Objective: The present study investigated the effect of ethanol extract of Cynanchum wilfordii (ECW) on vascular relaxation and vascular inflammation in rat artery isolated from rats and anti-inflammatory activity in human aortic smooth muscle cells (HASMC). Methods: Vascular tone and guanosine 3',5'-cyclic monophosphate (cGMP) production were examined in rat artery isolated from Sprague Dawley rats, in the presence of ECW. HASMC were incubated with tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) or Angiotensin II for 24 h. Matrix metalloproteinase (MMP)-2 and anti-oxidant activity of ECW was investigated by pretreatment with ECW in HASMC. Results: Cumulative treatment of ECW relaxed aortic smooth muscles of rats in a dose-dependent manner. ECW-induced vasorelaxation was significantly decreased by pretreatment of L-arginine methyl ester (L-NAME) or oxadiazolo-quinoxalinone (ODQ). Furthermore, ECW treatment of thoracic aorta significantly increased cGMP production. Incubation of ECW with ODQ or L-NAME markedly decreased ECW-induced cGMP production. ECW treatment dose-dependently suppressed TNF-${\alpha}$- or Angiotensin II-induced increase in matrix metalloproteinase-2 expression in HASMC. Also, ECW exhibited 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging activity in vitro and reduced TNF-${\alpha}$-induced increase in reactive oxygen species production in a dose-dependent manner. Conclusions: Taken together, the results suggest that ECW exerts vascular relaxation via NO/cGMP signaling pathway and decreases MMP-2 expression via anti-oxidant activity.
A flock of AA breed chickens were reared in peterstme brood-vait chamber and were provided with high energy pelleted feed. At 14 d of age, a total of 350 birds were randomly divided into 3 groups as follows: 100 birds were exposed to normal ambient temperature of 20$^{\circ}C$ for control group; 150 birds were exposed to lower ambient temperature of 11$^{\circ}C$ to induce ascites (treatment I); and another group of 100 birds were exposed to lower ambient temperature of 11$^{\circ}C$ and fed diet containing 1% L-arginine for ascitic prophylactic treatment (treatment II). Samples were collected from blood and abdominal fluid of chicken at 3, 4, 5, 6 and 7 wk of age subsequently, to analysis the contents of plasma endothelin (ET-1), angiotensin II (Ang II), cyclic adenosine monophosphate (cAMP), cyclic guanosine monophosphate (cGMP). The results indicated that the contents of cAMP, cGMP, and Ang II in reatment I and ascitic broilers were higher than the corresponding control group (p<0.01, p<0.05), ET-1 of preascitic broilers were control group (p<0.05), while there was an insignificant difference with later ascitic broilers. The contents of cAMP and cGMP in treatment II were higher than the treatment I and control groups (p<0.01, p<0.05), whereas, the contents of Ang II were gradually decreased compared to the control group (p<0.05), the contents of ET-1 were insignificantly different. On further analysis, the increased plasma Ang II at low ambient temperature condition in broilers made endothelium cell secretion of increased ET-1, cAMP, cGMP and decreased NO. Therefore, low temperature accelerated ascites syndrome in broilers. Supplemently L-arginine can decrease ET-1, and increase cAMP and cGMP. It is concluded that cAMP mediated in broilers pulmonary hypertension syndrome.
Extracts from the leaves of the Ginkgo biloba are becoming increasingly popular as a treatment that is claimed to reduce atherosclerosis, coronary artery disease, and thrombosis. In this study, the effect of ginkgolide B (GB) from Ginkgo biloba leaves in collagen (10 ${\mu}g/ml$)-stimulated platelet aggregation was investigated. It has been known that human platelets release matrix metallo-proteinase-9 (MMP-9), and that it significantly inhibited platelet aggregation stimulated by collagen. Zymographic analysis confirmed that pro-MMP-9 (92-kDa) was activated by GB to form an MMP-9 (86-kDa) on gelatinolytic activities. And then, activated MMP-9 by GB dose-dependently inhibited platelet aggregation, intracellular $Ca^{2+}$ mobilization, and thromboxane $A_2$ ($TXA_2$) formation in collagen-stimulated platelets. Activated MMP-9 by GB directly affects down-regulations of cyclooxygenase-1 (COX-1) or $TXA_2$ synthase in a cell free system. In addition, activated MMP-9 significantly increased the formation of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and cyclic guanosine monophosphate (cGMP), which have the anti-platelet function in resting and collagen-stimulated platelets. Therefore, we suggest that activated MMP-9 by GB may increase the intracellular cAMP and cGMP production, inhibit the intracellular $Ca^{2+}$ mobilization and $TXA_2$ production, thereby leading to inhibition of platelet aggregation. These results strongly indicate that activated MMP-9 is a potent inhibitor of collagen-stimulated platelet aggregation. It may act a crucial role as a negative regulator during platelet activation.
본 시험은 sialic acid가 23%를 함유하도록 제조한 유청가수분해단백분말제제(whey protein of hydrolysis)의 기능성 식품원료로 개발을 위한 동물안전성을 평가에 연구목표를 두었다. 시험물질은 sialic acid 23%(v/v)와 원료인 GMP(glycomacropeptide)가수분해 단백질이 87%(v/v)로 구성되어 있었다(시험명: 23%-GNANA). 시험물질의 독성 유무는 한국식품의약안전청(KFDA, 2014)과 OECD(2008)의 의약품 등의 독성시험 기준에 따라 실시하였다. 평가방법으로서, 시험물질의 투여용량을 0, 1,250, 2,500 및 5,000 mg/kg/day하여 SPF Sprague-Dawley 계열 암수 랫드에 90일 동안 반복경구투여하였을 때 나타나는 독성 여부를 평가하였다. 평가항목으로서는 사망률, 일반증상관찰, 체중 변화, 사료섭취량 측정, 안검사, 요검사, 혈액학적 및 혈액생화학적 검사, 부검 시 장기의 중량 측정, 부검 시 육안적 및 조직병리학적 검사 등을 평가하였다. 결과로서, 시험물질로 인한 일반증상 및 사망동물은 발생하지 않았다. 또한, 안과학적 검사, 요검사 그리고 혈액학적 및 혈액이화학적 이상 여부와 부검 시 육안적 검사 및 조직병리학적 검사에서 대조군 대비 특이한 변화는 관찰되지 않았다(P<0.05). 이외의 평가 항목에서, 암컷은 사료섭취량과 증체율이 다소 감소하였고, 그리고 수컷에서는 요의 SG와 PRO 및 고환 무게가 다소 증가하는 경향을 보였지만, 시험물질-유래 경미한 변화(non-adverse effect)가 고용량군(5,000 mg/kg/day)만 확인되었다. Weight-based classification(독성 강도에 따른 분류)를 적용한 최종 독성평가 결과는 다음과 같다. 수컷의 경우, NOEL(No Observed Effect Level)은 5,000 mg/kg/day 그리고 암컷의 경우는 NOAEL(No Observed Adverse Effect Level)은 5,000 mg/kg/day로 최종 확인되었다. 따라서, 암수 모두에서 시험물질의 NOAEL은 투여최대용량인 5,000 mg/kg/day로 확인되었다. 결론적으로, 시험물질인 유청가수분해단백분말제제는 건강기능식품의 특성상 임상허용용량인 1,000 mg/kg/day의 5배 수준에서 안전함을 확인되었다.
The present study was undertaken to evaluate the effect of evening primrose oil (EPO) on the male sexual functions. EPO (daily 0.5 ml/mouse) was orally intubated for 28 consecutive days to experimental ICR mice, and same vol. of vehicle to control mice. On the 14th and 28th experimental day, the testis weight, number of complete intromissions and mating, serum testosterone and cGMP levels, prostaglandin leveIs of penile corpus cavernosum smooth muscle cells, and NO-productive activity of endothelial cells were determined. The weight of body and testis, the number of complete intromissions during the 3hour period were somewhat increased in EPO treated mice than those of control. The number of sperm-positive females and testosterone level in serum were increased in experimental groups. The serum cGMP level was significantly increased but the NO production of ionomycin-stimulated HUVEC cells was not affected when EPO was added into cultures. These results suggest that oral administration of EPO enhanced the sexual functions of male mice, and EPO could be developed as a tonic improving sexual functions.
The present study was designed to investigate the protein expression of nitric oxide synthase (NOS) and guanylyl cyclase (GC) activity in ischemia/perfusion (I/R) renal injury in rats. Renal I/R injury was experimentally induced by clamping the both renal pedicle for 40 min in Sprague-Dawley male rats. The renal expression of NOS isoforms was determined by Western blot analysis, and the activity of guanylyl cyclase was determined by the amount of guanosine 3', 5'-cyclic monophosphate (cGMP) formed in response to sodium nitroprusside (SNP), NO donor. I/R injury resulted in renal failure associated with decreased urine osmolality. The expression of inducible NOS (iNOS) was increased in I/R injury rats compared with controls, while endothelial NOS (eNOS) and neuronal NOS (nNOS) expression was decreased. The urinary excretion of NO metabolites was decreased in I/R injury rats. The cGMP production provoked by SNP was decreased in the papilla, but not in glomerulus. These results indicate an altered regulation of NOS expression and guanylyl cyclase activity in I/R-induced nephropathy.
This study was undertaken to investigate the mechanism of lipopolysaccharide (LPS) and nitric oxide (NO) as a regulator of vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation. VSMC was primarily cultured from rat aorta and confirmed by the immunocytochemistry with anti-smooth muscle myosin antibody. The number of viable VSMCs were counted, and lactate dehydrogenase (LDH) activity was measured to assess the degree of cell death. Concentrations of nitrite in the culture medium were measured as an indicator of NO production. LPS was introduced into the medium to induce the inducible nitric oxide synthase (iNOS) in VSMC, and Western blot for iNOS protein and RT-PCR for iNOS mRNA were performed to confirm the presence of iNOS. Inhibitors of iNOS and soluble guanylate cyclase (sGC), sodium nitroprusside (SNP) and L-arginine were employed to observe the action of LPS on the iNOS-NO-cGMP signalling pathway. LPS and SNP decreased number of VSMCs and increased the nitrite concentration in the culture medium, but there was no significant change in LDH activity. A cell permeable cGMP derivative, 8-Bromo-cGMP, decreased the number of VSMCs with no significant change in LDH activity. L-arginine, an NO substrate, alone tended to reduce cell count without affecting nitrite concentration or LDH level. Aminoguanidine, an iNOS specific inhibitor, inhibited LPS-induced reduction of cell numbers and reduced the nitrite concentration in the culture medium. LY 83583, a guanylate cyclase inhibitor, suppressed the inhibitory actions of LPS and SNP on VSMC proliferation. LPS increased amounts of iNOS protein and iNOS mRNA in a concentration-dependent manner. These results suggest that LPS inhibits the VSMC proliferation via production of NO by inducing iNOS gene expression. The cGMP which is produced by subsequent activation of guanylate cyclase would be a major mediator in the inhibitory action of iNOS-NO signalling on VSMC proliferation.
세균 내독소에 의하여 발생하는 패혈성 쇼크와 혈관 반응성 감소의 원인을 관찰하였다. 혈관 절편이 고정된 실험조에 세균 내독소 0.2 mg 투여한 경우 $36{\pm}3.65$ nM NO가 발생되었고, NO 발생에 의한 혈관 이완 효과를 억제하기 위해 전처치한 L-MAME, methylene blue는 혈관 절편의 phenylephrine (PE) 유발 수축 반응을 증가시켰으며 methylene blue에 의해 더 강한 수축 반응의 증가가 관찰되었다. 이때 혈관 내피세포가 존재할 경우에 PE에 대한 혈관 반응성이 증가되는 경향을 나타내었다. 세균 내독소 투여에 의해 acetylcholine 유발 혈관 이완은 증가되는 경향을 나타내었고, 전처치한 L-NAME, methylene blue에 의해 혈관 절편의 acetylcholine (ACh) 유발 이완은 억제되었으며 methylene blue에 의해 현저히 억제되었다. 그러나 세균 내독소를 투여하지 않은 군의 ACh 유발 혈관 이완 반응은 methylene blue에 의해서만 억제되었다. 결론적으로 세균 내독소에 의한 혈관 반응성 감소와 혈관 이완 반응은 NO가 발생되어 guanylyl cyclase를 활성화하여 유발된다고 생각되며, 세균 내독소에 의한 효과는 L-arginine NO pathway 보다는 cyclic GMP 신호전달계를 경유한 경로에서 더 많은 영향을 받는것으로 사료된다.
In the present study, vasorelaxant effect of the extract of seeds of Oenothera odorata (SOO) and its possible mechanism responsible for this effect were examined in vascular tissues isolated from rats. Changes in vascular tension, 3',5'-cyclic monophosphate (cGMP) levels were measured in thoracic aorta rings from rats. Methanol extract of seeds of Oenothera odorata relaxed endothelium-intact thoracic aorta in a dose-dependent manner. A dose-dependent vascular relaxation was also revealed by treatment of ethylacetate, n-butanol, and H2O (aqua extract of seeds of Oenothera odorata , ASOO) extracts partitioned from methanol, but not by hexane extract. However, the vascular relaxation induced by ASOO were abolished by removal of endothelium of aortic tissues. Pretreatment of the endothelium-intact vascular tissues with NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) or 1H-[1,2,4]-oxadiazole-[4,3-α]-quinoxalin-1- one (ODQ) significantly inhibited vascular relaxation induced by ASOO. Moreover, incubation of endothelium-intact aortic rings with ASOO increased the production of cGMP. However, ASOO-induced increases in cGMP production were blocked by pretreatment with L-NAME or ODQ. The vasorelaxant effect of ASOO was attenuated by tetraethylammonium (TEA), 4-aminopyridine, and glibenclamide attenuated. On the other hand, the ASOO-induced vasorelaxation was not blocked by verapamil, and diltiazem. Taken together, the present study demonstrates that ASOO dilate vascular smooth muscle via endothelium-dependent NO-cGMP signaling pathway, which may be closely related with the function of K+ channels.
This study was aimed to examine relaxing effects of Acanthopanacis cortex(AC) through nitric oxide(NO) production and phosphodiesterase type 5(PDE-5) inhibition in corpus cavernosum. In order to define the relaxation effects of AC extract, rabbit corpus cavernous tissues were prepared in $2{\times}2{\times}8mm$ sized strip. AC extract ($0.01-3.0mg/m{\ell}$) were treated in contracted strips induced by phenylephrine(PE) and $N{\omega}$-nitro-L-arginine (L-NNA) was treated before AC extract-treated. And calcium chloride($Ca^{2+}$) 1 mM was infused into precontracted strips after pretreatment of AC extract in $Ca^{2+}-free$ krebs-ringer solution. When AC extract was applied to human umbilical vein endothelial cell(HUVEC), cell viability was measured by MTT assay, and NO concentration was measured by Griess reagent system. Ratio of smooth muscles to collagen fibers and eNOS, PDE-5 positive reaction were measured by histochemical and immunohistochemical process on mice corpus cavernosum. AC extract significantly affected relaxion of the cavernous strips, and the pretreatment of L-NNA inhibited AC extract-induced relaxation. Contraction induced by the addition of $Ca^{2+}$ was inhibited by treatment with the AC extract in $Ca^{2+}-free$ solution. In AC group, NO concentration, ratio of smooth muscle to collagen fibers, and eNOS positive reaction were increased, PDE-5 positive reaction was decreased compared to PE group. As a result of the above experiment, it was thought that AC extract inhibits the inflow of extracellular $Ca^{2+}$ by activating cGMP through the increase of eNOS / NO and the decrease of PDE-5 which inhibits cGMP activity, in the corpus cavernosum.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.