined with PCR-RFLP. In 2006(n= 150), AUDIT-K was assessed in addition to the above and gene polymorphism of ADH1B was determined through SNaPshot$^{TM}$ method. Results : While ALDH2*2 allele was associated with increased degree of drinking in 2000 and 2006. When both enzymes were active, the possibility to be classified into the risk group for alcohol dependence such as AUDIT-K(>12), and CAGE(>2) was high. Conclusion : The ALDH2 genotype had a significant effect on drinking behavior and degree of drinking during early adulthood. However, the combination of the active form of ADH1B and the active form of ALDH2 can be risk factor for problem drinking.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.15
no.2
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pp.106-111
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1995
This study was planned to identify the effect of low-temperature stress on Alcohol dehydrogenase(ADH) isozyme in sixteen varieties of Italian ryegrass using starch gel electrophoresis. The specific electrophoretic zymograms of each variety were observed by ADH isozyme. The results were summarized as follows: 1. All tested varieties displayed two band zone by ADH and R.f values were 0.63 and 0.60, respectively. 2. There were four band type for ADH isozyme of 16 varieties classified with ADH isozyme dyeing intensity. According to dyeing intensity 7, 2, 1 and 6 varieties belong to banding type I,II,III and IV, respectively(Fig.2-A, B). 3. The effect of short tern low-temperature stress induces ADH gene expresson in Italian ryegrass, which may reflect a fundmental shift in energy metabolism to ensure plant tissue survival during the low-temperature stress period.
The variation of needle, cone and seed characteristics and of allelic frequency in isoenzyme, ADH, ME and PGI, according to different resin duct index in Pinus densiflora, Pinus thunbergii and their hybrids was analyzed. The results obtained were as follows : 1. With increase of number of resin ducts, morphological characteristics such as needle length, needle sheath length, cone size, seed size, seed wing size, 1000 seeds weight, etc. tended to he increased, while number of stomata row in needle to be decreased. 2. As the results of discriminant analysis for the morphological characteristics of needle, cone and seed, most individuals are generally coincided with number of resin duct mostly in Pinus densiflora were not. 3. According to the canonical discriminant function obtained from the morphological characteristics in Pinus densiflora, Pinus thunbergii and their hybrids including introgressive hybrid, the resin duct index, 1000 seeds weight, cone size and neelde sheath length characterized fairly their species. 4. With increase of resin duct index, hybrid index tended to be higher. The results obtained from the discriminant analysis and the hybrid index were nearly same each other. 5. With increase of number of resin duct, the allelic frequencies for isoenzyme, ADH-$B_2$, ME-$A_2$ and PGI-$B_1$. $B_2$ tended to increase but those of ADH-$B_3$, ME-$A_4$, and PGI-$B_3$, to decrease. It is thought that this increase of frequency for the former four isoenzymes was resulted in introgressive gene flow from Pinus thunbergii to Pines densiflora and accordingly the frequency of latter three isoenzymes tended to decrease.
Foreign proteins, $endo-{\beta}-1,4-glucanase$ of Bacillus subtilis, preS1+S2 region of hepatitis B virus large surface antigen, human ${\beta}_2-adrenergic$ receptor ($h{\beta}_{2}AR$), and bovine growth hormone (bGH) were expressed in Saccharomyces cerevisiae and secreted into the medium. These proteins were expressed using the alcohol dehydrogenase I (ADH1) promoter of Saccharomyces cerevisiae and secreted by signal sequence of the 97 K killer toxin gene of doublestranded linear DNA plasmid (pGKL1) of S. cerevisiae. All these proteins underwent severe modifications; in particular, N-glycosylation in the case of $endo-{\beta}-1,4-glucanase$, $h{\beta}_2AR$, and preS1+S2. Seventy four percent of the expressed $endo-{\beta}-1,4-glucanase$ was secreted into the culture medium. Highly modified proteins were detected in the culture medium and in the cell. Expressed $h{\beta}_2AR$, which has seven transmembrane domains, remained in the cell. The degrees of secretion and modification and the states of proteins in the culture medium and in the cell were quite different. These results indicated that the nature of the protein has a critical role in its secretion and modifications.
Inheritance of four isozymes, GOT, ACP, MDH and ADH, in Populus alba ${\times}$ P. glandulosa was investigated with starch gel electrophoresis. All four isozymes showed bands. For GOT, six or seven loci were postulated and observed segregation of hybrids at five variable loci was in agreement with expected segregation. Two loci were postulated in ACP; one locus showed no variation but the other locus showed variation. As one additional band was found in P. alba ${\times}$ P. alba (italy), hybrids from P. alba ${\times}$ P. alba ${\times}$ P. glandulosa showed more variation than hybrids from P. alba ${\times}$ P. glandulosa. One monomorphic locus and two variable loci were postulated in MDH. For ADH, both parents were turned out as homozygotes but for different alleles and thus all progenies were heterozygotes. ADH in hybrids seems to be a dieter enzyme as it showed on additional band between two parental bands. There were no variation in band betweens of four enzymes among the clones of P alba and P. glandulosa, respectively.
This study was performed to investigate the ameliorating effect of a hangover beverage mixture (SBJ) that contains Dendropanax morbifera Lev. and several medicinal plant extracts, on hepatoprotection and alcohol-metabolizing enzymes in alcohol-induced hangover in both in vitro and in vivo models. In human hepatoma cell line, HepG2, 300 mM of ethanol-induced hepatotoxicity was significantly improved by pretreatment of SBJ by dose-dependent manner. In the in vivo study, administration of alcohol to rats raised to the concentration of blood alcohol and lactate dehydrogenase (LDH). Blood alcohol and LDH levels in SBJ-treated rats significantly decreased at 0.5 h and 8 h after acute ethanol administration (40%, 4.6 g/kg body weight) as compared to alcohol-treated rats. Hepatic alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity were significantly higher in SBJ-treated rats than in alcohol-treated rats. SBJ supplementation reduced formation of malondialdehyde (MDA), and inhibited reductions of hepatic superoxide dismutase (SOD), hepatic glutathione (GSH), glutathione-S-transferase (GST), glutathione reductase (GR) and glutathione peroxidase (GPx) levels, compared with rats administered alcohol. Plasma catalase (CAT), aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels showed unaltered resulted in all experimental groups compared with the control group. These results suggest that SBJ exhibit hepatoprotective properties by enhancing ADH, ALDH activity and stimulating the antioxidant defense system in alcohol-induced hangover.
Kim, Jeong-Hwan;Lee, Jin-Woo;Shin, Eun-Jung;Nam, Soo-Wan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.2
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pp.212-217
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2011
${\alpha}$ and ${\beta}$-subunits (ApCpnA and ApCpnB) are group II chaperonins from the hyperthermophilic archaeum Aeropyrum pernix K1, specialized in preventing the aggregation and inactivation of substrate proteins under conditions of transient heat stress. In the present study, the cooperativity of ${\alpha}$- and ${\beta}$-subunits from the A. pernix K1 was investigated. The ApCpnA and ApCpnB chaperonin genes were overexpressed in E. coli Rosetta and Codonplus (DE3), respectively. Each of the recombinant ${\alpha}$- and ${\beta}$-subunits was purified to 92% and 94% by using anionexchange chromatography. The cooperative activity between purified ${\alpha}$- and ${\beta}$-subunits was examined using citrate synthase (CS), alcohol dehydrogenase (ADH), and malate dehydrogenase (MDH) as substrate proteins. The addition of both ${\alpha}$- and ${\beta}$-subunits could effectively protect CS and ADH from thermal aggregation and inactivation at $43^{\circ}C$ and $50^{\circ}C$, respectively, and MDH from thermal inactivation at $80^{\circ}C$C and $85^{\circ}C$. Moreover, in the presence of ATP, the protective effects of ${\alpha}$- and ${\beta}$-subunits on CS from thermal aggregation and inactivation, and ADH from thermal aggregation, were more enhanced, whereas cooperation between chaperonins and ATP in protection activity on ADH and MDH (at $85^{\circ}C$) from thermal inactivation was not observed. Specifically, the presence of both ${\alpha}$- and ${\beta}$- subunits could effectively protect MDH from thermal inactivation at $80^{\circ}C$ in an ATP-dependent manner.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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