The study was conducted to get basic information for haploid production of Petunia hybrida through anther culture by investigating several factors, namely anther stage, culture medium, cold treatment, and genotypes. The results are summarized as follows; Four genotypes of Petunia hybrida were used in a study of anther culture. Plants of each genotype were grown in controlled environments at $20-30^{\circ}C$ with a 16h photoperiod. Equal numbers were harvested from each genotype. The anthers were taken from buds which had received the 14 days' cold treatment at $4^{\circ}C$. Anthers were dissected out aseptically and plated on 1/2 strength MS agar medium containing 5.0mg/${\ell}$ 6-Benzylaminopurine(BAP). Four weeks after culture, light green callus was formed. From these calli, plantlets were regenerated on MS medium containing 2.0mg/${\ell}$ 2-isopentenyl adenine(2ip) after 3 weeks.
Purple passion fruit (Passiflora edulis Sims) is one of the introduced tropical plants, an increasing interest has arisen due to its distinctive taste and attractive flavor. It is expected that passion fruit production and planted area will increase gradually in the years ahead because of high profitability and consumer's demands of healthful ingredients. So we tried to investigate the effect of plant growth regulators and antioxidants on in vitro plant regeneration and callus induction from leaf explants of passion fruit for an establishment of optimal mass propagation system. Young leaf explants of purple passion fruit were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium containing different growth regulators and antioxidant additives to induce the shoot organogenesis. After 8 weeks, the highest embryogenic callus formation rate was obtained in MS medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) and $2mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), furthermore, the shoot development via organogenesis was also observed. Silver nitrate ($AgNO_3$), which was added into the medium to minimize the adverse effects of leached phenolics, was effective for reduction of medium browning and sudden explant death. In the medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ BAP and $1mg{\cdot}L^{-1}$ gibberellic acid ($GA_3$), shoots were most vigorously regenerated and elongated. Most shoots rooted successfully in half strength medium with $1mg{\cdot}L^{-1}$ indol-3 acetic acid (IAA), and more than 90% of plantlets survived after 4-month acclimatization period.
Kim, Chi Moon;Kwon, Ki Won;Moon, Heung Kyu;Lee, Jae Soon
Korean Journal of Agricultural Science
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v.14
no.2
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pp.205-212
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1987
To examine the morphogenetic response, stem segments of 8 Populus spp. and 3 different explants of P. nigra var. italica were cultured on MS (Murashige and Skoog 1962) and WPM (Woody Plant Medium) medium containing various phytohormones. The results obtained were as follows: 1. Shoot regeneration and development from stem segment of 8 Populus spp. showed a quite difference according to the section and the species. All of the species of Leuce and Tacamahaca section did not form adventitious buds, while most of explants showed axillary or dormant bud elongation after 4 weeks. But P. nigra var. italica of Aigeiros section showed a successful adventitious bud formation (mean 5.4 buds per explant). 2. Leaf, petiole, and internode segment of P. nigra var. italica showed a quite differences according to media and ex plants upon the morphogenetic response. Adventitious bud formation from leaf was more abundant and readily initiated on the abaxial side than on the adaxial side. Mean number of 103 adventitious buds per explant was obtained from abaxial side of leaf segment cultured on WPM medium containing $0.2mg/{\ell}$ BAP for 5 weeks. 3. 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy acetic acid) supplemented to media appeared to be negative upon the adventitious bud formation of P. nigra var. italica, while it promoted callus formation from all explants. Especially, NAA (${\alpha}$-naphtalene acetic acid) or NAA combination with BAP (6-benzylaminopurine) promoted root regeneration from the all explant of P. nigra var. italica in this study.
Kim, Nam-Cheol;Kim, Jeong-Gu;Lim, Hyung-Joon;Hahn, Tae-Ryong;Kim, Soo-Un
Applied Biological Chemistry
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v.35
no.2
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pp.99-105
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1992
Artemisia annua contains the antimalarial principle, artemisinin. The possibility of the production of this compound through tissue culture technique was studied. The optimum combinations of hormones for the induction of callus were p-chlorophenoxyacetic acid(pcPA) and 6-benzylaminopurine(BAP) or pcPA and N-isopentenylaminopurine(2iP) in 0.05 mg/l each. For the growth of callus, the same combination of pcPA and BAP was optimum in concentrations of $1.0\;{\mu}M\;and\;0.5\;{\mu}M$, respectively, and the optimal concentration of sucrose was also found to be 2%(w/v). Tissue culture from the crown gall grew faster than normal callus. In the suspension culture broth and the cells of normal callus or Agrobacterium-transformed tumors, arteannuic acid and 11,12-dihydroarteannuic acid were found together with common phytosterols, whereas artemisinin was not found.
Loc, Nguyen Hoang;Anh, Nguyen Huu Thuan;Binh, Doan Huu Nhat;Yang, Moon-Sik;Kim, Tae-Geum
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.1
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pp.96-101
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2010
Leaf explants of the Solanum hainanense plant, grown in vitro, were cultured in basal Murashige and Skoog (MS) media supplemented with 0.5 mg/L kinetin and 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) for callus initiation. For maintenance and proliferation, the callus was cultured on MS medium supplemented with 1 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP) and 0.5 mg/L 2,4-D. The glycoalkaloid content in the callus was at its maximum after ten weeks of culture (188.65 mg/g), whereas that of the one-year-old control was 22.22 mg/g in the root and 5.99 mg/g in the stem. The glycoalkaloid extracted from the callus inhibited the activity of collagenase on collagen gel. High performance liquid chromatography (HPLC) analysis showed that biotransformation occurred when a callus was grown on medium supplemented with various carbon sources. These results suggest that callus of S. hainanense is a good material for production of glycoalkaloid.
Kim, Yong-Kyung;Lee, Ji-Yeon;Kim, Eung-Hwi;Cho, Dong-Ha;Park, Sang-Un
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.15
no.3
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pp.210-214
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2007
The study was carried out to establish in vitro microtuber production from leaf and petiole explant cultures of Pinellia ternata. Culture conditions were optimized by investigating the effect of plant growth regulators, different media, and gelling agents on the efficiency of microtuber indurtion. Among the different combinations of plant growth regulators tested, the combination of 0.1 mg/l 2,4-Dichlorophenoxyacetic (2,4-D) and 0.5 mg/l 6-benzylaminopurine (BAP) showed the highest yield fer microtuber production from leaf (3.9) and petiole (4.7) explant culture on MS medium far 6 weeks. SH(Schenk and Hildebrandt) medium was the most effective medium for microtuber induction and the half strength SH medium was better than SH medium for microtuber production from both leaf and petiole culture. Gelrite was better than agar in the formation of microtubers and 4% Gelrite showed the highest number of microtubers per explant frome leaf (5.9) and petiole (7.8) culture. Germination rate of microtubers after cold storaged for one months long was 86% from in vitro culture and 43% from autoclaved soil.
An efficient method for the rapid propagation of Smilax china from axillary buds was established. Plants with thick leafage were selected from Korea native S. china population. Axillary buds of S. china collected from selected plant and were cultured in various culture media (2MS, MS, 1/2MS, WPM, B5 and SH medium). Shoot was induced from axillary bud on MS basal medium after 4 weeks of culture. 1/2MS medium showed a higher growth rate than those of the others, while the lowest shoot growth was obtained in 2MS medium. Among the sucrose concentrations, 5% sucrose was the optimum level for shoots growth from axillay buds. Among cytokinins, $0.5mgL^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) treatment showed the best performance on shoot multiplication, yielding average shoot multiplication forming about 2.4. Rooting was induced directly near the base of the shoot on 1/2MS medium containing with three-auxins ${\alpha}-napthalene$ acetic acid (NAA), indole acetic acid (IAA) and ${\beta}-indolebutyric$ acid (IBA) (0.5 and $1.0mgL^{-1}$). The $1.0mgL^{-1}$ IBA treatments induced earliest rooting with maximum of root number and root growth. These rooted plantlets were successfully transferred to pots for 4 weeks hardening process, and were transferred to soil with above 90% survival rate.
This study was conducted to establish practical micropropagation of jujube cultivars ('Geumsumg', 'Bokjo') by axillary bud culture. The results are summerized as follows : 1. Addition of activated charcoal to half-strength Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with 0.5mg/l benzylaminopurine(BAP) enhanced shoot and root growth. At 500mg/l activated charcoal level 'Geumsung' showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 6.4cm and 10.0, respectively. At 1,000mg/l activated charcoal level 'Bokjo showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 7.5cm and 12.4, respectively. 2. As indole-3-butyric acid(IBA) concentration increased, rooting and callus growth of microshoot were enhanced. The optimum IBA concentration for shoot elongation and multiplication was 1.0mg/l. 3. Growth responses of shoot-tip and axillary bud segments between two jujube cultivars were different. 'Geumsung' showed that axillary bud explants were about twice better than shoot-tip explants for shoot multiplication, but 'Bokjo' showed that shoot-tip explants mere better than axillary bud explants for shoot elongation and multiplication. 4. In acclimatization processes of plantlets produced in vitro, the survival of plantlets with only root primordia in soil medium was better than that of plantlets with several routs resulting in 97.8%. 5. In cutting of in vitro-derived microshoot, paclobutrazol was more effective than IBA, naphth-aleneacetic acid(NAA) and $Rooton^{(R)}$ in rooting and root growth.
Pham, Thanh Loan;Nguyen, Van Huy;Hoang, Thi Le Thu;Ha, Thi Tam Tien;Tran, Trung Kien;Vu, Xuan Duong;Cao, Phi Bang;Nguyen, Quang Trung
Journal of Plant Biotechnology
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v.47
no.3
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pp.235-241
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2020
This is the first study to establish a complete protocol for micropropagation of Rehmannia glutinosa from root segments. The study involved investigating the effect of plant growth regulators on in vitro shoot regeneration and rooting and identifying substrates supporting survival and growth performance of ex vitro seedlings. A Murashige and Skoog (MS) medium containing 30 g/L sucrose for shoot induction and 0.2 mg/L indole-3-acetic acid (IAA), 1 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP), and 1 g/L polyvinylpyrrolidone (PVP) for shoot multiplication resulted in the highest number of shoots per explant and shoot height. Applying a medium containing 0.5 mg/L IAA and 1 g/L PVP yielded optimal rooting of the shoots grown in vitro. Compost enriched with microbial inoculants and perlite enhanced seedling growth better than that with organic biofertilizer-free substrates (soil and sand). We recommend the continuous production of micropropagated R. glutinosa seedlings from root segments under the aforementioned conditions as a possible propagation technique for crops of this species.
Immature and mature embryos of 18 Korean wheat genotypes were cultured in vitro to develop an efficient method of callus formation and plant regeneration, and to compare the responses of both embryo cultures. Immature and mature embryos were placed on a solid agar medium containing the MS salts and vitamins, 30g/l maltose, 2 mg/l 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), and amino acids. The developed calli were maintained on regeneration medium containing MS salts and B5 vitamins, 20 g/l sucrose, and the combination of two plant growth regulators, 6-benzylaminopurine (BAP) and indole-3-acetic acid (IAA). Immature embryos in most genotypes showed high efficiency of callus induction except three genotypes; Eunpamil, Chunggemil, and Namhaemil, and significant differences among the genotypes. Plant regeneration of calli induced from immature embryos showed high efficiency in Geurumil (56.5%), Tapdongmil (50.5%), Gobunmil (45.5%), and Urimil(42.2%). The analysis of variance showed significant differences for regeneration frequency among the genotypes. Mature embryos showed low callus induction frequency compared with that in immature embryos, and significant differences among the genotypes. Plant regeneration of calli induced from mature embryos showed high efficiency in Keumkangmil (33.33%), Tapdongmil(28.13%), and Geurumil (27.78%). The analysis of variance showed significant differences for plant regeneration frequency among the genotypes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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