Lee, Mi Lim;Huh, Jeong Eun;Nam, Dong Woo;Seon, Jong In;Kang, Jung Won;Kim, Sung Hoon;Choi, Do Young;Lee, Jae Dong
Journal of Acupuncture Research
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v.29
no.6
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pp.11-21
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2012
Objectives : BHH10 is traditional medicine herb used for enhancing body resistance against various diseases. The aim of this study was to identify BHH10 extract induces osteogenic activity in human osteoblast-like MC3T3-E1 cells. Methods : MC3T3-E1, pre-osteoblast cell line, were treated with BHH10 of various concentrations($0.1{\mu}g/mL$, $1{\mu}g/mL$, $10{\mu}g/mL$). And then, the effect of BHH10 on osteoblast differentiation was examined by alkaline phosphatase(ALP) activity, von Kossa staining and RT-PCR for osteoblast differentiation markers such as osteocalcin(OCN), osteopontin(OPN). Results : BHH10 had dose-dependent effect on the viability of osteoblastic cells, and dose-dependently increased alkaline phosphatase(ALP) activity. BHH10 markedly increased mRNA expression for OCN, OPN in MC3T3-E1 cells. Also, BHH10 significantly induced mineralization in the culture of MC3T3-E1 cells. Conclusions : In conclusion, these results propose that BHH10 can play an important role in osteoblastic bone formation, osteogenesis, and may possibly lead to the development of bone-forming drugs.
Objective : Obesity is a disease caused by energy imbalance and increases the risk of complications such as cardiovascular disease and cancer. Additionally, a recent study reported that excessive production of ROS stimulates the expression of transcription factors related to adipogenesis, such as PPAR-𝛾, C/EBP-𝛼 and 𝛽, in 3T3-L1 cells. In this study, Paeonia anomala L. (PAL) was selected as a candidate for improving and preventing obesity from Mongolian medical literature, and its effect on fat metabolism was observed in vitro. Methods : The activity of PAL extract against lipid accumulation was measured in 3T3-L1 cells through Oil red O staining. Additionally, the expression of lipid metabolism-related proteins was measured by western blot. Results : Intracellular lipid accumulation was significantly lower in the treatment group than in the control group. In addition, pAMPK/AMPK protein expression in the treatment group tended to increase in a concentration-dependent manner, and PPAR-𝛾 protein expression in the treatment group showed a significant decrease in a concentration-dependent manner compared to the control group. Conclusion : These results suggest that PAL extract may have an anti-obesity effect, and it is believed that it can be used to develop functional materials for the treatment of obesity.
Park, Yoon-Hee;Choi, Jeong-Hwa;Kim, Jong-Han;Park, Soo-Yeon
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.1
s.32
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pp.169-176
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2007
Objectives : The purpose of this study was to investigate inhibitory effect of Gagamtongsung-San(GTS) on the cancer. Methods : This study estimated the cytotoxicity of GTS about L1210 and NIH3T3. We used GTS extract distilled with water, n-Hexane, Ethyl acetate and Butanol. The cytotoxicitys of GTS about cancer cells and normal cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). Results : The results of this study were obtained as follow ; l. Cytotoxicity of water extract of GTS in L1210 cell lines was significantly increased, compared with NIH3T3. 2. n-Hexane fraction of GTS had similar cytotoxicity between L1210 and NIH3T3, and that have similar $IC_{50}$ of water extract of GTS at 276 ${\mu}g/ml$ 3. Ethyl acetate fraction of GTS had low degree cytotoxicity both L1210 and NIH3T3 cell lines. 4. Butanol fraction of GTS had cytotoxicity between L1210 and NIH3T3. Significantly, Cytotoxicity of GTS in L1210 cell lines was significant increased. 5. $H_2O$ fraction of GTS had no cytotoxicity both L1210 and NIH3T3.
Purified bee venom was collected from colonies of honeybees (Apis mellifera L.) using a bee venom collector under sterile conditions and then purified under strict laboratory conditions. Purified bee venom contained $63.9{\pm}5.4%$ melittin, $10.9{\pm}1.6%$ phospholipase A2, and $2.3{\pm}0.3%$ apamin. Purified bee venom has various anti-bacterial, anti-inflammatory and immunostimulating effects. In this study, we evaluated purified bee venom which are mammary gland cells, MAC-T cells are used to increase the synthesis of milk protein. Purified bee venom promoted the proliferation of MAC-T cells at concentrations below $1{\mu}g/mL$, but cytotoxicity at $10{\mu}g/mL$ and above. As a result of the increase in the synthesis of ${\beta}-casein$, a milk protein after treatment with MAC-T cells at a concentration of the bee venom without cytotoxicity, the ${\beta}-casein$ content in the cell culture was increased when treated at a concentration of 1 ng/mL or more. In addition, it was confirmed that purified bee venom significantly increased the expression of bovine ${\beta}-casein$ (bCSNB) mRNA, a ${\beta}-casein$ synthesis gene, at a concentration of 1 ng/mL or more. These results suggest that purified bee venom can be used to increase the production of livestock by ultimately increasing the expression of milk protein.
The anti-obesity effects of starter (Leuconostoc mesenteroides+Lactobacillus plantarum) fermented kimchi on 3T3-L1 adipocyte were studied using naturally fermented kimchi (NK), a functional kimchi (FK, NK supplemented with green tea), and FK supplemented with added starters (FKS). Oil red O staining and cellular levels of triglyceride (TG) and glycerol were used to evaluate the in vitro anti-obesity effects of these kimchis in 3T3-L1 cells. The expressions of adipogenesis/lipogenesis-related genes of peroxisome proliferator-active receptor (PPAR)-${\gamma}$, CCAAT/enhance-binding protein (C/EBP)-${\alpha}$, and fatty acid synthase (FAS) were determined by RT-PCR. Kimchis, especially FKS, markedly decreased TG levels and increased levels of intracellular glycerol and lipid lipolysis. In addition, FKS also reduced the mRNA levels of PPAR-${\gamma}$, C/EBP-${\alpha}$, and FAS, which are related to adipogenesis/lipogenesis in 3T3-L1 cells. These results suggest the anti-obesity effects of FKS were to due to enhanced lipolysis and reduced adipogenesis/lipogenesis in 3T3-L1 adipocytes.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Adipocytes undergo angiogenesis to receive nutrients and oxygen needed for adipocyte' growth and differentiation. No study relating quercetin with angiogenesis in adipocytes exists. Therefore, this study investigated the role of quercetin on adipogenesis in 3T3-L1 cells, acting through matrix metalloproteinases (MMPs). MATERIALS/METHODS: After proliferating preadipocytes into adipocytes, various quercetin concentrations were added to adipocytes, and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assays were performed to evaluate cell proliferation. Glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) activity was investigated as an indicator of fat accumulation. The mRNA expressions of transcription factors related to adipocyte differentiation, CCAAT/enhancer-binding proteins (C/EBPs), peroxisomal proliferatoractivated receptors (PPAR)-γ, and adipocyte protein 2 (aP2), were investigated. The mRNA expressions of proteins related to angiogenesis, vascular endothelial growth factor (VEGF)-α, vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)-2, MMP-2, and MMP-9, were investigated. Enzyme activities and concentrations of MMP-2 and MMP-9 were also measured. RESULTS: Quercetin treatment suppressed fat accumulation and the expressions of adipocyte differentiation-related genes (C/EBPα, C/EBPβ, PPAR-γ, and aP2) in a concentration-dependent manner in 3T3-L1 cells. Quercetin treatments reduced the mRNA expressions of VEGF-α, VEGFR-2, MMP-2, and MMP-9 in 3T3-L1 cells. The activities and concentrations of MMP-2 and MMP-9 were also decreased significantly as the concentration of quercetin increased. CONCLUSIONS: The results confirm that quercetin inhibits adipose tissue differentiation and fat accumulation in 3T3-L1 cells, which could occur through inhibition of the angiogenesis process related to MMPs.
Jin, Seong Woo;Koh, Young Woo;Yun, Kyeong Won;Kim, Kyung Je;Je, Hae Shin;Im, Seung Bin;Kim, Kwang Sang;Kim, Min Sook;Yu, Byung Jo;Seo, Kyoung Sun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.25
no.6
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pp.404-410
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2017
Background: Hair loss related syndromes are increasing due to environmental pollution and stress. Hair care products are mainly prepared by mixing chemicals and natural extracts, such as those obtained from medicinal plants. The purpose of this study was to investigate the effects of 70% ethanol extracts from the flowers of Calendula officinalis, fruit body of Phellinus linteus, and the whole plant of Houttuynia cordata on the growth of CCD-986 cells, hair follicle dermal papilla cells (HFDPC), and 3T3-L1 cells. Methods and Results: All sample extracts at all concentrations, except for that from P. linteus fruit body at $500{\mu}g/m{\ell}$, were cytotoxic to CCD-986 cells. However, none of the sample extracts were cytotoxic to HFDPC. The lipid differentiation of 3T3-L1 cells regulates hair regeneration via secretion of platelet derived growth factor. The 70% ethanol extract of H. cordata whole plant promoted hair growth. Adipogenesis rate significantly increased in a treatment concentration-dependent manner. Conclusions: These results suggest that 70% ethanol extracts of C. officinalis flower, P. linteus fruit body and H. cordata could be used for the development of hair care products.
This study investigated the improved lipid metabolism effect of 3T3-L1 cells induced by adipocytes using the dichloromethane (DCM) fraction in the organic solvent extract of Wassong (Orostachys japonicus). To confirm the cell cytotoxicity, each of 6 fractions of organic solvent extracts (EtOH, Hexane, DCM, EtOAc, BuOH, and H2O) was examined using MTS assay. As a result, it was confirmed that the DCM extract was stable over the whole range of concentrations, and a DCM fraction was used to confirm the improved lipid metabolism effect. Lipid excretion was measured to confirm the change of lipid metabolism. 3T3-L1 cells induced by adipocytes were treated with DCM extract and stained with oil-red O to evaluate lipid accumulation. As a result, it was confirmed that the lipid efflux was significantly improved. In order to confirm the mechanism of lipid efflux, the mRNA expressions of ABCA1 and ABCG1, which are lipid transport proteins, were confirmed by real-time PCR. Therefore, the present study confirmed that the DCM extract from Orostachys japonicus has the effect of improving the lipid metabolism on 3T3-L1 adipocytes. In addition, the results of this study will be used as the basis for the development of functional foods using Orostachys japonicus and also for conducting research on the detailed mechanisms.
Water-soluble fraction (WSF) from edible mushroom hinmogi (Tremella fuciformis) were obtained by water extraction, and polysaccharides in the WSF were separated by ethanol precipitation. The inhibitory effects of the polysaccharides on 3T3-L1 adipocyte differentiation were evaluated by the reduction of peroxisome proliferators-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) translation, triglyceride accumulation, Oil Red-O staining, and expression levels of $PPAR{\gamma}$, CCAAT/enhancer binding protein a (C/$EBP{\alpha}$), and leptin. The $PPAR{\gamma}$ translation in 3T3-L1 cells was inhibited by the treatment with polysaccharide precipitated by 80% ethanol (P80) which showed highest inhibitory activity among polysaccharides tested. In addition, treatment of P80 to 3T3-L1 cells significantly inhibited the triglyceride accumulation, Oil Red-O staining, and mRNA expression of $PPAR{\gamma}$, C/$EBP{\alpha}$, and leptin in a dose-dependent manner. Based upon these results, P80 from edible mushroom hinmogi shows the inhibitory activity on the differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Therefore, it might be employed as a potential anti-obesity material.
Objectives: Osteoporosis is considered a serious human disease. We developed an extract of mixed herbs containing root of Platycodon grandiflorum (ExMH-PGR), which is expected to be effective in preventing or treating osteoporosis. The aim of this study was to investigate the anti-osteoporotic effect of ExMH-PGR in osteoblastic MC3T3-E1 cells and osteoclastic RAW 264.7 cells. Methods: To examine the anti-osteoporotic effect of ExMH-PGR, osteoblast and osteoclast differentiation were induced and cultured with various concentrations of ExMH-PGR. Alkaline phosphatase (ALP) activity, collagen synthesis, osteocalcin production, and mineralization in MC3T3-E1 cells were analyzed. Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) activity and the formation of actin ring in RAW 264.7 cells were analyzed. Results: ExMH-PGR at concentration up to $25{\mu}g/mL$ significantly increased ALP activity, collagen synthesis, osteocalcin production, and mineralization in MC3T3-E1 cells. ExMH-PGR at 50 to $200{\mu}g/mL$ significantly inhibited TRAP activity and the formation of actin ring in RAW 264.7 cells. Conclusions: These results demonstrate that ExMH-PGR stimulates osteoblastic activities and inhibits osteoclastic activities in in vitro systems, suggesting that ExMH-PGR might be considered as an anti-osteoporotic candidate for treatment of osteoporosis disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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