• 제목/요약/키워드: 6$\beta$

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\beta-Galactosidase를 생산하는 Streptomyces sp. YB-10의 분리 및 효소 특성 (Characterization of the \beta-Galactosidase Produced by Streptomyces sp. YB-10)

  • 윤기홍;이경섭;김창진
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.151-156
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    • 2003
  • 토양으로부터 세포외로 $\beta$-galactosidase를 분비 생산하는 방선균 YB-10이 분리되었으며, 분리균의 배양ㆍ형태ㆍ생리적 특성을 조사한 결과 Streptomyces속 균주로 확인되었다. 분리균의 배양상등액을 30%~70% ammonium sulfate로 처리하고 투석하여 얻은 $\beta$-galactosidase를 조효소액으로 사용하였을 때 para-nitrophenyl-$\beta$-D-galactopyranoside (pUP$\beta$Gal)는 pH 6.0과 6$0^{\circ}C$의 반응조건에서 가장 잘 분해되었으며, lactose는 galactose와 glucose로 가수분해되는 것으로 확인되었다. 분리균이 생산하는 $\beta$-galactosidase는 galactose에 의해 lactose와 pNP-$\beta$Gal의 가수분해 활성이 모두 저해되었으나, glucose에 의해서는 lactos의 가수분해 활성만 저해되었다. 특히 pUP-$\beta$Gal의 가수분해 활성은 glucose에 의해 약 1.8배 증진되었다.

Proinflammatory Cytokines과 TGF-beta가 섬유모세포의 증식에 미치는 영향 (The Effects of Proinflammatory Cytokines and TGF-beta, on The Fibroblast Proliferation)

  • 김철;박춘식;김미호;장헌수;정일엽;기신영;어수택;문승혁;김용훈;이희발
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제45권4호
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    • pp.861-869
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    • 1998
  • 연구배경: 조식의 손상에의한 염증반응후 회복과정에서 정상조직으로 환원되지 않고 일부는 결체조직으로 대체되어 섬유화가 일어난다. 이 비정상적 섬유화에 의해 섬유화증이 일어나 조직의 원래 기능을 상설하기도 한다. 이때 염증에 관계되는 세포로부터 분비된 여러종류의 cytokine들이 섬유모세포의 증식과 교원질 합성을 조절한다. 이에 관계된 cytokine들의 상호 관련성과 섬유모세포증식에의 영향을 알아내어 조절함으로써 섬유화증을 예방하고 치료하는데 도움을 줄 수 있다. 본 연구에서는 proinflammatory cytokine인 TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6와 섬유모세포의 증식에 큰 영향을 미치는 TGF-$\beta$의 상호 관련성을 알아보고자 하였다. 방 법: 섬유모세포는 사람 태아의 섬유모세포주인 MRC-5를 사용하였으며, 0, 0.5, 1, 5, 10, 20%의 우태아 혈청을 첨가하여 1, 2, 3, 4, 5일째의 MRC-5 증식을 측정하여, 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지시킬 수 있는 배양액중 혈청농도를 먼저 확정한 후, TGF-$\beta$, TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6를 각각 RPMI 배지에 첨가하여 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 보온기에서 96 시간동안 배양하여 0.5 % naphthol blue black으로 염색한 뒤, 50mM의 NaOH로 naphthol blue black을 유리시켜 630nm에서의 분광흡수를 잼으로써 MRC-5의 수를 측정하였다. 또한 TGF-$\beta$와 다른 cytokine의 관련성을 알아보기위해 TGF-$\beta$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였으며, TNF-$\alpha$와 IL-1$\beta$, IL-6의 상호 관련성을 알아보기 위해 TNF-$\alpha$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양한 뒤 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였고, 마지막으로 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$의 섬유모세포 증식에 미치는 상호 관련성을 알아보기 위하여 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$를 함께 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, MRC-5의 수를 역시 통일한 방법으로 측정하였다. 결 과: 1. 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지할 수 있는 배양액중 혈청 농도를 측정한 결과, 0.5% 혈청 농도에서 MRC-5의 증식이 50% 증가된 상태로 배양 6일째 까지 유지되었다. 따라서 이후의 실험에서 사용된 배양액에는 0.5%의 우태아혈청을 포함시켰다. 2. 각 cytokine이 MRC-5 증식에 미치는 영향 0.5%의 우태아혈청만이 있는 상태에서의 MRC-5 증식 정도를 100%로 기준하였을 때, IL-1$\beta$는 50 ng/ml의 농도에서만 45%의 증식 촉진효과를 보였고, IL-6는 영향이 없었으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 농도에 의존성을 보이며 MRC-5의 증식을 최고 160% 까지 증가시켰다. 3. TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능증가에 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$가 미치는 영향 50 ng/ml의 TGF-$\beta$ 단독 자극에 비하여, IL-1$\beta$ 혼합배양시 농도에 의존성으로 보이며 최고 64% 까지, TNF-$\alpha$ 혼합배양시 농도에 의존성을 보이며 최고 159% 까지 MRC-5의 증식을 증가시켰다. IL-6는 약한 억제효과를 보였으나 TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 영향을 미치지 못하였다. 4. TNF-$\alpha$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 IL-1$\beta$, IL-6가 미치는영향 50 ng/ml의 TNF-$\alpha$ 단독자극에 비하여, IL-1$\beta$을 혼합 배양하였을때 농도에 의존성을 보이며 최고 50%까지 MRC-5의 증식을 억제하였고, IL-6는 영향을 미치지 못하였다. 5. TNF-$\alpha$와 TGF-$\beta$의 MRC-5 증식능 증가에서의 상호관련성 50 ng/ml의 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 MRC-5의 증식을 각각 89%, 135% 증가시켰으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$ 공존시에는 MRC-5의 증식을 222% 증가시켰다. 결 론: TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$, IL-1$\beta$의 순서로 MRC-5에 대한 증식 자극효과가 있으며 IL-6는 증식을 억제하는 효과가 있었다. TGF-$\beta$의 MRC-5에 대한 증식 자극효과는 IL-1과 TNF-$\alpha$에 의해 첨가효과를 관찰할 수 있었고, TNF-$\alpha$의 MRC-5 증식 자극효과는 IL-1$\beta$에 의하여 억제되었다.

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원지(Polygala tenuifolia WILLD.) 뿌리의 성분연구 (A Study on the Constituents from the Roots of Polygala tenuifolia)

  • 이영선;이제현;김정숙;김진숙
    • 생약학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.168-172
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    • 1999
  • Five compounds were isolated from the roots of Polygala tenuifolia (Polygalaceae). On the basis of spectroscopic evidences, the structures of these compounds were characterized as ${\alpha}-D-(6-O-sinapoyl)-glucopyranosyl(1{\rightarrow}2')-{\beta}-D-(3'-O-sinapoyl)-fructofuranoside$ (P3), ${\alpha}$-D-{6-O-(p-methoxybenzoyl)}-glucopyranosyl-$(1{\rightarrow}2')$-${\beta}$-D-{3'-O-(3',4',5'-trimethoxycinnamoyl)}-fructofuranoside(P4), ${\alpha}$-D-{6-O-(p-hydroxybenzoyl)}-glucopyranosyl-$(1{\rightarrow}2')$-${\beta}$-D-{3'-O-(3',4',5'-trimethoxycinnamoyl)}-fructofuranoside(P5), ${\alpha}-D-glucopyranosyl-(1{\rightarrow}2')-{\beta}-D-(1'-O-sinapoyl)-fructofuranoside$(P6), $1,5-anhydro-D-glucitol$(P7) respectively. ${\alpha}$-D-{6-O-(p-Methoxybenzoyl)}-glucopyranosyl-$(1{\rightarrow}2')$-${\beta}$-D-{3'-O-(3',4',5'-trimethoxycinnamoyl)}-fructofuranoside(P4) and ${\alpha}-D-glucopyranosyl-(1{\rightarrow}2')-{\beta}-D-(1'-O-sinapoyl)-fructofuranoside$(P6) were isolated for the first time from the genus of Polygala. 1,5-Anhydro-D-glucitol(P7) was isolated without hydrolysis for the first time from the root of Polygala tenuifolia.

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NK-2의 Antagonist인 cyclo-[Gln-Trp-Phe- $\beta$Ala-Leu-Met]의 형태에 관한 연구 (Conformation of cyclo-[Gln-Trp-Phe- $\beta$Ala-Leu-Met], a NK-2 Tachykinin Receptor Antagonist)

  • 하종명
    • 대한화학회지
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    • 제43권5호
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    • pp.540-546
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    • 1999
  • 새로운 NK-2 antagonist이며 고리상 펩티드인 cycIo-($Gln^1-Trp^2-Phe^3-{\beta}Ala^4-Leu^5-Met^6$)의 DMSO 용액 중에서의 형태를 2차원 핵자기공명과 분자동력학적인 계산에 의하여 결정하였다. 조건을 만족시키는 25개의 구조는 모든 아미노산 잔기의 골격원자들 (N,$C^{\alpha}$, C')의 자승 평균 평방근이 $0.02{\AA}$이내로 수렴하였다. 이 고리상 펩티드의 구조는 $Met^6NH$$Ala^4CO$, $Ala^4NH$$Met^6CO$, $Phe^3NH$$Met^6CO$의 사이에 분자내 수소결합이, Gln과 Trp에 type-I ${\beta}$-turn, 그리고 Leu에서 ${\gamma}$-turn을 취하고 있었다. 알려져 있는 고리상 펩티드인 cyclo-($Gln^1-Trp^2-Phe^3-Gly^4-Leu^5-Met^6$)의 Gly이 ${\beta}$Ala으로 바뀜에 따라 ${\beta}$Ala의 여분의 메틸렌이 고리의 골격의 반발력을 완화시키고 수소결합들이 형태의 안정에 기여하고 있다고 생각된다.

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$\beta-Glucan$ 첨가 Pound Cake의 이화학적$\cdot$관능적 특성 (Physicochemical Characteristics of Pound Cake Added with $\beta-Glucan$)

  • 신유미;김미경;조한영;김미리
    • 동아시아식생활학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.728-737
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    • 2005
  • This study was conducted to evaluate the physicochemical characteristics of pound cake made of substituted flour with different amount of $\beta-glucan$ i.e. 3, 6 and $9\%$ respectively. $\beta-glucan$ is a functional food material produced from Agrobacterium sup. R259 KCTC 10197BP. The specific gravity and pH of dough were found to be increased according to $\beta-glucan$ content Rheological property such as adhesiveness of dough has no difference between control and $\beta-glucan$ added groups. The pH of baked pound cake was not significantly different between control and $\beta-glucan$ groups. The volume of baked pound cake wag not significantly different between control and the ones with up to $6\%$ $\beta-glucan$, Lightness (L), redness (a) and yellowness (b) value of Hunter color system of cake crumb were not significantly different among teated groups, except a value of crust in $9\%$ $\beta-glucan$ group. the moisture content of cake increased according to $\beta-glucan$ content. Hardness by texture analyser was decreased with increasing $\beta-glucan$ content although cohesiveness wag not changed in β$\beta-glucan$ groups, compared with the control. Sensory evaluation results showed that the mean scores of over·all acceptability in 3 and $6\%$ $\beta-glucan$ were higher than that of control. Based on these results, the addition of $\beta-glucan$ to pound cake up to $6\%$ was considered to be desirable especially in terms of texture.

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Streptomyces sp. YB-9가 생산하는 균체외 ${\beta}-galactosidase$의 특성 (Characterization of the Extracellular ${\beta}-Galactosidase$ Produced from Streptomyces sp. YB-9)

  • 이경섭;김창진;윤기홍
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제46권4호
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    • pp.299-304
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    • 2003
  • 토양으로부터 lactose의 가수분해를 촉매하는 균체외 ${\beta}-galactosidase$를 생산하는 YB-9가 분리되었다. 분리균 YB-9는 분리균의 배양, 형태, 생리적 특성을 조사한 결과 Streptomyces속 균주로 동정되었다. 분리균의 배양상등액을 ammonium $sulfate(15{\sim}70%)$로 처리하고 투석하여 부분정제된 ${\beta}-galactosidase$$para-nitrophenyl-{\beta}-D-galactopyranoside(pNP-{\beta}Gal)$와 lactose를 기질로 하여 반응특성을 분석하기 위해 조효소액으로 사용하였다. ${\beta}-Galactosidase$는 pH $6.0{\sim}6.5$$60^{\circ}C$에서 최대활성을 보였다. $pNP-{\beta}Gal$과 lactose에 대한 ${\beta}$-galactosidase의 가수분해 활성은 galactose에 의해 감소되었다. Lactose에 대한 가수분해 활성은 glucose에 의해 미미하게 감소하였으나, glucose에 의해 $pNP-{\beta}Gal$에 대한 활성은 1.3배 증가하였다. 특히, xylose에 의한 lactose의 가수분해 활성에는 영향이 없었고, $pNP-{\beta}Gal$에 대한 활성은 1.6배 증가시켰다.

아토피 피부염 모델에 대한 β-1,3/1,6-glucan과 Lactobacillus plantarum LM1004의 면역 조절 효과 (Immunomodulatory Effects of β-1,3/1,6-glucan and Lactobacillus plantarum LM1004 on Atopic Dermatitis Models)

  • 김인성;김성학;김정아;유다윤;김광일;박동찬;임종민;이상석;최인순;조광근
    • 생명과학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.17-25
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    • 2018
  • 본 연구에서는 아토피 피부염 동물 모델에 대한 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004의 면역조절 효과를 확인하고자 하였다. 가려움증의 횟수와 유출된 evans blue, 그리고 혈청 IgE와 histamine의 농도는 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004를 섭취한 그룹에서 아토피 피부염 유발그룹에 비해 유의적으로 감소하는 결과를 나타내었다. 아토피 피부염이 유발되면 전사 수준에서 Th2 및 Th17 세포의 전사인자 및 cytokine은 과발현되며, ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004를 섭취하였을 때 이를 유의적으로 감소되었다. 또한 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004는 Th1 및 Treg 세포의 전사인자(T-bet, GATA-3, $ROR{\gamma}T$, Foxp3) 및 cytokine (INF-${\gamma}$, IL-4, IL-17, TGF-${\beta}$)의 발현을 증가시킴으로써 면역 균형을 조절하는 것으로 나타났다. Galectin-9과 filaggrin은 아토피피부염 유발 처리군에서 유의적으로 가장 낮았으며, ${\beta}$-1,3/1,6-glucan 처리군에서 유의적으로 가장 높게 나타났다. 이와 반대로 TSLP는 아토피 피부염 유발그룹에서 유의적으로 가장 높았으며 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004를 섭취한 그룹은 대조군과 유사한 수준이었다. 이러한 결과를 통해 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004는 아토피 피부염 동물 모델에서 면역조절 작용 및 아토피 피부염의 개선 효과를 가짐을 알 수 있었다. 따라서 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan과 L. plantarum LM1004는 아토피 피부염에 유용한 천연소재로서 사용될 것으로 기대된다.

Tubulin Beta3 Serves as a Target of HDAC3 and Mediates Resistance to Microtubule-Targeting Drugs

  • Kim, Youngmi;Kim, Hyuna;Jeoung, Dooil
    • Molecules and Cells
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    • 제38권8호
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    • pp.705-714
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    • 2015
  • We investigated the role of HDAC3 in anti-cancer drug-resistance. The expression of HDAC3 was decreased in cancer cell lines resistant to anti-cancer drugs such as celastrol and taxol. HDAC3 conferred sensitivity to these anti-cancer drugs. HDAC3 activity was necessary for conferring sensitivity to these anti-cancer drugs. The down-regulation of HDAC3 increased the expression of MDR1 and conferred resistance to anti-cancer drugs. The expression of tubulin ${\beta}3$ was increased in drug-resistant cancer cell lines. ChIP assays showed the binding of HDAC3 to the promoter sequences of tubulin ${\beta}3$ and HDAC6. HDAC6 showed an interaction with tubulin ${\beta}3$. HDAC3 had a negative regulatory role in the expression of tubulin ${\beta}3$ and HDAC6. The down-regulation of HDAC6 decreased the expression of MDR1 and tubulin ${\beta}3$, but did not affect HDAC3 expression. The down-regulation of HDAC6 conferred sensitivity to taxol. The down-regulation of tubulin ${\beta}3$ did not affect the expression of HDAC6 or MDR1. The down-regulation of tubulin ${\beta}3$ conferred sensitivity to anti-cancer drugs. Our results showed that tubulin ${\beta}3$ serves as a downstream target of HDAC3 and mediates resistance to microtubule-targeting drugs. Thus, the HDAC3-HDAC6-Tubulin ${\beta}$ axis can be employed for the development of anti-cancer drugs.

Balb/C mouse의 폐장대식세포에서 유리규산 자극에 의한 Proinflammatory Cytokine과 TGF-$\beta$의 생성 및 상관관계 (The Production and Correlation of Silica Induced Proinflammatory Cytokines and TGF-$\beta$ from Monocytes of Balb/C Mice)

  • 기신영;김은영;김미호;어수택;김용훈;박춘식;이희발
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제45권4호
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    • pp.823-834
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    • 1998
  • 연구배경: 유리규산(silica) 자극에 의해 폐장내 대식세포에서 형성되는 proinflammatory cytokines인 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$와 fibrogenic cytokine인 TGF-$\beta$, PDGF는 섬유화 과정에 매우 중요한 역할을 한다. 그러나 이러한 cytokine 의 역할과 상호관련성에 대해서는 아직 확실히 밝혀진 바없다. 본 연구는 Balb/C mouse의 폐장단구세포를 silica로 자극시 형성되는 IL-6, TNF-$\alpha$ 폐섬유화의 발생과 유지에 중요한 역할을 할 것으로 기대되는 TGF-$\beta$ 의 생성을 관찰하고 TGF-$\beta$의 생성에 proinflammatory cytokine이 미치는 영향에 대해서 알아보고자 하였다. 방 법: Balb/C 의 폐장대식세포를 silica로 자극한 후 IL-6, TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$의 양을 bioassay로 측정하였고 mRNA의 발현을 in situ hybridization을 통해 관찰하였으며, 대식세포의 TGF-$\beta$ 생성에 대한 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$의 영향을 알기 위하여 L-1, IL-6, TNF-$\alpha$에 대한 중화항체를 이용하여 대식세포의 TGF-$\beta$의 생성 억제 유, 무를 관찰하였다. 결 과: Silica로 대식세포자극시 TNF-$\alpha$는 초기 4 시간째 최고의 생성능을 보였으며, IL-6 는 silica 0.2 ${\mu}g/ml$의 농도에서 배양 8 시간째 생성능이 가장 높았고 배양 12 시간째는 다시 감소하였다가 24시간째 증가하는 biphasic한 소견을 보여 주었다. TGF-$\beta$는 silica의 양과 관계없이 배양 24시간째 자연생성능뿐 아니라, silica로 자극시에도 증가되었다. Silica와 TNF-$\alpha$ 50ng/ml을 함께 자극시 TGF-$\beta$의 생성은 현저히 증가되었으며, TNF-$\alpha$ 50 ng/ml과 IL-6 50 ng/ml으로 동시 자극시에는 TNF-$\alpha$에 의한 TGF-$\beta$의 형성이 증가하는 경향을 보였다. TNF-$\alpha$의 중화항체를 전처치 후 silica 자극시 TGF-$\beta$의 생성능을 억제시킴을 관찰할 수 있었다. Anti-IL-$\beta$, anti-IL-6, anti-TNF-$\alpha$ antibody 모두를 통시에 투여하였을 때도 silica에 의한 TGF-$\beta$의 생성능을 억제시킴을 관찰할 수 있었다. Silica 자극 후 대식세포의 in situ hybridization에서 TNF-$\alpha$ mRNA는 2시간째부터 발현되었고 IL-6 mRNA는 4 시간째부터 발현된 후 8 시간째 소실되었고 TGF-mRNA는 12 시간째 가장 강한 발현을 보였다. 결 론: Silica 자극에 의해 폐장대식세포는 자극 초기에는 TNF-$\alpha$가 가장먼저 형성되고 후기에 TGF-$\beta$가 형성되며 TNF-$\alpha$가 TGF-$\beta$ 형성에 중요한 역할을 할 것으로 사료되었다.

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Direct Syntheses of $\beta-Mannopyranosyl$ Disaccharides from 4,6-O-Benzylidene Derivatives of Ethylthio $\alpha-D-Mannopyranosides$ Donors

  • 윤미경;신영숙;천근호
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제21권6호
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    • pp.562-566
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    • 2000
  • $\beta-D-Mannopyranosyl$ disaccharides have been obtained from the coupling of 4,6-O-benzylidene derivatives of ethylthio $\alpha-D-mannopyranoside$ employing NIS-TfOH promoter. NIS-TfOH promoted couplings of the corresponding ethylthio $\beta-D-glucopyranoside$ and produced $\alpha-D-glucopyranosyl$ disaccharides. IDCP (iodonium dicollidine perchlorate) was inactive toward the 4,6-O-benzylidenated ethylthio glucopyranosyl donor. However,lDCP coupled the 4,6-O-benzylidenated $ethylthio-\beta-D-galactopyranoside$ to give a-D-galactopyranosyl disaccharides.