This study was conducted to compare the cellular fatty acid composition and genotypic analysis of Bifidobacterium longum MK-G7 originated from Koreans with other commercial type strains of bifidobacteria. The cellular fatty acid of Bif. longum MK-G7 was shown to be composed of $C_{160FAME},C_{181\;c18DMA},C_{18.1\;CIS9\; FAME},C_{14.0FAME},C_{19\;0cye9,10 DMA},Feature7(C_{17.2 FAME), and Feature 10(C_{181\; Cll/t9/t6 FAME}$. Bif. longum MK-G7 showed 99.9% homology and the highest relatedness with Bif. longum ATCC 15707 type strain. Both Bif. longum MK-G7 and Bif. longum ATCC 15707 showed 153 bp products on RAPD (randomly amplified polymorphic DNA) analysis, however, they showed quite different band patterns on PFGE (pulsed-field gel electrophoresis) analysis. Consequently, our present study showed that Bif. longum MK-G7 was different from any commercial type strains of Bif. longum tested.
Lee Keun Hee;Yu Hak Sun;Park Sang Kyun;Lee Sun Joo;Lee Kyeong Ah;Kim Sun Mee;Ock Mee Sun;Jeong Hae Jin
Journal of Life Science
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v.16
no.1
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pp.71-75
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2006
We analyzed the phylogenic relationships of 23 partial 18S rDNA sequences of 22 species (1 species has 2 strains) belonging to Sarcorptiforms include 4 new sequences, using several tools. Although geographic distributions are quite far from, sequence similarity of two strains of Dermatophygoides pteronyssinus isolated from Japan and New Zealand were very high. This result suggests that mite migration by animals including human occurred in the two continents. We investigated the Endeostigmata taxonomic relationship between the Prostigmata and Oribatida subgroups using small fragments (340-400 bp) of their 185 rDNA sequences. But Endeostigmata was not grouped with Oribatida or Prostigmata. In conclusion, it is first reported phylogenic relationship for classified mites included in Sarcoptiformes using 185 rDNA sequence analysis and its system is a very powerful tool for classification of mites.
Two microbial communities of activated sludge in the same municipal wastewater, but treated with different systems, were studied and compared using molecular microbiological approaches. The bacterial 16S rDNA sequences from 124 clones were analyzed, however, the majority of them were not closely related to any known species, and found to belong to 8 different phylogenetic groups and 3 different unidentified groups. The relative frequencies of each group were similar between the two microbial communities. Fingerprinting using terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) showed that the putative Nitrospira-related populations were more diverse and quantitatively higher in the KNR process system than in the other system using a conventional activated sludge process. The relationship between the bacterial community composition and the higher removal efficiency of nitrogen and phosphorus in the KNR process is discussed.
A bacterial strain, YK-2, was isolated as a producer of trans glutaminase from a forest soil sample of Daegu, Korea. The isolate showed a G+C content of 72.7 mol%, contained meso-$A_2pm$ as the cell-wall amino acid, and possessed menaquinone MK-9 ($H_6$) and menaquinone MK-9 ($H_8$) at a ratio of 6:4. The chemotaxonomic analysis, as well as phylogenetic analysis based on the 16S rDNA sequence, identified the isolate as a member of Streptomyces platensis. For transglutaminase production, the optimum medium composition was determined to be 2% glucose, 1% polypeptone, 1% soy tone, and 0.1% $MnCl_2$. The transglutaminase was stable within the pH range of 5.0-9.0 and $30-45^{\circ}C$, and the optimum pH and temperature were pH 8.0 and $45^{\circ}C$, respectively, without any requirement for $Ca^{2+}$.
Anaplasma marginale and A. platys were detected and characterized (16S rDNA sequence analysis) from dairy and indigenous cattle, and the latter in domestic dogs in Vietnam. A phylogenetic tree was inferred from 26 representative strains/species of Anaplasma spp. including 10 new sequences from Vietnam. Seven of our Vietnamese sequences fell into the clade of A. marginale and 3 into A. platys, with strong nodal support of 99 and 90%, respectively. Low genetic distances (0.2-0.4%) within each species supported the identification. Anaplasma platys is able to infect humans. Our discovery of this species in cattle and domestic dogs raises considerable concern about zoonotic transmission in Vietnam. Further systematic investigations are needed to gain data for Anaplasma spp. and members of Anaplasmataceae in animal hosts, vectors and humans across Vietnam.
In this study was performed to analyze quantitatively the number of viable but non-culturable bacteria in the Pine and Quercus forest soil by improved direct viable count (DVC) and plate count (PC) methods. The number of living bacteria of Pine and Quercus forest soil by PC method were less then 1% of DVC method. This result showed that viable but non-culturable (VBNC) bacteria existed in the forest soil with high percentage. Diversity and structure of VBNC bacterial populations in forest soil were analyzed by direct extracting of DNA and 16S rDNA-ARDRA from Pine and Quercus forest soil. Each of them obtained 111 clones and 108 clones from Pine and Quercus forest soil. Thirty different RFLP types were detected from Pine forest soil and twenty-six different RFLP types were detected from Quercus forest soil by HeaIII. From ARDRA groups, dominant clones were selected for determining their phylogenetic characteristics based on 16S rDNA sequence. Based on the 16S rDNA sequences, dominant clones from ARDRA groups of Pine forest soil were classified into 7 major phylogenetic groups ${\alpha}$-proteobacteria (12 clones), ${\gamma}$-proteobacteria (3 clones), ${\delta}$-proteobacteria (1 clone), Flexibacter/Cytophaga (1 clone), Actinobacteria (4 clones), Acidobacteria (4 clones), Planctomycetes (5 clones). Also, dominant clones from ARDRA groups of Quercus forest soil were classified into 6 major phylogenetic groups : ${\alpha}$-proteobacte,ia (4clones), ${\gamma}$-proteobacteria (2 clones), Actinobacteria (10 clones), Acidobacteria (8 clones), Planctomycetes (1 clone), and Verrucomicobia (1 clone). Result of phylogeneric analysis of microbial community from Pine and Quercus forest soils were mostly confirmed at uncultured or unidentified bacteria, VBNC bacteria of over 99% existent in forest soil were confirmed variable composition of unknown micro-organism.
A Gram-stain-positive, aerobic, white-coloured, rod-shaped bacteria, designated as a strain dW9T, was isolated from soil. Strain dW9T was catalase-positive and oxidase-negative. Strain dW9T grew at temperature of 20-37℃ and at pH of 5.0-7.0. Phylogenetic and 16S rRNA gene analysis indicated that strain dW9T belonged to the genus Paenibacillus with its closest relative being Paenibacillus filicis S4T (97.4% sequence similarity). The genome size of dW9T was 7,787,916 bp with DNA G+C G+C content of 51.3%. The digital DNA-DNA hybridization (dDDH) and average nucleotide identity (ANI) values of dW9T with its closest relatives were found to be <22.0% and <74.0%, respectively. The only respiratory quinone was MK-7, and the major fatty acids were antiso-C15:0 and iso-C16:0. Overall, the comprehensive taxonomic analysis revealed that strain dW9T met all the fundamental criteria to be classified as a novel species within the genus Paenibacillus. Accordingly, we propose the name Paenibacillus gyeongsangnamensis sp. nov., with the type strain dW9T (=KCTC 43431T =NBRC 116022T).
The CFDA (6-carboxyfluorescein diacetate) direct viable count method and plate count (PC) method using conventional nutrient broth (NB) medium and $10^{-2}$ diluted NB (DNB) medium were applied to samples collected from Mt. Yongdoo In Andong, in an effect to determine the number of living bacteria pine mushroom forest soil. The number of living bacteria determined via plate count in NB medium comprised $5{\sim}8%$ of the CFDA direct viable count, and the bacteria in the DNB medium comprised $40{\sim}47%$. This result indicated that viable but nonculturable (VBNC) bacteria existed in the pine mushroom forest soil at a high percentage. The phylogenetic characteristics of the VBNC bacterial populations in the samples of pine mushroom (Tricholoma matsutake) forest soil were analyzed via the direct extraction of DNA and 16S rDNA-ARDRA. The 115 clones from pine mushroom forest soil were clustered into 31 different RFLP phylotypes by ARDRA. Based on the 16S rDNA sequences, the 31 ARDRA clusters were classified into 6 phylogenetic groups: ${\alpha}-,\;{\beta}-,\;{\gamma}-Proteobacteria$, Acidobacteria, Actinobacteria and Firmicutes. Among these bacterial populations, approximately 85% were classified as members of phylum Acidobacteria. The Acidobacteria phylum was shown to exist abundantly in the pine mushroom forest soil.
A Gene content phylogenetic tree and a 16s rRNA based phylogenetic tree were compared for 33 whole-genome sequenced procaryotes, neighbor joining and bootstrap methods (n=1,000). Ratio of conserved COG (clusters of orthologous groups of proteins) to orthologs revealed that they were within the range of 4.60% (Mezorhizobium loti) or 56.57% (Mycopiasma genitalium). This meant that the ratio was diverse among analyzed procaryotes and indicated the possibility of searching for useful genes. Over 20% of orthologs were independent among the same species. The gene content tree and the 16s rDNA tree showed coincidence and discordance in Archaeabacteria, Proteobacteria and Firmicutes. This might have resulted from non-conservative genes in the gene content phylogenetic tree and horizontal gene transfer. The COG based gene content tree could be regarded as a midway phylogeny based on biochemical tests and nucleotide sequences.
DNA-DNA hybridization has been established as an important technology in bacterial species taxonomy and phylogenetic analysis. In this study, we analyzed how the efficiency with which the genomic DNA from one species hybridizes to the genomic DNA of another species (DNA-DNA hybridization) in microarray analysis relates to the similarity between two genomes. We found that the predicted DNA-DNA hybridization based on genome sequence similarity correlated well with the experimentally determined microarray hybridization. Between closely related strains, significant numbers of highly divergent genes (>55% identity) and/or the accumulation of mismatches between conserved genes lowered the DNA-DNA hybridization signal, and this reduced the hybridization signals to below 70% for even bacterial strains with over 97% 16S rRNA gene identity. In addition, our results also suggest that a DNA-DNA hybridization signal intensity of over 40% indicates that two genomes at least shared 30% conserved genes (>60% gene identity). This study may expand our knowledge of DNA-DNA hybridization based on genomic sequence similarity comparison and further provide insights for bacterial phylogeny analyses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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