The purpose of the present study was to determine the elaborate characteristics of ovarian changes including follicles and corpus luteum, and hormonal patterns of gonadotropin surge mode secretions during the normal consecutive estrous cycle in three dairy cows. Non-lactating and multiparous Holstein cows (n=3) used as experimental animals. The cows were assigned to examine the relationship among ovarian changes (follicle, corpus luteum), ovarian steroids (estradiol, progesterone) and gonadotropin (LH, FSH) surge mode secretion during the successive estrous cycles by rectal palpation, ultrasonography and hormonal assay. The mean length of the estrous cycle for the three cows was $23.1{\pm}1.44days$ (${\pm}SEM$), with a range of 20-28 days. In six estrous cycles, the number of two follicular waves, three follicular waves and four follicular waves was 2, 3 and 1, respectively. The sequential ultrasonographic monitoring showed that the corpus luteum with ${\geq}10mm$ in diameter detected from Day 2 (Day 0 is ovulation) in six estrous cycles of all cows. Preovulatory increases in estradiol concentration reached $10.36{\pm}1.10pg/ml$ on the 2 days before ovulation of the last dominant follicle. All cows exhibited a preovulatory rise in estradiol concentration followed by a typical preovulatory LH and FSH surge. The mean interval from the peak of LH/FSH surge to ovulation of the last dominant follicle was $31.3{\pm}1.76h$ (${\pm}SEM$). In these results, each dairy cow showed that ovarian morphological changes and gonadotropin surge mode secretion will be regulated by various environmental factors including age, breeds, nutrition, breeding conditions, etc.
To determine the effect of the characteristics of the corpus luteum (CL) and serum metabolites on pregnancy rate following embryo transfer in Hanwoo cow, recipients were synchronized the estrus with CIDR. in vivo or in vitro produced bovine embryos were transferred to synchronized recipients. The characteristics of the CL were checked by rectal palpation and ultrasound. Blood samples were collected from jugular vein at Day 7 and analysed progesterone and serum metabolites. The results obtained from this study were as follows; 1. Total 397 embryos were transferred to recipient and 121 heads out of them were pregnant. The pregnancy rate was 30.5% and slightly differences between farms. 2. There was not significantly different the pregnancy rates between the size of CL and the cavity CL. In the recipients which had more than 2ng/$m\ell$ of serum progesterone level, the pregnancy rates was in higher than others (46.6% vs. 24.4%, 15.0%). 3. The highest pregnancy rate was obtained at 90 to 110mg/㎗ in serum total cholesterol, 14 to 16mg/㎗ in BUN, and 70 to 80mg/㎗ in serum glucose, respectively, and these metabolites in blood could be used as the criteria in the selection of recipient at embryo transfer.
Yin, Huiqun;Jiang, Hong;He, Ruibing;Wang, Cunli;Zhu, Jie;Li, Yang
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.43
no.1
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pp.31-37
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2016
Objective: The aim of this study was to investigate associations between the morphology score of blastocysts and blastocoele re-expansion speed after warming with clinical outcomes, which could assist in making correct and cost-effective decisions regarding the appropriate time to vitrify blastocysts and to transfer vitrified-warmed blastocysts. Methods: A total of 327 vitrified-warmed two-blastocyst transfer cycles in women 38 years old and younger were included in this retrospective study. Results: The clinical pregnancy rate (CPR) and implantation rate (IR) of transfers of two good-morphology grade 4 blastocysts vitrified on day 5 (64.1% and 46.8%, respectively) were significantly higher than the CPR and IR associated with the transfers of two good-morphology grade 3 blastocysts vitrified on day 5 (46.7% and 32.2%, respectively). No significant differences were found in the CPR and IR among the transfers of two good-morphology grade 4 blastocysts regardless of the day of cryopreservation. Logistic regression analysis showed that blastocoele reexpansion speed after warming was associated with the CPR. Conclusion: The selection of a good-morphology grade 4 blastocyst to be vitrified could be superior to the choice of a grade 3 blastocyst. Extending the culture of grade 3 blastocysts and freezing grade 4 or higher blastocysts on day 6 could lead to a greater likelihood of pregnancy. Since re-expansion was shown to be a morphological marker of superior blastocyst viability, blastocysts that quickly re-expand after warming should be prioritized for transfer.
Kim, Y.S.;Lee, H.T.;Kim, I.C.;Ryu, J.W.;Kim, C.W.;Chung, K.H.
Journal of Embryo Transfer
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v.21
no.4
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pp.345-351
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2006
The objective of this study was to investigate the effects of preservation period of porcine liquid semen on bacterial contamination and in vitro production of embryo. Extended liquid semen was prepared by three mixture of boar's ejaculates from each farm without antibiotics, and were kept in $17^{\circ}C$ semen preservation incubator until use. Sperm motility was significantly (p<0.05) decreased as semen preservation time goes by (78.7$\pm$2.4% for 1 day vs. 71.1$\pm$2.4 and 64.8$\pm$2.4% for 3 and 5 days of presentation, respectively). Quantitative of bacteria in semen was significantly (p<0.05) higher in 5 days ($57.8\pm105.2\times10^4$ Cfu) compared to 0 and 3 days ($32.1\pm76.8\times10^4$ and $26.9\pm46.6\times10^4$ Cfu, respectively) of preservation. In terms of development of in vitro fertilization of porcine embryos inseminated by preserved semen, the rate of normal fertilization (2PN) was significantly (p<0.05) decreased in 5 days (56.0$\pm$2.6%) compared to 1 and 3 days (66.0$\pm$2.7 and 64.0$\pm$2.7%, respectively) of preservation. Cleavage rate was also significantly (p<0.05) affected by preservation period (75.0$\pm$4% for 1 day, 70.0$\pm$0.3 and 71.0$\pm$0.3% for 3 and 5 days, respectively). The in vitro developmental rate of blastocyst stage embryo was significantly (p<0.05) affected by semen preservation period (15.0$\pm$1.0% for 1 day vs. 11.0$\pm$0.9 and 8.0$\pm$0.9% for 3 and 5 days, respectively). It is concluded that more than 3 days of liquid semen preservation without antibiotics increased the quantity of bacteria resulted in detrimental effect on sperm motility and decreased both normal insemination rate and the developmental rate of blastocyst stage embryo.
Serial ultrasonographic examinations were performed to establish a prediction table of parturition date in pregnant Maltese, Yorkshire Terrier, Shih-tzu and Miniature Schnauzer bitches. The inner chorionic cavity diameter and fetal head diameter in 45 pregnant bitches were converted retrospectively based on the day of parturition. The data of inner chorionic cavity diameter obtained from Day-44 to Day-25 and fetal head diameter obtained from Day-25 to Day-1 were used to compile a equations of prediction of parturition date. The 70 pregnant bitches with unknown mating time were examined to assess an accuracy of the equations established in this study. And these results were applied to the prediction of parturition date and compared to actual parturition date. The accuracy for parturition date within 0, $\pm$1, and $\pm$2 days interval using the equations of prediction of parturition date were 64.3%, 22.8% and 12.8%, respectively. The overall accuracy of prediction table of parturition day based on the ICCD and HD was 100% accurate within $\pm$2 days. Therefore, the prediction table seems to be a useful tool of the prediction of parturition day in practice.
Eight female Himalayan tahrs (Hemitragus jemlahicus) were estrus-synchronized, and transcervically inseminated with frozen-thawed semen in September, 2009, about 2 to 3 months earlier than their natural breeding season. Intravaginal progesterone-releasing devices were inserted into vaginas of six Himalayan tahrs on September 7, and the other two on September 8 to suppress luteal function of ovaries. The devices had been placed deep inside the vagina prior to withdrawal on September 23. A day before CIDR removal, a combination of PMSG 400 IU and hCG 200 IU was intramuscularly injected. Forty hours later, frozen-thawed semen was transcervically inseminated. Pregnancy diagnosis was performed 39 days later by analyzing progesterone level of serum. Every treatment was done under anesthesia inducted by xylazine injection. In conclusion, vaginal discharge of cervical mucus, hormonal changes induced by implant-typed or muscularly injectable hormones and widening of cervix enough to insert an insemination gun into uterine body were achieved in non-breeding season. Moreover, the first inseminated Himalayan tahr, 36 hours after CIDR removal was assumed to be pregnant but the fetus may have been lost due to the use of anesthetic drug.
We report herein the successful results of estrus induction, sperm cryopreservation and kids born by transcervical insemination of frozen-thawed semen in a Saanen goat. Flugestone acetate (FGA: 60 mg) was inserted into vagina for 15 days. The goat was intramuscularly injected with 400 IU PMSG and 200 IU hCG ($PG600^{(R)}$: Intervet, Korea) a day before withdrawal of the FGA sponge. Follicles and corpora lutea were identified on both ovaries by laparoscopy. Artificial insemination was performed 46 hours after removal of FGA sponge. The concentration of frozen-thawed semen was $3.975{\times}10^8/ml$ and 0.5 ml of frozen-thawed semen was transcervically inseminated into uterine body under anesthesia. Three kids, all females, were born 144 days after artificial insemination. This is the first report producing kids by transcervical insemination of frozen-thawed semen in a Saanen goat of which the estrus was induced by FGA sponges, PMSG and hCG during non-breeding season in Korea.
This study was performed to determine the significance of a baseline ovarian cyst on the response to controlled ovarian hyperstimulation and the outcome of IVF-ET. One hundred one patients who underwent IVF-ET were enrolled in this study. The outcome of 31 patients, who had an ovarian cyst of >10mm detected at ultrasound examination performed on day 3, was compared with that of 70 patients who underwent a similar protocol and did not have an ovarian cyst. E2 level on the day of hCG administration, the number of follicles, the number of oocytes retrieved, the number of embryo transferred and the pregnancy rate were evaulated. The E2 level on the day of hCG adminstration and the number of mature oocytes retrieved were lower in the group with a baseline cyst. The pregnancy rate also was significantly lower in the group with a cyst (21% versus 38%). Therefore a baseline ovarian cyst on cycle day 3 was associated with a poorer outcome after IVF-ET.
Kim, Min-Su;Min, Kwan-Sik;Seong, Hwan-Hoo;Kim, Chan-Lan;Kim, Dongkyo;Imakawa, Kazuhiko;Kim, Sung Woo
Journal of Embryo Transfer
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v.31
no.4
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pp.335-347
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2016
Multiple interferon tau (IFNT) genes exist in bovine. An antiluteolytic substance secreted by the bovine conceptus and primarily responsible for maternal recognition of pregnancy is bovine trophoblast protein 1 (bIFNT1), a new type I interferon tau (IFNT) genes. The objectives of this research were to investigate whether multiple, distinct gene encode bIFNT1 and other type I bIFNT gene in the bovine genome and to examine expression of bIFNT1 and other bIFNTc1 mRNAs during conceptus development. These transcrips could be regulated through caudal-related homeobox-2 (CDX2) and ETS2 and/or AP1 (JUN) expression, a transcription factor implicated in the control of cell differentiation in the trophectoderm. The presence of mRNAs encoded by bIFNT1 and type I bIFNTc1 genes were examined quantitatively via reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of total cellular RNA (tcRNA) extracted from on day 17, 20 and 22 bovine conceptuses. The expression level of bIFNT1 was higher on day 17 transcripts were gradually weakly detectable on day 20 and 22. However, the other bIFNTc1 gene examined transcripts was highly expressed on day 20 and transcripts were weakly detectable on day 17 and 22 bovine conceptuses. Furthermore, human choriocarcinoma JEG3 was co-transfected with an -1kb-bIFNT1/c1-Luc constructs and several transcription factor expression plasmids. Compared to each -1kb-bIFNT1/c1-Luc increased when this constructs were co-transfected with, ETS2, AP1(JUN), CREBBP and/or CDX2. Also, bIFNTc1 gene was had very effect on activity by alone ETS2, and AP1 (JUN) expression factors in choriocarcinoma JEG3 cell. However, bIFNT1 gene expression of the upstream region was not identified. We demonstrated that the activities of bIFN genes are regulated by differential, tissue-specific and developmental competence during pregnancy.
Serial ultrasonographic examinations were daily performed from 15 days after ovulation until parturition to determine the time of first detection and ultrasonographic appearance of the fetal and extra-fetal structures in pregnant 10 Maltese, 10 Yorkshire Terrier, 15 Shih-tzu, and 10 Miniature Schnauzer bitches, respectively. Gestational age was timed from the day of ovulation (day 0), which was estimated to occur when plasma progesterone concentration was first increased above 4.0ng/ml. The gestational length was $63.4{\sim}63.6$ (range: $61{\sim}65$) days and the geatational length was no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the extra-fetal structures were; gestational sac at days $18.9{\sim}19.5\;(17{\sim}22)$, zonary placenta at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}28)$, yolk sac membrane at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}27)$, yolk sac tubular shape at days $26.1{\sim}26.3\;(24{\sim}28)$, and amniotic membrane at days $26.1{\sim}28.2\;(24{\sim}31)$, respectively. The time of the first detection of the extra-fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the fetal structures were; embryo initial detection at days $22.5{\sim}22.9\;(21{\sim}24)$, heartbeat at days $23.2{\sim}23.8\;(21{\sim}25)$, embryo bipolar shape $27.6{\sim}28.9\;(26{\sim}30)$, fetal movement at days $31.9{\sim}32.8\;(27{\sim}34)$, limb buds at days $29.1{\sim}30.7\;(27{\sim}33)$, stomach at days $31.1{\sim}33.1\;(29{\sim}34)$, urinary bladder at days $32.4{\sim}33.2\;(29{\sim}35)$, skeleton at days $34.7{\sim}35.9\;(34{\sim}39)$, and kidney at days $42.1{\sim}44.7\;(41{\sim}48)$, respectively. The the time of the first detection of the fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). These results indicate the evaluation of the time of first detection and ultrasonographic characteristics of the gestational structures might be useful for pregnancy diagnosis, estimating fetal age, embryonic resorption, fetal monster, abnormal fetal growth and fetal viability, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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