The objective of this study was to investigate the antitumor activity of suspension cultures of tea callus cells grown in the presence of different concentrations of the growth regulator 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) with or without light irradiation. The methanol and ethanol extracts of precipitated cells (MEP, EEP) exhibited stronger inhibitory effects on the growth of tumor cell lines than the water extract of precipitated cells (WEP) or the supernatant Compared to culture under dark conditions, exposure to light irradiation led to significantly higher antitumor activity. The MEP from light irradiated cells at $250{\mu}g/mL$ with 2.0mg/L 2,4-D displayed more than 64% growth inhibition of HEP-2 cells, whereas normal cells showed less than 25% growth inhibition. The some fractions of MEP obtained from Diaion HP-20 column chromatography displayed the majority of inhibitory activity against the HEP-2 cell line. These results show that 2,4-D, and light stimulated the synthesis of antitumor compounds.
Response of medicinal plants(58 species in 28 families) cultivated or naturally grown in Korea on paraquat (1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridinium ion) was determined. All the plants, except for Jiwhang(Rehmannia glutinosa Liboch.) were killed by paraquat at 0. 8kg $ha^{-1}$. Jiwhang showed a great resistance to paraquat. The phytotoxic effect did not occur in Jiwhang with paraquat applied at 3.2kg $ha^{-1}$. Only 10% growth inhibition of Jiwhang was obtained at 4.8kg $ha^{-1}$. Normal growth of Jiwhang also occurred when at 0.8kg $ha^{-1}$ of paraquat different application dates from 2 leaf stage(LS) to 8 LS and/or five-repeated applications at 20-day intervals starting from 3 LS were employed. However, Jiwhang was completely killed by glyphosate[N-(phosphonomethyl) glycine], 2,4-D[2,4-dichlorophenoxy) acetic acid], and dicamba[3,6-dichloro-2-methoxy benzoic acid]+2, 4-D at the respective recommended rates.
Herbicidal effectivity on perennial paddy weeds such as Sagittaria pygmaea Miq. and Eleocharis kuroguwai Ohwi was evaluated. Herbicides used were butachlor [2-chloro-2, 6-dietyl-N(butoxymethyl)-acetanilide], benthiocarb [S-(4-chlorobenzy)-N, N-diethyl-thiocarbamate], molinate (S-ethyhexahyaro-l-Hazpine-carbothiate], SW-751, Chlormethoxynil (2.4-dichlorophenyl-3-methoxy-4-nitrophenyl-ether), CNP (2.4.6-trichlorophenyl-4-nitrophenylether),oxadiazon [2-tertbutyl-4-(2.4-dichloro-S-isopropoxyphenyl)-5-OXO-1.3.4-Oxadiazoline], dinuron [1-dimethyl-benthyl)-3-pheratrylurea], bentazon [3-isopropyl-IH-2.1.3-benzothiadiazine-(4)3H-one-2.2-dioxide], ACN (3-chloro-2-amino-l.4-naphthoquinone), MCPB [4-(2-methyl-4chlorophenoxy), butyric acid], 2.4-D (sodium 2.4-dichlorophenoxy acetic acid), MCP) sodium 2-methyl-4-chlorophenoxy acetic acid), SST-5, TH 63. Graszin D (Bentazon/2.4-D) and Graszin M (Bentazon/MCP) Herbicidal effectivity was divided into three types. Type I was the complete control both leaf and tuber, and SW-751 was belonged to this type. Type II was the partial control that exhibit complete control within certain period after herbicide application. After a certain period, however, the lateral bud have the germinability and grow normally, there after. Chloromethoxynil, CNP, ACN, and Oxadiazon were belonged to this group. Type III was no control at all. For E. kuroguwai, application of CNP, Chloromethoxnil, Oxadiazon and SW-751 gave good control in the early stage shile 2.4-D, MCP, bentazon and glaszin-D controlled well the intermediate stage application. Based on this results, E. kuroguwai can be controlled by herbicide application either in the early stage or in the intermediate stage.
To investigate the optimal conditions for shoot organogenesis in Astragalus sinicus L., hypocotyl explants were cultured in Murashige & Skoog's (MS) medium supplemented with 0.1, 1.0, 2.0, or 4.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) for 6 weeks. 2,4-D concentration significantly effected morphogenesis: some produced calli with adventitious shoots and roots, some produced calli with adventitious roots, some produced only calli, and some produced deep-brownish calli with roots. The formation of calli with shoots and/or roots was observed at lower levels of 2,4-D, whereas calli without shoots or with deep-brownish roots were formed after treatment with higher levels of 2,4-D. Also, a shoot organogenesis ability of callus clones was observed after treatment with medium with 0.1 or 1.0 mg/L 2,4-D grown in MS medium with combinations of benzyl adenine (BA) and 2,4-D for 4 weeks. Medium with a combination of BA and 2,4-D was effective for shoot formation, whereas root organogenesis from calli decreased. The greatest amount of shoot formation was obtained when calli were cultured in MS medium containing 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA. Upon shoot transfer into 1/2 MS basal medium, plantlets developed, and the plantlets grew well in soil in a greenhouse.
Embryogenic callus was induced from the cultures of immature embryos of Camellia japonica L. on Murashige & Skoog's (MS) solid medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D), and then the embryogenic callus was proliferated on same medium for 4 weeks over. The embryogenic callus was sub-cultured on MS basal medium without 2,4-D to produce coyledonary stage of somatic embryo. The frequency (%) of somatic embryogenesis was 25.1%, and the majority of somatic embryos formed had a abnormal morphology with cupshaped cotyledon (48.3%), one cotyledon (12.6%), three cotyledons (9.4%), four cotyledons (1.9%), whereas was only normal morphology with two cotyledon (27.5%). When the somatic embryos with normal or abnormal cotyledons transfer to MS basal medium or $\frac{1}{2}$ MS medium with/or without plant growth regulators ($GA_3$, IBA) for regeneration, the frequency (%) of two-cotyledon embryos regenerated into plantlets was higher 11.1% than one cotyledon (0.0~8.3 %), three cotyledons (0.0~5.8%), four cotyledons (0.0%), cup-shaped (0.3~4.2%). These results demonstrated that the anomalous cotyledons of somatic embryos could caused to decrease the rate of plant regeneration.
In order to find out the best media, explants and environmental conditions for induction of calluses and organogeneses of Pinellia ternata (Thunb.) Breit in vitro, various parts of adult have been cultured on Murashige & Skoog's medium containing various levels of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid(2,4-D) and kinetin. The results obtained were as follows: Calluses were induced from the surface of apical meristem and leaf tissue. Formation and growth of calluses in petiole ex plants were best on the MS medium complemented with 2,4-D 2.0 mg/l and kinetin 0.2mg/l. But callus formation in stem ex plants of the nearest tuber was not induced at all kinds of media. Plantlets occured at all treatment except absence of growth regulator. Their numbers, size, leaf and fresh weight were promoted by 2,4-D 2.0mg/l and kinetin 0.2mg/l. Root growth was increased on the medium containing higher 2,4-D concentrations. Size and fresh weight of callus were increased at 25$^{\circ}C$ compared with 10, 20 and 30$^{\circ}C$, respectively. Optimal pH value was at 6.0 for growth of callus. Morphological aberrations were observed in plantlets, especially in regenerated leaves. The separation of the broad leaved plantlets and albino were observed in some cultures. Growth of plantlets after transplantation was best in pots with the sterilized vermiculte. But abnormal variants withered up.
To investigate the cucumber regeneration from embryogenic calli, shoot tips of aseptically-grown cucumber seedlings were used as explants for establishing tissue cultures. Growth and differentiation of callus were studied by using Murashige and Skoog's (MS) medium containing 0.5 to 2 mg/L 2,4-D. Plantlets were induced from shoot tip culture on the plant growth regulators-free MS medium. Non-embryogenic calli and viscous calli were induced on the medium supplemented with 0.5 to 2 mg/L 2,4-D, but embryogenic callus was not induced on the same medium. Segments (ca. 5∼10 mm) of aseptically-grown hypocotyl from five to seven days old seedlings after germination were placed on MS medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D for 50 days. Embryogenic calli and embryoids were induced only from the seedlings grown in dark condition, and hypocotyl was placed on the media explanted in light condition. Foully-five point one percent of white fragile calli and 0.6% yellowish compact calli formed roots. Yellowish callus lines were investigated to have a considerably higher concentration of crude proteins than white callus lines. Plantlets derived from embryogenic calli or embryoids have been transferred to pots containing sterile vermiculite and perlite. Normal fruits were harvested from nutrient culture on aggregated hydroponics in the F-clean house.
Kim Do-Hyun;Lee Dong-Gi;Lee Sang-Hoon;Woo Hyun-Sook;Lee Ki-Won;Choi Myung-Suk;Lee Byung-Hyun
Journal of Plant Biotechnology
/
v.32
no.3
/
pp.187-193
/
2005
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.), an efficient plant regeneration system from seed-derived calli was established. MS medium containing 6 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and 0.1 mg/L benzyladenine (BA) were optimal for embryogenic callus formation from mature seed and had a strong effect on successive plant regeneration. The plant regeneration frequency above 50% was observed when embryogenic calli induced in this medium were transferred to N6 medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L BA. Among several basic media, MS and N6 medium were optimal for callus induction and plant regeneration, respectively. 'Kentucky-31' showed to have high frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 58.3 and 50%, respectively. Addition of sucrose to the regeneration medium as a carbon source increased regeneration frequency up to 55%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of tall fescue through genetic transformation.
Immature embryos of Glycine max L. was cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D). After 6 to 8 weeks of culture, immature embryos produced somatic embryos. Of somatic embryos, two cotyledonary embryo (14%), one cotyledonary embryo (37%), fused cotyledonary embryo (43%), and stunted globular embryos (6%) were observed. The procambial strand of cotyledons originated from circular procambial tissues of lower hypocotyl. The circular procambial tissues were independently divided into one or two procambial strand at the edge of cotyledonary-node, and then connected to each cotyledon to form somatic embryos with one or two cotyledons. When cotyledon was a fused type, the circular procambial strand in lower hypocotyl was continuously connected to the cotyledon. Also, somatic embryos with two cotyledons developed a functional shoot apex with the tunica-corpus structure. In contrast, somatic embryos with one or fused cotyledon formed an abnormal shoot apex without the tunica-corpus structure or with non-dome shape in the inter-cotyledonary area. These results indicated that the variation of cotyledon in somatic embryos is closely related to procambial differentiation and shoot apical meristem development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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