Sabriye, Canakci;Inan, Kadriye;Murat, Kacagan;Belduz, Ali Osman
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권8호
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pp.1262-1270
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2007
Some hot springs located in the west of Turkey were investigated with respect to the presence of thermophilic microorganisms. Based on phenotyping characteristics and 16S rRNA gene sequence analysis, 16 of the isolates belonged to the genus Geobacillus and grew optimally at about $60^{\circ}C$ on nutrient agar. 16S rRNA gene sequence analysis showed that these isolates resembled Geobacillus species by ${\ge}97%$, but SDS-PAGE profiles of these 16 isolates differ from some of the other species of the genus Geobacillus. However, it is also known that analysis of 16S rRNA gene sequences may be insufficient to distinguish between some species. It is proposed that recN sequence comparisons could accurately measure genome similarities for the Geobacillus genus. Based on recN sequence analysis, isolates 11, IT3, and 12 are strains of G stearothermophilus; isolate 14.3 is a strain of G thermodenitrificans; isolates 9.1, IT4.1, and 4.5 are uncertain and it is required to make further analysis. The presence of xylanase and arabinofuranosidase activities, and their optimum temperature and pH were also investigated. These results showed that 7 of the strains have both xylanase and arabinofuranosidase activities, 4 of them has only xylanase, and the remaning 5 strains have neither of these activities. The isolates 9.1, 7.1, and 3.3 have the highest temperature optima ($80^{\circ}C$), and 7.2, 9.1, AO4, 9.2, and AO17 have the highest pH optima (pH 8) of xylanase. Isolates 7.2, AO4, AC15, and 12 have optimum arabinofuranosidase activities at $75^{\circ}C$, and only isolate AC15 has the lowest pH of 5.5.
식물의 토양전염병을 유발하는 P. aphanidermatum 및 R. solani에 대한 길항력, 생장속도 및 표면장력 감소를 고려한 RPI (relative performance indices) 기법을 이용하여 90 여개 후보균 중 #16 길항균을 선정하였다. 선정된 Bacillus sp. #16은 16S rRNA 서열을 분석한 후 GenBank에서 비교한 결과 B. subtilis DSM10과 99% 유사성을 보였다. 또한 pot test 결과 오이 모잘록병에 대해 우수한 방제가를 보였다.
DNA의 제한요소단편 다형현상(RFLP)이 유전변이 연구에 널리 이용되고 있다. 본 연구는 파밤나방(Spodoptera exigua(H bner)) 미토콘드리아 DNA(mtDNA)의 RFLP방법을 개발하기 위해 게놈 크기 측정 및 PCR primer들을 선발하였다. 파밤나방의 mtDNA 전체크기는 약 16kb였다. 대부분 곤충 mtDNA에 적합하게 구성된 (Simon et al., 1994)29개 promer들중 21개가 파밤나방의 mtDNA증폭에 적합했다. 이들 primer들을 이용하여 여러 유전자 영역(CO-I, CO-II, Cyt-B, ND-1, 12S rRNA, 16S rRNA 및 일부 tRNA)의 일분 또는 전체를 포함하는 유전자 절편을 증폭시켰다. 일반적으로 다형을 보이는 primer조합을 중심으로 4염기 제한부위를 인식하는 8종의 제한 효소를 통해 분석된 PCR-RFLP는 서로 다은 지역(안동, 경산, 순천) 집단들간에 제한부위에 있어서 차이가 없었으나 일부 영역에서는 길이 차이를 보여 유용한 유전지표로서의 가능성을 제시했다.
Blueberry red ringspot virus (BRRSV) and blueberry scorch virus (BlScV) are included in the quarantine virus list managed by the Korean Animal and Plant Quarantine Agency. A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay with an internal control was developed for the simultaneous detection of both viruses. The specific primers used here were designed based on the highly conserved regions of the genomic sequences of each virus, obtained from the National Center for Biotechnology Information nucleotide databases. The primers were designed to amplify a partial sequence within coat protein (CP) for detecting BRRSV and a partial sequence within the CP-16 kDa for detecting BlScV. 18S ribosomal RNA (rRNA) was used as internal control, and the primer set used in a previous study was modified in this study for detecting 18S rRNA. Each conventional PCR using the BRRSV, BlScV, and 18S rRNA primers exhibited a sensitivity of approximately 1 fg plasmid DNA. The multiplex PCR assay using the BRRSV, BlScV, and 18S rRNA primers was effective in simultaneously detecting the two viruses and 18S rRNA with a sensitivity of 1 fg plasmid DNA, similar to that of conventional PCR assays. The multiplex PCR assay developed in this study was performed using 14 blueberry cultivars grown in South Korea. BRRSV and BlScV were not detected, but 18S rRNA was all detected in all the plants tested. Therefore, our optimized multiplex PCR assay could simultaneously detect the two viruses and 18S rRNA in field samples collected from South Korea in a time-efficient manner. This approach could be valuable in crop protection and plant quarantine management.
목적: 우리 나라 소아에 감염된 H. pylori에서 PCR RFLP를 이용하여 clarithromycin 내성의 원인으로 알려진 23S rRNA의 돌연변이를 찾아내고, cagA, vacA 유전형과 clarithromycin 내성 돌연변이 사이에 연관이 있는지 알아보고자 하였다. 방법: 서울대학교병원 소아과에서 위내시경검사를 통해 H. pylori 위염으로 진단 받은 환아 27명의 내시경 생검 조직에서 H. pylori cagA, vacA 유전자를 증폭하여 유전형을 조사하였다. H. pylori의 23 rRNA V domain을 조사하기 위해 증폭한 후, PCR 산물은 BsaI과 MboII 제한효소로 처리하여 PCR RFLP를 이용하여 돌연변이 여부를 판정하였다. 결과: A2143G 돌연변이가 1명에서, A2144G 돌연변이가 4명에서 발견되어 18.5%가 clarithromycin 내성으로 관찰되었다. cagA 양성이 25명(93%)이었고, vacA s1a/m1이 6명(22%), s1a/m2가 3명(11%), s1c/m1이 16명(59%), s1c/m2가 1명(4%)이었다. clarithromycin 내성 돌연변이를 보이는 경우는 모두 cagA 양성이었고 s1a/m1이 2명, s1c/m1이 2명으로 특정 유전형이 clarithromycin 내성 돌연변이와 연관성을 보이지 않았다. 결론: 위점막 조직에서 PCR-RFLP를 이용한 H. pylori의 clarithromycin 내성 검사는 항생제를 선택하는데 유용하다고 생각된다. Clarithromycin 내성 돌연변이는 cagA, vacA 유전형과 연관성이 없었다.
The partial 16S gene sequences of six filamentous cyanobacterial strains, Oscillatoria lmosa KCTC AG10168, Oscillatoria princeps KCTC AG10153, Oscillatoria sp. KCTC AG 10184, Phormidium tenue KCTC AG10158, Phormidium parchydematicum KCTC AG10164, and Lyngbya hieronymusii KCTC AG10199, which were isolated in the late summer at Daecheong Reservoirs, were determined and assigned their phylogenetic and taxonomic position among taxa of order Ocillatoriales whose partial 16S rRNA gene sequences aligned in this suty, were very heterogeneously clustered with other taxa. The two strains, Oscillatoria limosa KCTC AG10168 and O. princeps KCTC AG10153, formed a cluster with O. sancta PCC7515, which supported 64% of the bootstrap trees with high similarity (19-96.15%). Strain Oscillatoria sp. KCTC AG10184, that was known to produce a nasty substance, was closely related to the toxic Oscillatoria group. The study on morphological variation in various environments and toxin production will confirm the taxonomic status of these species. Phormidium tenus KCTC AG10158 and Phormidium parchydematicum KCTC AG10164 made a cluster with other oscillatorian species of Phormidium, Oscillatoria, and Leptolynbya, which supproted 100% of the bootstrap trees with a very high sequence smilarity (96.8-99.8%) in thsi study. The sequence analysis in this study also supported that taxa of oscillatoriales are not monophyletic. Some of the fractures, such as the presence or absence of sheath and cell shape, which were used to define them, would be inadequate and should be reconfirmed. We suggest that sequences of partial 16S rRNA gene fragments aligned in this study should be more useful than morphological features in the identification and reconfirmation of the taxonomic status of these oscillactorian cyanobacteria.
Kim, Minji;Lee, Ki-Eun;Cha, In-Tae;Lee, Byoung-Hee;Park, Soo-Je
Journal of Species Research
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제9권4호
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pp.339-345
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2020
The Earth contains billions of microbial species, although the vast majority cannot be cultured in laboratories and are thus considered unidentified and uncharacterized. Extremophiles are microorganisms that thrive in extreme conditions, including temperature, salinity, and pH. Extremophilic microorganisms have provided important insights for biological, metabolic, and evolutionary studies. Between 2017 and 2019, as part of a comprehensive investigation to identify bacterial species in Korea, eight bacterial strains were isolated from marine and non-marine environments in Jeju Island. These strains were cultured under extreme salinity or pH conditions. Phylogenetic analysis using 16S ribosomal RNA(rRNA) gene sequencing indicated that all eight strains belonged to the phyla Gammaproteobacteria, Bacilli, and Alphaproteobacteria. Based on their high 16S rRNA gene sequence similarities(>98.7%) and the formation of strong monophyletic clades with their closest related species, all isolated strains were considered as an unrecorded strain, previously unidentified species. Gram stain reaction, culture conditions, colony and cell morphology, biochemical characteristics, isolation source, and National Institute of Biological Resources(NIBR) IDs are described in this article. The characterization of these unrecorded strains provides information on microorganisms living in Korea.
한강의 본류와 만나는 탄천과 중랑천에서 16S rDAN를 증폭하고 부분적인 염기서열 분석을 통하여 한강의 세균 다양성을 결정하였다. 총 27개의 클론을 분리하였으며 RFLP를 이용하여 7개의 group으로 나누었다. 탄천의 15개 클론은 4개의 group으로 나뉘어졌으며 가장 많은 클론을 포함하는 group(HT-1 클론)은 class Proteobacteria의 ${\delta}$-subdivision에 속하는 Acrobacter cryaerophilius와 높은 유사도를 보였으며, 다른 두 group(HT-6과 HT-9 클론)은 모두 clas Cytophagales에 속하였다. 중랑천의 12개의 클론은 3개의 group으로 나뉘어졌으며 가장 많은 클론을 보이는 group(HJ-1 클론)은 class Proteobacteria의 ${\alpha}$-subdivision에 속하는 Sphingomonas sp. 와 높은 유사도를 나타내었다. 전체적으로는 Proteobateria(alpha, beta and delta subdivision), Cytophagales와 Actinomycetales가 검출되었다.
Mitis group streptococci (MGS) were classified based on the nucleotide sequences 16S rRNA gene (16S rDNA) and comprised 13 Streptococcus species. However, 16S rDNA homogeneity among MGS was too high to discriminate between clinical strains at the species level, notably between Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus pneumoniae, and Streptococcus pseudopneumoniae. The purpose of this study was to discriminate between 37 strains of MGS isolated from Korean oral cavities using phylogenetic analysis of the DNA-dependant RNA polymerase beta-subunit gene (rpoB). 16S rDNA and rpoB from clinical strains of MGS were sequenced using the dideoxy chain termination method and analyzed using MEGA version 5 software. The resulting phylogenetic data showed that the rpoB sequences could delineate clinical strains of MGS at the species level. Phylogenetic analysis of rpoB is therefore a useful approach for identifying MGS at the species level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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