• 한국미생물·생명공학회지
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• 제44권3호
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• pp.254-260
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• 2016

Doenjang samples were prepared by inoculation of multiple starters consisting of two Bacillus spp., one yeast, and one fungus. Doenjang A was fermented with Bacillus amyloliquefaciens EMD17, B. amyloliquefaciens MJ1-4, Pichia farinosa SY80, and Rhizopus oryzae. Doenjang B and C were fermented with the same yeast and fungus but different Bacillus strains; namely, B. amyloliquefaciens EMD17 and B. subtilis CH3-5 for doenjang B, and B. amyloliquefaciens MJ1-4 and B. subtilis CH3-5 for doenjang C. Doenjang D was fermented with microorganisms present in rice straw (control). The doenjang samples were spiked with B. cereus ATCC14579 at two different levels, 10⁴ CFU/g doenjang (I) and 10⁷ CFU/g doenjang (II). All eight doenjang samples were fermented for 70 days at 25℃. Growth of B. cereus was inhibited in doenjang A, B, and C, with the bacterial cell count after 70 days being less than the initial 10⁴ CFU/g added, whereas B. cereus was not inhibited in doenjang D. Doenjang B showed the strongest inhibitory activity against B. cereus, with a cell count of less than 10³ CFU/g after 42 days, even when B. cereus was initially added at 10⁷ CFU/g. Some properties of the doenjang samples, such as pH, TA, and amino-type nitrogen content, were similar to those of doenjang fermented with starters only. The results indicate that carefully selected starters can effectively prevent the growth of B. cereus during doenjang fermentation.

• 한국식품영양과학회지
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• 제29권4호
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• pp.737-742
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• 2000

대두발효식품의 기능성 탐색 연구의 일환으로 Bacillus natto 를 접종한 납두의 발효과정 중 고혈압을 유발하는 angiotension converting enzyme의 저해 peptide를 분리하고 저해효과를 검토함으로서 대두발효식품의 우수성을 입증하기 위한 과학 적 접근을 시도하고자 하였다. 납두는 Bacillus natto균을 이용하여 제조하였고, 2$0^{\circ}C$, 3$0^{\circ}C$, 4$0^{\circ}C$, 5$0^{\circ}C$, 6$0^{\circ}C$에서 0~72시간 동안 배양하면서 protein량, protease activity, ACE 저해율 을 측정하고 저해활성을 가지는 peptide를 정제 후 아미노산 조상을 분석하였다. Bacillus natto에 의한 납두의 발효시간이 경과함에 따라 protein 함량이 증가하여 4$0^{\circ}C$, 60시간에서 최대를 나타낸 후 감소하였다. 발효시간에 따른 protease activity는 4$0^{\circ}C$, 60 시간 배양이 최적의 조건이었으며, 최적 발효조건에 따라 납두를 제조한 후 20 mM sodium phosphate buffer(pH 7.0)를 가해 추출한 추출물을 Amicon membrane YM-3 filtration 과 Sephadex G-10, G-25를 이용한 gel filtration으로 부분정제하였다. 또한 정제한 peptide는 첨가함량이 높아질수록 저해활성은 높게 나타났으며, 1 mg 정도의 peptide 함량으로 74.74%의 저해율 을 나타내었다. 정제한 peptide의 아미노산 조성은 alanine(30.84%), phenylalanine(30.03%), histidine(20.24%) 순서로 그 함량이 높게 나타났다.

• 한국식품과학회지
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• 제51권5호
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• pp.473-479
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• 2019

동결건조된 쌍별귀뚜라미 분말을 4%(w/v)의 기질용액으로 제조한 후, 기질 대비 단백질 가수분해 효소(alcalase, flavourzyme, neutrase, bromelain, papain)를 1%(w/v) 첨가 하여 24시간 가수분해시킨 단백가수분해물을 제조하였다. 각 효소별 가수분해물을 이용하여 SDS-PAGE와 available amino group 함량을 측정하여 확인한 결과, flavourzyme 단백가수분해물이 가장 높은 가수분해도를 보인 반면 bromelain과 papain은 상대적으로 낮은 가수분해도를 보였다. 가수분해도가 높았던 3종의 효소(alcalase, flavourzyme, neutrase)를 이용하여 제조한 단백가수분해물을 각각 한외여과막을 통해 분자량 3 kDa 이하로 분리한 후 항산화 활성을 측정하였다. DPPH 라디칼 소거활성의 경우 flavourzyme이 항산화 활성이 가장 우수하였으며, ABTS 라디칼 소거활성은 neutrase, flavourzyme 및 alcalase 단백가수분해물 순으로 높게 나타났다. $H_2O_2$ 소거활성은 alcalase와 flavourzyme 단백가수분해물이 neutrase 단백가수분해물에 비해 상대적으로 높게 나타났으며, FRAP법은 flavourzyme, alcalase, neutrase 단백가수분해물 순으로 높게 나타났다. 저분자 펩타이드 생산 효율이 가장 높았던 쌍별귀뚜라미 flavourzyme 단백가수분해물을 이용하여 농도별 linoleic acid 과산화 억제 활성을 측정한 결과 농도 의존적으로 유의적인 과산화 억제 활성을 보였다. 최종적으로 본 연구를 통해 고단백질 소재인 쌍별귀뚜라미로부터 여러 단백분해효소원들을 이용한 단백가수분해물 제조 특성 및 우수한 항산화 활성을 확인할 수 있었으며, 이번 연구는 향후 식용곤충 유래 기능성 식품소재 개발을 위한 기초자료로 활용이 가능할 뿐만 아니라 식용곤충 산업 활성화에도 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제27권2호
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• pp.237-246
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• 2014

Two experiments were conducted to evaluate the efficacy of feeding an Escherichia coli (E. coli) derived phytase to pigs fed P deficient, corn-soybean meal diets. In Exp. 1, one hundred and twenty crossbred piglets ($9.53{\pm}0.84$ kg) were allocated to one of five treatments which consisted of four low P diets (0.61% Ca, 0.46% total P and 0.24% non-phytate P) supplemented with 0, 500, 1,000, or 20,000 FTU/kg E. coli phytase as well as a positive control formulated to be adequate in all nutrients (0.77% Ca, 0.62% total P and 0.42% non-phytate P). The treatments were applied to six pens with four pigs per pen for 28 days. In Exp. 2, ten crossbred pigs ($19.66{\pm}1.16$ kg) fitted with ileal T-cannula were used in a nutrient balance study. The pigs were assigned to treatments similar to those used in Exp. 1 in a doubly replicated $5{\pm}4$ incomplete Latin square design (5 diets with 4 periods). Each period consisted of a 5-d adjustment period followed by a 3-d total collection of feces and urine and then a 2-d collection of ileal digesta. Supplementation with phytase linearly increased (p<0.05) weight gain, feed intake, feed efficiency, bone breaking strength and fat-free dry and ash bone weight. There were linear increases (p<0.01) in the apparent ileal digestibility (AID) of DM, GE, CP, Ca, total P, inositol hexaphosphate ($IP_6$) and some AA with increasing dose of E. coli phytase. Pigs fed 20,000 FTU/kg had a greater (p<0.05) AID of IP6 (80% vs 59% or 64%, respectively) than pigs fed diets with 500 or 1,000 FTU/kg phytase. There were linear increases (p<0.05) in the total tract digestibility of Ca, total P, Na, K, Mg, and Zn as well as in the retention of Mg and Zn with increased phytase dose. The retention and utilization of Cu, and the total tract digestibility of CP and Cu quadratic increased (p<0.05) with increased phytase dose. In conclusion, supplementation of 500 FTU of phytase/kg and above effectively hydrolyzed phytate in low-P corn-soybean diets for pigs. In addition, a super dose of phytase (20,000 FTU/kg) hydrolyzed most of the IP6 and consequently further improved mineral use, protein utilization and performance.

• Radiation Oncology Journal
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• 제17권2호
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• pp.151-157
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• 1999

목적 : HL60 세포주에서 PMA(phorbol 12-myrisate 13-acetate) 및 DMSO(dlmethyisulfoxlde) 에 의해 분화가 유도될 때 감소되는 특성을 보이는 K872 클론에 대한 염기 서열, 조직 분포, 단백 분리 등을 시행하였다. 재료 및 방법 QIA plasmid extraction kit(Qiagen GmbH, Germany)를 이용하여 사람의 모유두 세포 pBluescript phagemid cDNA library로부터 K872 클론을 추출하였다. Sanger's dideoxy nucleotide chain-termination method을 이용하여, 추출한 K872 클론의 염기 서열을 분석하였다. BLAST(Basic Local Alignment Search Tools) 프로그램으로 유전자은행의 염기 서열과의 상동성을 검색하였다. K872 클론으로 만든 probe로 다양한 인간 조직 및 암세포주로부터 분리한 RNA에 대하여 nothern blot을 시행하였다. His-Patch Thifusion expression system을 이용하여 대장균 배지에 0.1mM IPTG(Isopropyl-$\beta$-thlogalactopyranoslde) 를 첨가해서 결합단백의 유전자 발현을 유도하였다. 결합단백이 함유된 용출액을 SDS-PAGE에 걸어서 발현된 단백을 확인하였다. 결과 : K872 클론은 675개의 코딩 영역과 280개의 코딩과 관련없는 영역으로 구성된 1006개의 염기로 구성됨을 관찰하였다. 해독틀로 추정되는 부분은 시작 코돈을 포함하여 길6개의 아미노산을 형성하고 단백 산물의 분자량은 25,560 Da으로 추정되었다. 추정 아미노산 배열은 쥐의 glutathlone S-transferase kappa 1(rGSTKl) 의 아미노산 배열과 70$\%$의 상동성을 보였다. nothern blot에 따른 발현 양상은 심장, 수의근, 말초혈액 백혈구 등의 조직에서 높은 발현을 보였으며 방사선 내성과 관련지어 볼 때 대장암 및 흑색종 세포주에서 발현이 높았던 점은 특기할 만하였다. 결론 : 상동성 검색 결과 K872 유전자는 항암제 및 방사선 내성과 관련이 있는 rGSTK1에 대한 사람의 상동유전자로 사료되며 향후 이와 관련한 기능 분석이 필요할 것으로 사료된다

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권4호
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• pp.611-616
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• 2001

고추장을 열(8$0^{\circ}C$/30분)과 초고압(73$^{\circ}C$/680 MPa/30분)으로 처리한 후 37$^{\circ}C$에서 120일간 저장하면서 생균수와 품질변화를 측정하였다. 처리 직후 생균수는 열처리군이 1.43$\times$$10^{6}$ CFU/g과 비교하여 볼 때 열처리에 의한 미생물 살균효과는 미약하였으나, 초고압 처리로 생균수를 약 3 log cycle 감소시킬 수 있었다. 고추장의 생균수는 저장기간에 따라 감소하였다. 무처리군은 저장 초기에 3.78$\times$$10^{6}$ CFU/g에서 저장 120일에는 5.43$\times$$10^4$ CFU/g으로 약 2 log cycle 감소하였고, 열처리군은 저장 초기에 1.43$\times$$10^{6}$ CFU/g에서 저장 120에는 3.10$\times$$10^2$ CFU/g으로 약 4 log cycle 감소한 반면, 초고압 처리군은 처리 직후 1.56$\times$$10^3$ CFU/g에서 저장 90일 후에는 검출되지 않았다. 고추장의 pH는 저장기간에 따라 유의적으로 감소하였다. 고추장의 적정산도는 저장기간에 따라 유의적으로 증가하였으며, 초고압 처리군은 무처리군보다는 낮은 값을, 열처리군보다는 높은 값을 유지하였다. 고추장의 아미노태질소 함량은 저장기간에 따라 유의적으로 감소하였으며, 초고압 처리군은 열처리군보다는 높은 값을, 무처리군보다는 낮은 값을 유지하였다. 고추장의 저장 중 환원당과 에탄올 함량은 처리방법에 관계없이 저장기간에 따라 유의적으로 차이가 없었다. 고추장의 Hunter L, a, b값은 저장기간에 다라 유의적으로 감소하여 흑변하는 현상을 관찰할 수 있었으며, 무처리 고추장은 열처리군과 초고압 처리군에 비하여 변색의 정도가 심하였으나, 초고압 처리군은 열처리군과 유사한 경향을 나타내었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제44권9호
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• pp.1399-1406
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• 2015

본 연구에서는 전국 17지역에서 생산한 한국 전통 간장의 이화학적 분석, 색도 및 갈색도, 총 질소 및 아미노태 질소, 총 폴리페놀의 함량, protease 활성과 항산화 활성을 측정하고, 이들 사이의 상관관계를 분석하였다. pH는 4.34~5.37, 염도는 16.77~34.71%, 환원당은 3.00~32.04 mg/mL, 총 고형분 함량은 19.95~36.86%, 가용성 고형분 함량은 23.10~41.70oBrix의 범위를 보였다. 총 질소 함량은 무주(JMJ) 간장이 12.60%로 가장 높았고, 평창(GPC) 간장이 2.23%로 가장 낮았다. 아미노태 질소는 JMJ 간장에서 139.30mg%로 가장 높은 함량을 보였고, GPC 간장에서 28.23mg%로 가장 낮은 함량을 보였다. Protease 활성은 JMJ 간장에서 2.20 U/mL로 가장 높은 활성을 나타냈고, GPC 간장에서 0.35 U/mL로 가장 낮은 활성을 나타냈다. 총 폴리페놀 함량은 JMJ 간장에서 11.20 GAE mg/mL로 가장 많이 포함되었고, GPC 간장에서 2.37 GAE mg/mL로 가장 적게 포함되었다. DPPH 라디칼 소거 활성은 JMJ 간장에서 63.39%로 가장 높은 활성을 보였고, GPC 간장에서 8.96%로 가장 낮은 활성을 보였다. FRAP는 JMJ 간장에서 2.41 AE mg/mL로 가장 높은 활성을 보였고, GPC 간장에서 0.12 AE mg/mL로 가장 낮은 활성을 보였다. ORAC는 JMJ 간장에서 115.69 TE mg/mL로 가장 높은 항산화 활성을 보였고, GPC 간장에서 8.42 TE mg/mL로 가장 낮은 항산화 활성을 보였다. 실험항목 간 상관관계를 본 결과 protease 활성이 총 폴리페놀 함량과 0.995로 가장 높은 상관성을 보였고, 총 폴리페놀 함량은 DPPH 라디칼 소거 활성과 0.973으로 상관성이 높았다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제22권9호
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• pp.1245-1252
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• 2012

Acinetobacter venetians V28 was isolated from the intestine of righteye flounder, Poecilopsetta plinthus caught in Vietnam seawater, and the esterase gene was cloned using a shotgun method. The amino acid sequence deduced from the nucleotide sequence (1,017 bp) corresponded to a protein of 338 amino acid residues with a molecular weight of 37,186. The esterase had 87% and 72% identities with the lipases of A. junii SH205 and A. calcoaceticus RUH2202, respectively. The esterase contained a putative leader sequence, as well as the conserved catalytic triad (Ser, His, Asp), consensus pentapeptide GXSXG, and oxyanion hole sequence (HG). The protein from the strain V28 was produced in both a soluble and an insoluble form when the Escherichia coli cells harboring the gene were cultured at $18^{\circ}C$. The maximal activity of the purified enzyme was observed at a temperature of $40^{\circ}C$ and pH 9.0 using p-NP-caprylate as substrate; however, relative activity still reached to 70% even at $5^{\circ}C$ with an activation energy of 3.36 kcal/mol, which indicated that it was a cold-adapted enzyme. The enzyme was a nonmetallo-protein and was active against p-nitrophenyl esters of $C_4$, $C_8$, and $C_{14}$. Remarkably, this enzyme retained much of its activity in the presence of commercial detergents and organic solvents. This cold-adapted esterase will be applicable as catalysts for reaction in the presence of organic solvents and detergents.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제22권7호
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• pp.1016-1025
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• 2009

Two experiments were conducted to determine energy and nutrient digestibility in four sources of distillers dried grains with solubles (DDGS) produced from corn and fed to growing pigs. The objective was to test the hypothesis that energy and nutrient digestibility in DDGS does not vary if samples are procured from ethanol plants that use similar production technologies and use corn that is grown within a narrow geographical area. The four sources of DDGS that were used were procured from ethanol plants that were less than 10 yr old and located within 250 km of each other. In Exp. 1, five growing barrows (initial BW = 71.4 kg) that were fitted with a T-canula in the distal ileum were allotted to a 5${\times}$5 Latin square design and used to measure apparent (AID) and standardized (SID) ileal digestibility of AA in the four sources of DDGS. Results of this experiment showed that the SID of CP and all AA except Cys and Pro were greater (p<0.05) in two of the DDGS sources than in the other two sources. Exp. 2 was conducted to measure the concentration of DE and ME and the apparent total tract digestibility (ATTD) of energy, N, P, ether extract, NDF, and ADF in corn and in the same four sources of DDGS as used in Exp. 1. Five pigs (initial BW = 29.7 kg) that were placed in metabolism cages and allotted to a 5${\times}$5 Latin square design were used. Results of Exp. 2 showed that the average DE and ME in DDGS were 4,072 and 3,750 kcal/kg DM, respectively, which was less (p<0.01) than the DE and ME in corn (4,181 and 4,103 kcal/kg DM, respectively). The average ATTD for P in DDGS was 56.1%, which was greater (p<0.01) than the ATTD for P in corn (31.9%). The ATTD for ADF in DDGS was also greater (p<0.05) than in corn, but the ATTD for ether extract and NDF were greater (p<0.05) in corn than in DDGS. It is concluded that energy and nutrient digestibility vary among sources of DDGS even when the DDGS is procured from ethanol plants that use corn grown within a narrow geographical region. Thus, factors other than corn growing region are responsible for the variability of energy and nutrient digestibility in DDGS.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제56권4호
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• pp.14.1-14.7
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• 2014

Two trials were conducted to evaluate the influence of supplemental urea withdrawal on characteristics of digestion (Trial 1) and growth performance (Trial 2) of feedlot cattle during the last 40 days on feed. Treatments consisted of a steam-flaked corn-based finishing diet supplemented with urea to provide urea fermentation potential (UFP) of 0, 0.6, and 1.2%. In Trial 1, six Holstein steers ($160{\pm}10kg$) with cannulas in the rumen and proximal duodenum were used in a replicated $3{\times}3$ Latin square experiment. Decreasing supplemental urea decreased (linear effect, $P{\leq}0.05$) ruminal OM digestion. This effect was mediated by decreases (linear effect, $P{\leq}0.05$) in ruminal digestibility of NDF and N. Passage of non-ammonia and microbial N (MN) to the small intestine decreased (linear effect, P = 0.04) with decreasing dietary urea level. Total tract digestion of OM (linear effect, P = 0.06), NDF (linear effect, P = 0.07), N (linear effect, P = 0.04) and dietary DE (linear effect, P = 0.05) decreased with decreasing urea level. Treatment effects on total tract starch digestion, although numerically small, likewise tended (linear effect, P = 0.11) to decrease with decreasing urea level. Decreased fiber digestion accounted for 51% of the variation in OM digestion. Ruminal pH was not affected by treatments averaging 5.82. Decreasing urea level decreased (linear effect, $P{\leq}0.05$) ruminal N-NH and blood urea nitrogen. In Trial 2, 90 crossbred steers ($468kg{\pm}8$), were used in a 40 d feeding trial (5 steers/pen, 6 pens/treatment) to evaluate treatment effects on final-phase growth performance. Decreasing urea level did not affect DMI, but decreased (linear effect, $P{\leq}0.03$) ADG, gain efficiency, and dietary NE. It is concluded that in addition to effects on metabolizable amino acid flow to the small intestine, depriving cattle of otherwise ruminally degradable N (RDP) during the late finishing phase may negatively impact site and extent of digestion of OM, depressing ADG, gain efficiency, and dietary NE.