• BMB Reports
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• 제43권4호
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• pp.257-262
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• 2010

The aim of work was to investigate changes of 7-ketocholesterol synthesis in alveolar macrophages in the dynamic of lung mechanical ventilation with injurious parameters. The goal of in vitro part of work was to observe influence of 7-ketocholesterol on iNOS and MIP1 $\beta$ production in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) cells. We used 17 healthy domestic pigs randomly assigned into two treatment groups: group I with mechanical ventilation with physiological parameters; group II underwent injurious ventilation with high volume tidal (VT) and low positive end expiratory pressure (PEEP). Cells were analyzed for CYP27A1 protein and gene expression levels, 7-ketocholesterol production. In alveolar macrophages of group II, we obtained increase of production of CYP27A1 protein and 7-ketocholesterol, as well as the expression of the CYP27A1 gene at the 2nd hour of ventilation. In the in vitro experiments we show dose-dependent increase of MIP1 $\beta$ and decrease of CYP27A1, iNOS protein production after 7-ketocholesterol treatment.

• Nutrition Research and Practice
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• 제1권3호
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• pp.180-183
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• 2007

Cytoprotective ability of polysaccharides isolated from different edible mushrooms was investigated on the 7-ketocholesterol-induced damaged cell line. Polysaccharide extracts from six different edible mushrooms-Flammulina velutipes, Peurotus ostreatus, Lentinus edodes, Agrocybe aegerita, Agaricus blazei, and Cordyceps militaris- were prepared by hot water extraction and alcohol precipitation. Cytoprotective ability was evaluated by measuring the viable cells of the normal embryonic liver cell line (BNL CL. 2) in the presence of 7-ketocholesterol. At $80\;{\mu}g/mL$ of 7-ketocholesterol, cytotoxicity was very high with a loss of 98% of viable cells after 20 h of incubation. With the addition of $200\;{\mu}g/mL$ of each polysaccharide isolate to the cell line containing $80\;{\mu}g/mL$ of 7-ketocholesterol, polysaccharide isolates from both Flammulina velutipes and Peurotus ostreatus could significantly inhibit the 7-ketochoelsterol-induced cytotoxicity in the cells. But other polysaccharide isolates were not effective in inhibiting cell damage caused by the oxLDL-induced cytotoxicity.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제23권1호
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• pp.85-89
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• 2008

가열 조리된 냉장 돼지고기 패티에 사용된 상업용 유통 ${\gamma}$-oryzanol과 ${\alpha}$-tocopherol의 항산화 효과가 돼지고기 육질 내의 지질 산화로부터 기인되는 warmed-over flavor(WOF) 값과 콜레스테롤 산화로부터 기인되는 이차 산화물인 7-ketocholesterol의 생성 추이 변화로 비교 분석되었다. 지질산화로부터 측정된 파라미터는 이화학 데이터인 TBARs 값과 관능 데이터인 WOF 값에 의해 비교 분석되었으며, 콜레스테롤 산화로부터 유래된 측정 파라미터는 산화 유도기간에 따른 가열 조리된 돼지고기의 콜레스테롤 함량 변화 정도와 주요 콜레스테롤 산화물인 7-ketocholesterol 생성 정도에 의해 비교 분석 되었다. 콜레스테롤과 롤레스테롤 산화물은 cold saponification 추출 기법과 고속액체크로마토그래프 (HPLC) 테크닉을 이용하여 정량적으로 분석되었다. 아울러, 측정된 각 파라미터 변수들 간의 통계적 상관관계가 검토되었으며, 가열 조리된 돼지고기 패티의 산화로부터 기인되는 이차 산화물에 대한 ${\gamma}$-oryzanol과 ${\alpha}$-tocopherol의 항 산화력이 비교 분석되었다. 분석 결과 모든 파라미터 변수들은 서로 간에 유의적인 상관관계를 나타내었으며, 특히, ${\gamma}$-oryzanol처리 군에서 유의적인 지질 및 콜레스테롤 항 산화 효과를 보였다.

• 생명과학회지
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• 제32권2호
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• pp.142-147
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• 2022

Oxysterols은 콜레스테롤의 산화 유도체로서 죽상경화증(atherosclerosis)에서 병태생리학으로 큰 관련성을 가진다. 본 연구는 oxysterols 중 많은 양을 차지하는 7-ketocholesterol (7-KC)이 단핵구(monocyte)의 분화와 활성화에 미치는 영향을 인간 단핵구세포주 THP-1을 이용하여 조사하였다. 7-KC를 처리한 THP-1 세포는 세포독성 없이 약간의 세포증식이 감소하였고, 세포내 lipids의 양이 크게 증가함을 Nile red 염색에 의해 관찰하였다. 7-KC는 단독으로 세포의 부착능(adhesion)에 영향을 주지 않았지만, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)로 자극한 THP-1 세포에서는 부착능의 뚜렷한 감소를 나타내었다. 그리고, 형광이 부착된 latex beads를 이용하여 7-KC의 phagocytosis (포식능)를 조사하였다. 7-KC는 PMA로 분화를 자극한 세포의 phagocytosis를 현저히 감소시켰다. 또한, 7-KC를 처리한 THP-1 세포는 대식세포(macrophage)의 막표면 인자인 ICAM-1, CD11a, scavenger receptor(SR, 청소수용체) SR-A1, SR-B2 (CD36)의 발현을 감소시켰다. 하지만, 7-KC는 단독으로 혹은 PMA로 자극한 세포에서도 SR-D1 (CD68)의 발현을 현저히 증가시켰다. 이를 종합하면, 7-KC는 단핵구를 sterols이 풍부한 거품세포(foam cell)로 변형시킴으로써 생리적 자극에 의한 정상적인 단핵구의 분화와 활성화를 저해한다는 것을 시사한다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권6호
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• pp.1312-1320
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• 1998

실험재료는 시중에서 판매되는 우육(등심) 부위를 이용하였으며, 생육 시료의 함기포장과 진공포장은 폴리에틸렌 필름을 이용하였고, 전자선 조사(0, 1, 2, kGy)를 실시한 후 $2{\sim}4^{\circ}C$의 냉장실에서 보관하면서 저장기간 별(0, 7, 14일) 실험에 사용하였다. 가열 시료는 oven에서 육 내부가 $70^{\circ}C$가 될 때까지 가열한 다음 함기 포장과 진공포장을 즉시 실시한 후 생육 시료와 같은 조건으로 전자선 조사를 실시한 다음 $2{\sim}4^{\circ}C$의 냉장실에서 보관하면서 생육 시료와 같은 저장기간별 콜레스테롤 산화물의 발생 종류와 발생량을 조사한 결과는 다음과 같다. 가열하지 않은 우육 등심의 함기 포장에서는 $7{\alpha}-hydroxycholesterol,\;{\beta}-epoxide,\;7{\beta}-hydroxycholesterol$, 7-ketocholesterol이 $0.5{\mu}g/g$ 이상 발생하였으며, 전 저장기간 동안 cholestanetriol과 ${\alpha}-epoxide$은 극소량($0.5\;{\mu}g/g$ 이하)발생하였다. 가열하지 않은 우육 등심의 진공포장에서는 전 저장기간 동안 $7{\alpha}-hydroxycholesterol$, 7-ketocholesterol, cholestanetriol과 ${\alpha}-epoxide$은 극소량$(0.5\;{\mu}g/g$ 이하) 발생하였다. 우육 등심을 가열한 후 함기포장에서는 전 저장기간 동안 cholestanetriol과 ${\alpha}-epoxide$은 극소량$(0.5\;{\mu}g/g$ 이하)였지만, $7{\alpha}-hydroxycholesterol\;(1.53{\sim}26.81),\;{\beta}-epoxide\;(1.07{\sim}5.23),\;7{\beta}-hydroxycholesterol\;(40.64{\sim}101.30)$, 7-ketocholesterol $(7.16{\sim}33.91)$. 모든 결과에서 처리구에 따른 콜레스테롤 산화물의 전체 발생량은 조사 수준이 증가할수록 유의적으로 증가하였으며(P<0.05), 저장기간이 경과함에 따라 전체 발생량이 유의적으로 증가하였다(P<0.05).

• 생명과학회지
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• 제26권2호
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• pp.226-233
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• 2016

혈관평활근세포의 세포자멸사는 죽상경화증을 비롯한 여러 혈관질환에서 일어나며, 죽상판의 불안정화에 중요한 역할을 한다. Oxysterol은 혈관평활근세포의 세포자멸사를 야기하는데, 죽상경화 병변에는 비효소적으로 생성되는 주된 oxysterol인 7-ketocholesterol (7KC)이 대량 존재한다고 알려져 있다. 그러나 7KC에 의한 혈관평활근세포의 세포자멸사에 관하여 밝혀진 자세한 기전은 아직 미흡하다. 본 연구는 7KC가 혈관평활근세포의 세포자멸사를 일으키는 기전을 구명하고자 하였다. Sprague-Dawley계 숫쥐의 대동맥 절편으로부터 배양한 혈관평활근세포에 7KC를 처리하여 혈관평활근세포의 생존력의 변동과 세포자멸사를 각각 methylthiazole tetrazolium bromide 분석법 및 trypan blue 분석법 그리고 유세포 분석법, 면역 형광 측정법, 면역침전법 및 웨스턴블럿 등으로 측정하였다. 7KC는 혈관평활근세포의 생존력을 시간- 및 농도-의존적으로 감소시켰고, 혈관평활근세포내에 지질과산화 최종산물인 4-hydroxynonenal (HNE) 생성을 증가시켰으며, HNE 단독 처리 또한 혈관평활근세포의 생존력을 농도-의존적으로 감소시켰다. 7KC 또는 HNE에 의하여 감소되었던 혈관평활근세포의 생존력은 HNE 생성 억제제인 2,4-dinitrophenyl hydrazine 전처치에 의하여 회복되었다. 더욱이 세포생존 매개인자로 잘 알려져 있는 Akt의 발현이 7KC와 HNE에 의하여 농도-의존적으로 감소되었고, 2,4-dinitrophenyl hydrazine 또는 N-acetylcysteine 전처치에 의하여 회복되었다. 단백질분해효소복합체 억제제인 lactacystin은 7KC에 의한 세포자멸사와 Akt 감소는 억제하였지만 7KC에 의한 HNE 생성은 억제하지 못하였다. HNE에 결합된 Akt의 양은 7KC와 HNE에 의하여 현저히 증가하였으며 단백질분해효소복합체 억제제인 lactacystin 전처치 시에도 유의하게 증가하였다. 이상의 결과로 보아 죽상경화 병변에서 7KC는 혈관평활근세포내 HNE 생성을 증가시키고, 이 HNE에 결합된 Akt는 단백질분해효소복합체에 의하여 분해되는 것으로 보이며, 이와 같은 기전에 의하여 죽상판의 불안정화가 촉진되는 것으로 생각된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제26권2호
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• pp.261-269
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• 1997

수산식품 중 비교적 다량의 다불포화지방산과 함께 콜레스테롤을 함유하고 있는 고등어를 50일간 염장하면서 콜레스테롤 및 지질의 산화와 이들 산화에 미치는 아스코르빈산 및 BHA의 영향에 대해 조사하였다. 고등어의 염장 중 콜레스테롤은 계속 산화분해되어 대조군의 경우 50일간 염장한 후에는 23.3mg/kg으로 생시료 함량의 33%에 불과했으나 아스코르빈산 첨가군은 염장 $10{\sim}30$일 사이에 비교적 콜레스테롤의 감소가 억제되었으며 BHA는 특히 100, 200mg/kg첨가한 실험군이 영장 50일 후에도 각각 생시료 함량의 80%와 85%를 보유함으로써 항산화효력을 크게 발취하였다. 7-Ketocholesterol과 지질산화의 척도로 정량된 malonaldehyde의 함량변화는 대조군의 경우에는 비슷한 경향을 보였으나 항산화제의 첨가군에서는 제각기 다른 경향을 보였다. 즉, 7-ketocholesterol의 생성에 대해 아스코르빈산의 첨가는 염장 10일 이후로 계속 억제효과를 보였으나 BHA는 염장 초기부터 후기까지 항산화효과가 월등하였다. 한편 아스코르빈산 첨가군에서 malonaldehyde의 생성은 염장 $10{\sim}30$일 사이에만 대조군에 비해 약 40%가 억제되었으며 BHA 첨가군에서는 염장 초기부터 50일까지 억제효과가 뚜렷히 나타났다. 결론적으로 염장고등어에서 지질과 콜레스테롤의 산화는 동시에 일어났으며 본 실험에서 사용된 아스코르빈산과 BHA는 모두 이들 산화에 대해 염장 30일까지 뚜렷한 항산화 효력을 나타내었고 특히 BHA의 첨가가 더 유효했다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제23권1호
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• pp.1-5
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• 2008

미강 추출 상업용 유통 감마오리자놀의 콜레스테롤 자동산화에 의한 C-7 산화 콜레스테롤 유도체 생성 저해 효과가 수용성 모델 시스템을 이용하여 검토되었다. C-7 콜레스테롤 산화 유도체 (C-7 oxidized cholesterol derivatives: C-7 OCDs) 생성을 위해 콜레스테롤과 감마오리자놀이 분산된 수용성 모델시스템은 구리이온을 촉매로 pH 5.5와 $80^{\circ}C$의 가혹 조건에서 20시간 동안 반응되었다. 산화 유도 기간에 따른 C-7콜레스테롤 산화 유도체 (7-ketocholesterol, 7{\alpha}$-hydroxy-cholesterol과 7b-hydroxycholesterol)의 생성 정도와 감마오리자놀 및 콜레스테롤 변화 추이 정도가 핵산과 에틸아세테이트를 이용한 용매 추출법과 고속 액체크로마토그래프 (high-performance liquid chromatography) 테크닉을 이용 정량적으로 분석되었다. 분석 결과 콜레스테롤 산화 유도 기간에 따른 7-ketocholesterol 생성비율은 7-hydroxycholesterol 이성체 (${\alpha}$-형:${\beta}$-형) 대비 약 2:1의 비율로 생성되었으며, 7-hyoxycholesterol 이성체에 있어서는 ${\alpha}$-형 대비 ${\beta}$-형의 생성 정도가 약 1:2의 비율로 나타났고, 총 C-7 산화콜레스테롤의 생성은 상대적인 고농도(300 ppm) 감마오리자놀 처리 모델 시스템에서 효과적으로 저해되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제31권1호
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• pp.74-82
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• 1999

실험재료는 시중에서 판매되는 우육, 돈육, 계육을 이용하였다. 생육 시료들은 PVDC 필름을 이용하여 함기포장과 진공포장을 하였으며, 전자선 조사(0, 1, 2, kGy)를 실시한 후 $2{\sim}4^{\circ}C$의 냉장실에서 보관하면서 저장기간 별(0, 7, 14일)실험에 사용하였다. 가열 시료들은 electric oven에서 육 내부가 $70^{\circ}C$가 될 때까지 가열한 다음 함기포장과 진공포장을 즉시 실시한 후 생육 시료들과 같은 조건으로 전자선 조사를 실시한 후 $2{\sim}4^{\circ}C$의 냉장실에서 보관하면서 생육 시료들과 같은 저장기간별 콜레스테롤 산화물의 발생 종류와 발생량을 조사한 결과는 다음과 같다. 전자선 조사를 실시한 (0, 1, 2, kGy) 우육 sample에서 생육-진공포장 처리구에서는 전 저장기간 동안(저장 14일) 7-ketocholesterol이 trace ($0.5\;{\mu}g/g$ 이하) 발생하였다. 그러나 $7{\beta}-hydroxycholesterol$은 전 저장기간 동안 $8.02{\sim}101.30\;{\mu}g/g$의 범위로 발생하였다. 전체 발생량은 가열-함기포장 처리구에서 가장 많이 발생하였으며, 발생량은 $51.18{\sim}155.90\;{\mu}g/g$이었다. 돈육, 계육 sample은 우육 sample에서와 같이 콜레스테롤 산화물질의 종류가 비슷하게 발생하였으며, 처리구에 따른 콜레스테롤 산화물 전체 발생량은 조사 수준이 증가할수록 유의적으로 증가하였으며(P<0.05), 저장기간이 경과함에 따라 전체 발생량도 유의적으로 증가하였다(P<0.05).

• Natural Product Sciences
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• 제25권1호
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• pp.49-58
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• 2019

Eleven steroid hormones (SHs: androstene-3,17-dione, estrone, ${\beta}$-estradiol, ${\alpha}$-estradiol, testosterone, dehydroepiandrosterone, $17{\acute{a}}$-hydroxyprogesterone, medroxyprogesterone, megestrol acetate, progesterone, and androsterone) were detected from New Zealand deer (Cervus elaphus var. scoticus) velvet antler (NZA, 鹿茸 ). A method for the quantification of eleven SHs was established by using ultraperformance liquid chromatography (UPLC)-MS/MS. The linearities ($R^2$ > 0.991), limits of quantification (LOQ values, 0.3 ng/mL to 23.1 ng/mL), intraday and interday precisions (relative standard deviation: RSD < 2.43%), and recovery rates (97.3% to 104.6%) for all eleven SHs were determined. In addition, a method for the quantification of three 7-oxycholesterols (7-O-CSs: 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol) in the NZA was established by using an HPLC-photodiode array (PDA) method. The linearities ($R^2$ > 0.999), LOQ values (30 ng/mL to 350 ng/mL), intraday and interday precisions (RSD < 1.93%), and recovery rates (97.2% to 103.5%) for the three 7-O-CSs were determined. These quantitative methods are accurate, precise, and reproducible. As a result, it is suggested that the five steroid compounds of androstene-3,17-dione, androsterone, 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol could be marker steroids of NZA. These methods can be applied to quantify or standardize the marker steroids present in NZA.