금속 이온 환훤 세균에 의한 철(III)환원은 생물지구화학적 물질순환(biogeochemical cycle)에 무척 중요하다. 이는 크롬(Ⅵ)이나 우라늄(Ⅵ)과 같은 독성 중금속 물질의 환원과 유기물질의 산화에 모텔이 되기 때문이다. 총 37균주의 Fe (III)환원 세균을 소양호와 천호지의 저질토에서 각각 분리하였다. 두 정점 중 초기 Fe (II)의 함유량이 가장 높았던 것은 소양호의 저질토였으나 Fe (III)환훤능은 반대로 가장 낮은 Fe (II)함유량을 보여 주었던 천호지가 높게 나타났다. 또한 분리한 균주 중 천호지에서 분리한 균주 C2와 C3가 가장 높은 Fe (III) 환훤능을 보여 주었으며 이 균주를 이용하여 다양한 전자 공여체의 이용 여부를 실험하였다. Glucose, yeast extract, acetate, ethanol, toluene등을 이용하여 실험한 결과 두 균주 모두 glucose와 yeast extract만을 전자 공여체로 이용하였다. 또한 전자 수용체로 토양에 광범위하게 존재하는 humid acid와 nitrate를 이용하였으며 수율이 높은 nitrate reduction에 의해 환원되었던 humic acid가 다시 재 산화되는 것을 관촬할수 있었다. 활성능이 우수한 균주 C2와C3의 165S rRNA유전자 분석 결과에 의하면 Aeromonas hydrophila와 95%의 유사성을 보여주었다.
본 연구에서는 광양만 해수의 세균군집 다양성의 계절적인 변화를 분석하기 위해 2011년 2월, 5월, 7월, 10월의 4계절에 총 336 균주를 분리하였다. 분리된 미생물의 16S rRNA를 제한효소 Hae III를 이용하여 Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis 를 실시하여 절편 양상을 군집화 시키고, 다양성 지수를 계산하였다. 80%의 유사도 수준에서 40개의 단일 계통형을 포함한 총 101개의 계통형을 얻을 수 있었다. 각 계통형을 대표할 수 있는 139개 균주를 선택하여 16S rRNA 염기서열을 결정한 후 유전자서열을 비교한 결과, 이들 균주는 Proteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes 및 Firmicutes를 포함한 4개의 문에 속하였다. 모든 계절에 Proteobacteria 문이 최 우점하였고, 겨울과 봄, 가을에는 Bacteroidetes 문, 여름에는 Actinobacteria 문이 차 우점하였다. 과(family) 수준에서는 겨울과 봄에는 Flavobacteriaceae가 우점하였고, 여름과 가을에는 Pseudoalteromonadaceae가 우점하였다. 모든 계절에 Altererythrobacter, Loktanella, Pseudoalteromonas, Vibrio 속(genus)이 관찰되었다. 미생물 군집의 다양성은 가을에 가장 높았으며, 다음으로 봄, 겨울, 여름 순서였다.
A Gram-positive strain designated as MSL-$14^T$ isolated from a soil sample collected from Bigeum Island, Korea, was subjected to polyphasic taxonomy. The isolate was strictly aerobic. Cells were short rods and motile. Optimum growth temperature and pH was 28$^{\circ}C$ and 7.0, respectively. It was characterized chemotaxonomically as having a cell-wall peptidoglycan type based on LL-2,6-diaminopimelic acid and MK-$8(H_4)$ as the predominant menaquinone. The major fatty acids were iso-$C_{16:0}$, $C_{17:1}$ omega8c, and $C_{18:1}$ omega9c. The G+C content was 67.6 mol%. Phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene sequence revealed that strain MSL-$14^T$ is affiliated to the genus Nocardioides and formed a distinct lineage within the genus. MSL-$14^T$ showed highest sequence similarity to Nocardioides aestuarii JCM $12125^T$, having a similarity of 96.5%. Based on the 16S rRNA gene sequence divergence and phenotypic characteristics, it is proposed that strain MSL-$14^T$ should be classified as representing a novel member of the genus Nocardioides, for which we propose the name Nocardioides tritolerans sp. novo The type strain is strain MSL-$14^T$ (=KCTC $19289^T$=DSM $19320^T$).
In this study, we tried to identify a sea anemone collected from the coast of Gijang, Busan. The anemone was morphologically similar to species belonging to the genus Anthopleura, but its morphological characteristics did not allow for confirmed identification to species level. Multiple genes from mitochondrial cytochrome oxidase III, 12S and 16S rRNA, and nuclear 18S and 28S rRNA, were amplified for multilocus sequence typing (MLST) analysis using genomic DNA extracted from the sampled anemone and a different primer set. Based on the MLST analysis, the anemone obtained in this study was identified as Anthopleura artemisia. Also, the sequence of internal transcribed spacer-2 was most closely related to A. artemisia, indicating that this single region might be useful for anemone identification. This study shows significance of molecular identification for sea anemones, and will be helpful in studies of sea anemone identification using genotyping-by-sequencing.
Kim, Ju-Young;Sathiyaraj, Srinivasan;Subramani, Gayathri;Lee, JinWoo;Maeng, Soo hyun;Jang, Jun Hwee;Lee, Ki-Eun;Lee, Eun-young;Kim, Myung Kyum
Journal of Species Research
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제7권3호
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pp.202-209
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2018
Eight bacterial strains, 18JY8-13, 18JY13-16, 18JY43-7, 18JY12-7, 18JY1-1, 18JY1-7, 18JY15-3, and 18JY7-2 assigned to the phylum Firmicutes were isolated from a variety of soil samples collected in the Jeju Island, Korea. Cells of the eight strains were Gram-positive, aerobic and showed resistant to UV-radiation. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence revealed that strains 18JY8-13, 18JY13-16, 18JY43-7, 18JY12-7, 18JY1-1, 18JY1-7, 18JY15-3, and 18JY7-2 were most closely related to Bacillus paranthracis(99.9%), Bacillus paramycoides(99.6%), Bacillus australimaris(99.9%), Bacillus wiedmannii (100%), Bacillus halosaccharovorans(99.6%), Bacillus deserti(98.7%), Bacillus cereus (99.8%), and Bacillus albus(100%), respectively. This is the first report of these eight species in Korea.
The extremely halophilic archaeon Halobacterium noricense is a member of the genus Halobacterium. Strain CBA1132 (= KCCM 43183, JCM 31150) was isolated from solar salt. The genome of strain CBA1132 assembled with 4 contigs, including three rRNA genes, 44 tRNA genes, and 3,208 open reading frames. Strain CBA1132 had nine putative CRISPRs and the genome contained genes encoding metal resistance determinants: copper-translocating P-type ATPase (CtpA), arsenical pump-driving ATPase (ArsA), arsenate reductase (ArsC), and arsenical resistance operon repressor (ArsR). Strain CBA1132 was related to Halobacterium noricense, with 99.2% 16S rRNA gene sequence similarity. Based on the comparative genomic analysis, strain CBA1132 has distinctly evolved; moreover, essential genes related to nitrogen metabolism were only detected in the genome of strain CBA1132 among the reported genomes in the genus Halobacterium. This genome sequence of Halobacterium noricense CBA1132 may be of use in future molecular biological studies.
A total of 12 strains of fluorescent Pseudomonas isolated from the cultivated mushrooms such as Agaricus bisporus and Pleurotus ostreatus were collected. They consisted of pathogenic Pseudomonas spp. and epiphytic Pseudomonas spp. of the cultivated mushroom. To analyze the phylogenetic relationship of these strains, ITS I region, the 16S-23S intergenic spacer region in the ribosomal RNA (rRNA) operon, was cloned and sequenced. The spacer regions of these strains were 495∼527 nucleotides in length and contained the genes encoding isoleucine-tRNA (tRNAIle) and alanine-tRNA (tRNAAla). The reciprocal homologies of each ITS I sequence among these strains were in the range of 84.2%∼98.8%. According to the analysis of ITS I sequences, the fluorescent Pseudomonas spp. were phylogenetically classified into three clusters. Cluster I consisted of Pseudomonas fluorescens, P. tolaasii, P. gingeri’, and P.‘reactans’(WLRO). Cluster II comprised Pseudomonas fluorescens biovar C and F. Cluster III composed P. agarici. Cluster I and II could be classified into P. fluorescens complex. P. agarici formed an independent taxon clearly separable from P. florescens complex.
Kimchi is a traditional Korean fermented vegetable food, the production of which involves brining of Korean cabbage, blending with various other ingredients (red pepper powder, garlic, ginger, salt-pickled seafood, etc.), and fermentation. Recently, kimchi has also become popular in the Western world because of its unique taste and beneficial properties such as antioxidant and antimutagenic activities, which are derived from the various raw materials and secondary metabolites of the fermentative microorganisms used during production. Despite these useful activities, analysis of the microbial community present in kimchi has received relatively little attention. The objective of this study was to evaluate the bacterial community structure from the raw materials, additives, and final kimchi product using the culture-independent method. Specifically, polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis (PCR-DGGE) was used to analyze the 16S rRNA partial sequences of the microflora. One primer set for bacteria, 341FGC-518R, reliably produced amplicons from kimchi and its raw materials, and these bands were clearly separated on a 35-65% denaturing gradient gel. Overall, 117 16S rRNA fragments were identified by PCR-DGGE analysis. Pediococcus pentosaceus, Leuconostoc citreum, Leuconostoc gelidum, and Leuconostoc mesenteroides were the dominant bacteria in kimchi. The other strains identified were Tetragenococcus, Pseudomonas, Weissella, and uncultured bacterium. Comprehensive analysis of these microorganisms could provide a more detailed understanding of the biologically active components of kimchi and help improve its quality. PCR-DGGE analysis can be successfully applied to a fermented food to detect unculturable or other species.
Nocardia species (spp.) are opportunistic pathogen in immunocompromised hosts. The genus Nocardia contains more than 70 species. Nocardia takedensis has been recently reported as a new species of the genus Nocardia. In this study, we describes the first clinical isolate of N. takedensis from the skin lesion in Busan, Korea. For the identification of clinical isolate to the species level as N. takedensis, classical methods (colony morphology, biochemical characteristics, and antimicrobial susceptibility), molecular method (16S rRNA gene sequencing), and MS (mass spectrometry) analysis were conducted. Clinical isolates grew slowly on the culture media (5% sheep blood agar and chocolate agar) under 5% $CO_2$ condition. Especially, carotene pigmentation was detected well on the media. Using mass spectrometry, Nocardia isolate was not identified to the species level. However, molecular method based on 16S rRNA sequencing confirmed the isolate as N. takedensis correctly. N. takedensis isolate was partial positive for acid-fast bacilli on the Ziehl-Neelsen method. And it was observed to be resistance to amoxicillin/clavulanic acid and ciprofloxacin. Our results provide useful information to develop optimal identification protocol of N. takedensis in clinical diagnostic laboratories.
The phylogenetic diversity of the bacteria in hot composting samples collected from three spatial locations was investigated by molecular tools in order to determine the influence of gradient effect on bacterial communities during the thermophilic phase of composting swine manure with rice straw. Total microbial DNA was extracted and bacterial near full-length 16S rRNA genes were subsequently amplified, cloned, restriction fragment length polymorphism-screened and sequenced. The superstratum sample had the highest microbial diversity among the three samples which was possibly related to the surrounding conditions of the sample resulting from the location. The results showed that the sequences related to Bacillus sp. were most common in the composts. In superstratum sample, 45 clones (33%) and 36 clones (27%) were affiliated with the Bacillus sp. and Clostridium sp., respectively; 74 clones (58%) were affiliated with the Clostridium sp. in the middle-level sample; 52 clones (40%) and 29 clones (23%) were affiliated with the Clostridium sp. and Bacillus sp. in substrate sample, respectively. It indicated that the microbial diversity and community in the samples were different for each sampling site, and different locations of the same pile often contained distinct and different microbial communities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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