• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제22권4호
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• pp.309-318
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• 2018

The present study was conducted to investigate the regulatory mechanism of plasminogen activators (PAs) activation by $17{\beta}$-estradiol ($E_2$) and progesterone ($P_4$) in porcine uterine epithelial cells (pUECs). pUECs were collected from porcine uterine horn and cultured at 80% confluence. Then, 0.1% (v/v) DMSO, 20 ng/mL $E_2$, and $P_4$ with or without fetal bovine serum (FBS) treated to cultured cells for 24 hours. The supernatants were used for measurement of PAs activity and expression of urokinase-type PA (uPA), tissue-type PA (tPA), uPA specific receptor (uPAR), and type-1 PA inhibitor (PAI-1) mRNA were analyzed by real-time PCR. The expression of PAs-related genes was not affect by steroid hormones in both of serum treatment groups. However, PAs activity was increased by treatment of $E_2$ compared to 0.1% DMSO treatment in serum-free group (p<0.05). Then, $E_2$ and $P_4$ were diluted with 0.002% (v/v) DMSO for reduction of its effect and treated to cultured cells without FBS. Only tPA mRNA was significantly increased by $E_2$ treatment (p<0.05). PAs activity was enhanced in $E_2$ treated group compared to control groups (p<0.05). These results indicate that serum-free condition is more proper to evaluate effect of steroid hormones and activation of PAs in pUECs was mainly regulated by estrogen. These regulation of PAs activation may be associated with uterine remodeling during pre-ovulatory phase in pigs, however, further studies are needed to investigate precise regulatory mechanism.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제12권3호
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• pp.275-281
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• 2008

본 연구에서는 해산어를 이용하여 bisphenol A(BPA)와 nonylphenol(NP)이 난모세포 성숙 과정에 어떤 영향을 미치는지 조사하기 위해 성숙단계에 있는 노래미(Hexagrammos agrammus) 난모세포(난경 약 1.88 mm)를 대상으로 in vitro에서 BPA와 NP 처리에 의한 난모세포의 성스테로이드 생성농도를 조사하였다. 난모세포에 BPA와 NP를 농도구별(0.1, 1, 10, 100, 1,000 ng/$m{\ell}$)로 첨가하고, 50 IU의 human chorionic gonadotropin(HCG)를 농도구별 BPA 또는 NP와 함께 첨가하거나 하지 않고 48시간 동안 배양하였다. 배양 후 배양액 내의 $17{\alpha},20{\beta}$-dihydroxy-4-pregnen-3-one($17{\alpha}20{\beta}OHP$), estradiol-$17{\beta}(E_2)$ 그리고 testosterone(T)의 농도를 방사면역측정법(RIA)을 통해 정량하였다. BPA 처리구에서는 100 ng/$m{\ell}$의 농도구에서 HCG 처리 유무에 상관없이 $E_2$ 생성이 촉진되었다. HCG 처리하에서 0.1 ng/㎖의 농도구에서 T 생성은 촉진 되었으나, HCG를 처리하지 않은 실험구의 모든 농도구에서 T 생성은 저해되었다. NP 처리구에서는 HCG를 처리하지 않은 실험구의 10 ng/$m{\ell}$의 농도구에서 $17{\alpha}20{\beta}OHP$와 T 생성이 촉진되었고, 1 ng/$m{\ell}$의 농도구에서는 $E_2$ 생성이 억제되었다. 이상의 결과를 종합하면, 노래미의 성숙단계의 난모세포에서 BPA는 약한 estrogen-agonistic 효과를, NP는 estrogenantagonistic 효과를 지니는 것으로 사료된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제22권3호
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• pp.218-222
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• 2007

에스트로젠 수용체와 리포터 유전자인 ${\beta}-galactosidase$가 도입된 효모재조합검색시험법을 이용하여 DEHP와 DBP의 내분비계 장애작용을 검색하였다. 양성대조 시험물질로 $17{\beta}-estradiol$을 설정하여 DEHP와 DBP의 에스트로젠 활성을 비교분석 하였을 때, $17{\beta}-estradiol$의 경우 $10^{-9}M$에서 가장 활성이 높게 관찰되었다. DEHP의 경우 $10^{-10}M$에서 $10^{-7}M$까지 시험하였을 때 농도의존적으로 에스트로젠활성이 증가하였으며, $10^{-7}M$의 경우 가장 강력한 에스트로젠활성을 보였다. DBP의 경우 $10^{-9}M$에서 $10^{-6}M$까지 에스트로젠활성이 관찰되었다. DEHP와 DBP의 경우 최대활성화 대비 50% 이상의 활성도를 보이기 시작하는 농도가 $10^{-9}M$로 나타나서 비슷한 농도에서 에스트로젠 활성화가 이루어지는 것으로 추측할 수 있었다. 그러나, 에스트로젠 최대활성화 시의 농도를 비교해 보면 DBP가 DEHP보다 10배 낮은 농도에서 최대활성치가 관찰되었기 때문에 DBP가 DEHP보다 에스트로젠 작용에 더 민감하게 반응하는 것으로 판단할 수 있었다. 결과적으로 본 실험에 사용되어진 시험물질인 DEHP와 DBP는 효모재조합시험법에 있어서 에스트로젠 활성을 유도하는 것으로 판단되어지며 감수성에 있어서는 DBP가 DEHP보다 높은 것으로 여겨진다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제22권3호
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• pp.209-212
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• 2007

내분비 교란 물질 중에서 최근에 문제가 되고 있는 물질이 프탈레이트계통 물질로서 플라스틱의 가소제로 사용하고 있는 DEHP와 DBP에 대하여 사람유방암세포 이면서 에스트로젠 의존성을 가지고 있는 MCF-7 세포에서의 세포 증식 정도를 농도 별로 측정하여 두 물질의 에스트로젠 작용가능성에 대하여 조사하였다. 시험물질인 DEHP와 DBP의 MCF-7 세포의 최대 증식 시의 농도를 조사해 본 결과, DEHP는 $17{\beta}-Estradiol$에 비하여 100배정도 높은 농도인 $10^{-7}M$ 에서 최대 증식능력을 보였고, DBP는 10배정도 높은 $10^{-8}M$ 에서 최대 증식능력을 보였다. 최대 증식 능력을 보일 때의 양성대조물질인 $17{\beta}-Estradiol$와 증식 정도 차이를 비교하였을 때에는 DEHP는 양성대조군 대비 87.5%의 증식 정도를 나타내었고, DBP는 73.4%의 증식 정도를 나타내었다 결론적으로 DEHP와 DBP 두 물질 모두 MCF-7 세포의 증식에 영향을 주는 것으로 판단되었으며, 최대 작용농도에 있어서는 DBP>DEHP, 세포 증식 정도에 있어서는 DEHP>DBP 인 것으로 판단되어 진다.

• 한국어류학회지
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• 제12권3호
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• pp.173-179
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• 2000

Estradiol-$17{\beta}(E_2)$와 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2, 4- D)가 난황 전구물질의 합성에 미치는 영향을 넙치 Paralichthys olivaceus 간세포의 초대 배양을 통하여 조사하였다. 배양간세포의 생존율은 배양온도 $27^{\circ}C$에 서 가장 높게 나타났으며, $15^{\circ}C$에서는 생존율이 급격히 감소하여 약 50%의 생존율을 나타내었다. $E_2$에 의한 VTG 의 합성은 $10^{-6}M$에서 최대치를 나타내었다. 2, 4-D $10^{-7}\sim10^{-5}M$의 첨가에 의해 VTG의 합성은 이루어지지 않았다. 그러나, 저농도인 $10^{-8}M$에서는 VTG의 합성이 증가하였다. $E_2$ 및 2, 4-D에 의해 합성된 VTG는 $10^{-6}M$ tamoxifen의 첨가에 의해 유의하게 억제되었다 (P<0.01). 본 연구 결과에서 $E_2$와 2, 4-D의 동시 첨가는 VTG의 합성을 억제하지 않았다. 이러한 결과는 2, 4-D의 작용이 $E_2$와 유사한 작용을 가지지만, VTG의 합성에 있어서 $E_2$ 수용체에의 작용 양식은 서로 다른 것으로 추정된다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제11권3호
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• pp.179-185
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• 2007

Estrogen과 estrogenic endocrine disrupting chemicals(EDCs)는 주로 스테로이드 수용체와 작용하여 다양한 표적 단백질 유전자의 전사를 조절한다. 구조적으로 estrogen 수용체와 유사한 estrogen 수용체형 수용체(estrogen receptorrelated receptor, ERR)는 포유동물에서 배발생 후기에 외배엽 형성과 관련되어 있다고 알려진 고아핵수용체(orphan nuclear receptor)이다. 본 연구에서는 해양무척추동물인 둥근성게(Strongylocentrotus nudus)의 발생배를 재료로 estradiol-$17{\beta}(E_2)$과 EDCs의 일종인 nonylphenol(NP)이 발생과정의 형태학적 변화와 $ERR{\beta}$ like 1의 mRNA발현에 미치는 영향을 조사하였다. $E_2$와 NP가 처리된 발생배는 발생속도가 지연되었으며, 초기 유생기에 가까운 후기배의 비정상적인 발달형태가 관찰되었다. 수정란부터 초기 유생기까지 측정한 결과, 이들 화학물질에 의해 $ERR{\beta}$ like 1 mRNA는 포배기에 급격히 감소하는 패턴을 보였다. 이상의 결과는 둥근성게의 초기 배가 $E_2$와 NP에 의해 비정상적으로 발생되며, $ERR{\beta}$ like 1의 감소가 이 비정상적 배발생과 관련되어 있음을 시사한다.

• 한국환경생물학회:학술대회논문집
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• 한국환경생물학회 2002년도 학술대회
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• pp.141-144
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• 2002

Environmental estrogens are natural or synthetic substances present in the aquatic environment, especially in effluent from sewage treatment. However, the adverse effects of these estrogenic substances on fish reproduction are unknown. Di-2-ethylhexyl phthalate (DEHP) is the most common phthalate, which Ps used as a plasticizer in polyvinylchloride (PVC), and it is widespread in the environment and has been found in aquatic organisms and sediments. Therefore, juvenile common carps (Cyprinus carpio) were exposed to nominal concentrations of 17$\beta$-estradiol (E2) (0.5, 5, 50 $\mu\textrm{g}$/L) and DEHP (10, 100, 500 $\mu\textrm{g}$/L) for 21 days, to determine the adverse reproductive effects of these compounds on plasma vitellogenin (VTG) induction, sex steroid level, and gonad weight. Electrophoresis (SDS-PAGE) revealed that much of VTG was induced in fish exposed to 5 and 50 E$_2$ $\mu\textrm{g}$/L, but none of DEHP exposure showed induction. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) revealed that VTG was significantly induced in fish exposed to 5 and 50 E$_2$ $\mu\textrm{g}$/L, and combination of 50 E$_2$ $\mu\textrm{g}$/L with 10 and 500 DEHP $\mu\textrm{g}$/L, but none of DEHP exposure showed induction. Analysis of sex steroid levels in some fish revealed that testosterone (T) was detected in both male and female fish of the control and DEHP exposures, but none of fish exposed to 22 concentrations had detectable testosterone level. On the other hand, E$_2$ exposure induced 17$\beta$-estradiol in plasma of male fish, but there was no induction of 17$\beta$-estradiol in plasma of male fish exposed to DEHP. Comparison of gonadosomatic index (GSI) revealed that maximal E$_2$ exposure inhibited ovarian growth, but maximal DEHP exposure stimulated testicular growth. The results indicated that those comparisons can be a useful bio-indicator for determining adverse reproductive effect of endocrine disrupting chemicals (EDCs).

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제52권3호
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• pp.175-186
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• 2010

The aim of this study was to analyze the proteome expressions of proliferating stromal vascular cells from Hanwoo omental, subcutaneous and intramuscular depots subjected to hormone deprivation and IGF-1, Estradiol-$17{\beta}$ addition. For hormone deprivation or addition studies, the cells were either grown in 10% charcoal-dextran stripped fetal bovine serum (CD-FBS) or in 10% FBS supplemented medium. Further, to analyze the effect of insulin like growth factor (IGF-1) and $17\beta$-Estradiol (E2), cells were grown in 10% CD-FBS containing IGF-1 (10 ng/ml) or E2 (10 nM). The results showed that hormone deprivation had a negative impact on proliferation among the cells from all depots without any growth difference. On comparison of proliferation levels, higher levels were observed in cells that were grown in 10% FBS than in 10% CD-FBS alone or with IGF-1/E2. Proteome expression from preadipocytes grown in hormone deprivation conditions were compared by 2D-DIGE and MALDIToF/ToF. A total of twelve different proteins were found to be differentially expressed under hormone deprivation conditions. Further, our proteomic analysis with DIGE under IGF-1 and E2 addition revealed four proteins with differential expression levels. Moreover, the results highlighted in this study offer a role for each differentially expressed protein with respect to their effect in positive or negative regulation on proliferation.

• 농업과학연구
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• 제12권1호
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• pp.70-74
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• 1985

한국재래산양(韓國在來山羊)에 대하여 혈청(血淸) LH, FSH, prolactin, estradiol-$17{\beta}$ 및 progesterone의 농도(濃度)를 교배일(交配日)로부터 20일간격(日間隔)으로 140일(日)까지와 분만당일(分娩當日) 및 분만후(分娩後) 10일(日)과 20일(日)에 조사(調査)하였다. 혈청(血淸) LH의 농도(濃度)는 임신(姙娠) 60일(日)에 1.95mIU/ml로 최고치(最高値)였고, 임신(姙娠) 100일(日0까지는 높은 수준(水準)이었으나 그 후(後)로는 급격(急激)히 감소(減少)하여 분만시(分娩時)에는 0.02 mIU/ml를 나타냈다. Prolactin의 농도(濃度)는 임신(姙娠) 140일(日)부터 급격(急激)히 증가(增加)하여 분만시(分娩時)에는 29.75 ng/ml로 최고치(最高値)였으며, 분만후(分娩後)에는 다시 감소(減少)하였다. FSH는 모든 관찰시간(觀察時間)에서 분절하한치(分折下限値)인 1.25 mIU/ml 이하(以下)의 수준(水準)이었다. 혈청(血淸) estradiol-$17{\beta}$의 수준(水準)은 임신기간(姙娠期間)이 경과(經過)할수록 증가(增加)하였으며, 분만시(分娩時)에는 159.62 pg/ml로 최고치(最高値)였고, 분만후(分娩後)에는 월등(越等)히 감소(減少)하였다. 혈청(血淸) progesterone은 임신(姙娠) 120일(日)에 6.62 ng/ml로 최고치(最高値)였고, 그 후(後)로는 감소(減少)하여 분만시(分娩時)에는 1.25 ng/ml로 매우 낮은 수준(水準)이었다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제28권4호
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• pp.315-318
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• 2013

This study was conducted to investigate the changes of hormone levels of serum progesterone (P4) and estradiol-$17{\beta}$ (E2) in sows of Landrace (L), Yorkshire (Y) and F1 (L ${\times}$ Y) (respectively n=3) with excellent ability, and to provide a baseline data for improving reproductive performance. In this experiment, the sows at the age of 12 months or more were used. The sows were fed by two way methods, one is conventional methods and the other is 3 days-flushing feed before estrus. Each pig's blood was collected in 3, 6, 9, 12, 15 and 18 days after the estrus for the analyses of P4 and E2. Serum was separated by centrifugation for 15 min. with 3,000 rpm. Progesterone and estradiol-$17{\beta}$ were measured by immunochemical assay (ELIZA test). In conventional feeding, serum progesterone levels were significantly (p<0.01) higher in F1 than in L and Y. No significant differences in P4 concentrations were seen between the L and Y of sows. Serum E2 levels were similar the serum progesterone levels. In the case of flushing feed, the tendency of hormonal changes were similar to conventional methods. But almost of hormonal levels were a little higher than that of conventional methods. P4 level of L and Y in flushing feed were significantly different (p<0.01). Serum E2 level of Y in flushing feed was significantly different among the breeds (p<0.01). These results were similar to the tendency of hormonal changes in general sows and moreover, flushing feed is known to develop the swine production, these results proved the fact of the methods. And these results suggested that more studies about hormonal changes in sows according to seasonal and nutritional factors should be needed.