A novel esterase gene (est7S) was cloned from an enriched metagenomic library derived from an oil-spill area. The gene encoded a protein of 505 amino acids, and the molecular mass of the Est7S was estimated to be 54,512 Da with no signal peptide. Est7S showed the highest identity of 40% to an esterase from a sludge metagenome compared to the characterized enzymes with their properties, although it showed 99% identity to a carboxylesterase in the genome sequence of Alcanivorax borkumensis SK2. Est7S had catalytic triad residues, Ser183, Glu312, and His420, and the GESAG motif in most family VII lipolytic enzymes. Est7S was purified from the crude extract of clone SM7 using Sephacryl S-200 HR and HiTrap Q column chromatographies. The purified Est7S was optimally active at $50^{\circ}C$ and pH 10.0. Est7S showed a high specific activity of 366.7 U/mg protein. It preferred short length esters, particularly p-nitrophenyl acetate, efficiently hydrolyzed R- and S-enantiomers of methyl-3-hydroxy-2-methylpropionate, and glyceryl tributyrate. These properties of Est7S may provide potential merits in biotechnological applications such as detergent and paper processing under alkaline conditions.
"Kimchi" is a most popular pickled Vegetables in Korea. In this paper, eight strains of gram positive rocls and two strains of gram positive cocci are isolated from "Kimchi". For the each isolated strains, the acid production test against carbohydrate and production test of amylase, protease, esterase, and general biological tests are investigated. The most active one for the amylase production is No.2 strain the most active one for the Protease production is No.5,6, and 9 strains. And that for Esterase production is No.9 strain (see the original paper on the results in this journal page)
건강한 개의 혈액세포와 골수세포의 세포화학적 특성을 조사하였다. 이 실험에서 혈액과 골수 시료에 항응고제를 일체사용하지 않았으며 시료채취후 즉시 도말표본을 작성하여 30분 이내에 반응을 실시하였다. 이 실험의 결과는 아래와 같다. 1. alkaline phosphatase의 활성은 호산구계통과 간혹 전골수구에서 양성반응을 나타내었다. 2. acid phosphatase의 활성은 대부분의 계통의 세포에서 양성반응을 나타내지만 tartrate로 억제하면 호산구계만 양성반응을 나타내었다. 3. peroxidase 활성은 골수구계통의 모든 세포에서 양성반응을 나타내며 단구에서는 미약한 양성의 미세과립을 나타내었다. 4. naphthyl-AS-D-chloroacetate esterase활성은 호중구계 세포에서만 양성을 나타낸다. 5. $\alpha$-naphthyl acetate esterase활성은 단구와 일부의 임파구에서 양성을 나타낸다 6. Sudan black B 염색은 골수구계 세포와 단구계 세포에서 양성을 나타내었다. 7. $\beta$-glucuronidase 활성은 적혈구계를 제외한 모든 세포에서 양성반응을 나타내었다.
리그닌 분해 세균인 Pseudomonas sp. LG2는 lignocellulose 기질을 분해하여 APPL 화합물을 생성하는 균주이다. 이 균주를 BSG(brewer's spent grain)가 함유된 배지에서 배양한 배양액에서 APPL 화합물을 확인하였다. 세포외 조효소들의 유도에 관한 여러 가지 탄소원의 영향을 조사한 결과 glucose 배지에서는 xylanase의 효소활성만 확인 되었고 xylose, arabinose에서 배양한 조효소에서는 FAE 및 xylanase의 효소활성이 없었다. Oat spelt xylan, HBSG I(hydrolyzed brewer's spent grain I), HBSG II(hydrolyzed brewer's spent grain II) 및 AFBSG(autoclaved fraction from brewer's spent grain)를 탄소원으로 배양한 조효소에서는 FAE 및 xylanase의 효소활성이 확인됐다. Pseudomonas sp. LG2를 oat spelt xylan, HBSG I, HBSG II 및 AFBSG를 탄소원으로 사용하여 14일 동안 배양하면서 배양기간에 따른 세포외 효소들의 FAE와 xylanase 활성을 조사하였다. Xylanase의 최고 활성은 xylan을 탄소원으로 6일간 배양 했을때 5.3 U/mg으로 가장 높았으며, FAE의 최고 활성은 AFBSG를 탄소원으로 배양했을 때 배양 8일째 15.4 mU/mg으로 가장 높았다. Oat spelt xylan, HBSG I, HBSG II 및 AFBSG를 탄소원으로 사용하여 배양한 배지에 분리된 ferulic acid가 확인되었다. 세포외 효소의 FAE 활성은 methyl ferulic acid, methyl caffeic acid, methyl p-coumaric acid에 대해 esterase의 활성을 보였으나, methyl sinapinic acid, methyl vanillic acid 및 methyl gallic acid에 대해서는 esterase의 활성이 없었다.
포장의 약제저항성 변동요인을 조사하기 위하여 복수아혹진딧물의 Carboxyl esterase(CE) 활서측정에 의한 저항성도의 변동상황을 조사하였다. 비닐하우스에서 고추육묘중 발생한 복수아혹진딧물의 CE활성 측정 결과 약제저항성도는 무처리구가 40이였으나 아세페이트를 처리한구는 78로 약제처리로 인한 저항성도가 38이 증가하였다. 또한 노천망실에서 약제처리를 하지 않고 재배한 케일에 발생한 복숭아혹진딧물의 CE활성에 의한 저항성도는 7월이 24이었으나, 8, 9월의 활성이 계속 증가하여 10월이 83으로서 최고에 달하였다가 11월에는 다시 81에서 79로 약천 떨어지고 있어 약제이외에 저항성도의 자연변동요인이 있음을 확인하였다. 전국적으로 18개장소에서 채집한 진딧물의 CE활성을 측정한 결과 저항성도의 평균이 여름은 50$\pm$14였으며 늦가을인 11월은 82$\pm$10으로서 여름보다 늦가을인 11월이 32가 높았으며 그중에도 약제를 살포사지 않은 곳 보다 약제살포 회수가 많은 곳일수록 높았다.
Biotransformation of pharmacologically inactive lactone prodrug simvastatin (SV) into pharmacologically active simvastatin ${\beta}$-hydroxy acid (SVA) exhibits inter-species differences due to variations in amount and activity of esterase enzymes. In this study, we investigated the pharmacokinetics (PK) of SV and its metabolite SVA following oral doses of SV from controlled-release (CR) tablets and immediate-release (IR) tablets in rodent and canine animal models that features different esterase activity. In rat PK study, no SV was detected in plasma for both formulations due to rapid hydrolysis of SV into SVA by plasma esterase. Besides, no significant differences in PK parameters of SV or SVA were observed between both species. In dog PK study, the relative oral bioavailability of CR tablets in terms of SV was 72.3% compared to IR tablets. Regarding formulation differences in dogs, CR tablets exhibited significantly lower $C_{max}$ (p<0.05), and higher $T_{max}$ (p<0.01) and MRT (p<0.01) for both SV and SVA compared to IR tablets. Accordingly, CR tablets of SV with prolonged drug release profiles in both species might be a potential candidate for a more effective delivery of SV with reduced side effects. Besides, similar PK parameters of SV and SVA in both species despite variation in enzyme activities suggested involvement of equally potent biotransformation pathways in these animal species.
Ferulic acid esterase (FAE) and acetyl esterase (AE) cleave feruloyl groups substituted at the 5'-OH group of arabinosyl residues and acetyl groups substituted at O-2/O-3 of the xylan backbone, respectively, of arabinoxylans in the cell wall of grasses. In this study, the enzyme profiles of FAE, AE and polysaccharide hydrolases of the anaerobic rumen fungus Neocallimastix sp. YQ1 grown on Chinese wildrye grass hay (CW) or alfalfa hay (AH) were investigated by two $2{\times}4$ factorial experiments, each in 10-day pure cultures. The treatments consisted of two glucose levels ($G^+$: glucose at 1.0 g/L, $G^-$: no glucose) and four N sources (N1: 1.0 g/L yeast extract, 1.0 g/L tryptone and 0.5 g/L $(NH_4)_2SO_4$; N2: 2.8 g/L yeast extract and 0.5 g/L $(NH_4)_2SO_4$; N3: 1.6 g/L tryptone and 0.5 g/L $(NH_4)_2SO_4$; N4: 1.4 g/L tryptone and 1.7 g/L yeast extract) in defined media. The optimal combinations of glucose level and N source for the fungus on CW, instead of AH, were $G^-N4$ and $G^-N3$ for maximum production of FAE and AE, respectively. Xylanase activity peaked on day 4 and day 6 for the fungus grown on CW and AH, respectively. The activities of esterases were positively correlated with those of xylanase and carboxymethyl cellulase. The fungus grown on CW exhibited a greater volatile fatty acid production than on AH with a greater release of ferulic acid from plant cell wall.
This experiment was executed to investigate the possibility of the application of taxonomic method through the isoelectric focusing with polyacrylamide gel and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis with seeds in the identification of turfgrasses. The sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis was used to investigate the pattern of seed proteins which were extracted from 18 cultivars of cool season turfgrass and 4 cultivars of warm season turfgrass. The isoelectric focusing with polyacrylarnide gel was used to investigate the activity of the three isozymes of esterase, peroxidase and phosphoglucose isomerase which were extracted from 18 cultivars of cool season turfgrass and 4 cultivars of warm season turfgrass. The results were summarized as follows. 1. The difference of the patterns of seed proteins was observed with sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The identification of intra-genus was easily detected. 2. The three isozymes of esterase, peroxidase and phosphoglucose isomerase were investigated through isoelectric focusing with polyacrylamide gel. As a result, esterase was most effective among three isozymes in the identification of turfgrass cultivars 3. In the past cultivar identification was primarily based on visual morphological characters, but there was a lot of difficulty. If we should use electrophoresis, we will be able to identifvturfgrass cultivars more effectively.
본 균의 생육 및 효소생산에 유용한 탄소원으로서 자연계의 식물에 풍부한 펙틴을 탄소원으로 할 경우, 그 생육도는 전분보다 뛰어났으며, alcohol oxidase와 catalase의 생산량도 높아지는 것으로 나타났다. 특히 alcohol oxidase의 경우는 전분의 15배 이상의 생산량을 보여 본 균과 펙틴 이용성과의 관계를 시사하였고, 세포외 pectin esterase, pectinase등의 높은 활성이 검출되어 이를 증명하였다. 또한 alcohol oxidase 반응에서 생성되는 물질인 formaldehyde를 산화하는 formaldehyde dehydrogenase와, formate를 산화하여 $CO_2$를 생성하는 formate dehydrogenase의 반응을 발견하여, 본 균의 pectin 이용성과 관련한 일련의 에너지 대사계의 존재를 추정할 수 있었다.
잣의 혈중 콜레스테롤 저하효과를 동물실험을 통하여 확인하기 위하여 기본식이(정상군), 기본식이에 콜레스테롤을 첨가한 식이(대조군), 그리고 기본식이에 콜레스테롤과 여러 농도의 잣을 함유한 실험식이(실험군)를 각 군별로 섭취하게 한 결과 잣의 농도에 따른 식이섭취량과 체중변화량의 유의적인 차이는 크게 나타나지 않았다. 식이효율은 저농도로 잣을 섭취한 경우에는 대조군과 차이를 나타내지 않았지만 10% 이상의 고농도의 잣을 섭취한 경우에는 식이효율이 높았다. 본 연구에 사용한 농노범위(1-20%)에서는 잣 섭취에 의해 혈중 콜레스테롤 함량과 동맥경화지수가 감소하는 효과가 나타나지 않았으며 이는 잣에 함유된 다량의 지방이 섭취됨으로써 잣이 지니는 콜레스테롤 저하효과가 감쇄하였기 때문으로 사료된다. 또한 잣 성분이 HMG-CoA reductase와 cholesterol esterase의 저해활성을 지니는지 확인하기 위하여 hexane과 물을 사용하여 잣 성분을 추출한 후 각 추출물에 대한 HMG-CoA reductase와 cholesterol esterase의 저해활성을 측정한 결과 잣의 hexane 추출물은 66%의 HMG-CoA reductase 저해활성을 지니고 있었으며 물 추출물은 저해활성을 나타내지 않았다. 한편 잣의 hexane 추출물과 물 추출물은 cholesterol esterase에 대한 저해활성은 지니고 있지 않았다. 결론적으로 혈중 콜레스테롤의 함량 저하효과는 가공하지 않은 잣의 섭취에 의해서는 기대하기 어려우므로, 향후 잣의 hexane 추출물 중의 유용성분이 혈중 콜레스테롤 함량 저하효과를 지니는지에 대한 동물실험을 수행할 가치가 있다고 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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