• Applied Biological Chemistry
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• 제51권3호
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• pp.159-163
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• 2008

Sephadex G-100 column chromatography에 의해 Xylogone sphaerospora 유래 ${\beta}$-mannanase의 정제를 수행하여 비활성 8.44 units/ml, 정제배율 56.27을 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 단일밴드를 확인하였고, 분자량은 42kDa으로 결정되었다. 정제효소에 의해 konjac glucomannan을 가수분해하여 activated carbon column chromatograph)에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC에 의해 주요 당가수분해물은 합도 3과 4의 hetero type으로 확인되었으며 D.P. 3과 4의 예상되는 구조는 본 연구실에서 확보하고 있는 standard glucomannooligosaccharides에 의한 TLC에서 나타나는 Rf value 상으로 1차적으로 확인하고, Aspergillus niger 5-16 유래 정제 ${\beta}$-mannanase를 단계적으로 처리하여 가수분해 pattern을 TLC로 해석한 결과 D.P. 3의 구조식은 비환원말단 mannose로 부터 2번째에 1분자의 glucose가 결합하고 있는 hetero type의 구조(M-G-M)로, D.P. 4의 구조식은 비환원말단 mannose로부터 3번째에 1분자의 glucose가 결합하고 있는 hetero type의 구조(M-M-G-M)로 예상하고 있다. B. longumm, B. bifidum, B. infantis, B. adolescentis, B. animalis, B. auglutum, B. breve의 생육활성에 대한 중합도 3과4의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS 배지 상에 탄소원으로 중합도 3과 4를 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum에서는 D.P 4 glucomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 표준 MRS배지와 비교하여 3.9배의, D.P. 3을 처리한 경우에도 2.7배의 상대 활성을 나타내어 가장 우수한 생육활성을 나타냈었으며, B. breve의 경우에서도 D.P 4에서 2.47배, D.P 3에서 2.08배의 활성을 나타내었으며 B. bifidum에 있어서는 D.P. 4의 경우 2.8배의 상대활성을 나타내었다. Bifidobacterium 7균주 모두에 대해서 중합도 4의 올리고당이 중합도 3의 올리고당보다 생육활성에 크게 기여하는 것으로 나타났다.

• 한국축산식품학회지
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• 제26권4호
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• pp.503-510
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• 2006

한국인 유아에서 분리한 13개 균주를 포함한 19개 bifidobacteria 균주를 대상으로 산, 담즙산 및 산소 노출시의 생균수의 변화를 측정하였다. 내산성은 pH 4.0, 3.0, 2.0에서 2시간까지 측정하였는데, 실험 균주마다 매우 상이한 결과를 나타내었으며, 실험 균주 중에서 B. bifidum B3, B. longum D6, B. adolescentis Fl이 우수한 생존력을 나타내었다. 실험 균주를 0.2% thioglycolic acid와 0.2% oxgall이 함유된 MRS 배지에서 생장을 측정한 결과, B. bififdum B3과 B. longum D6이 담즙산에 우수한 저항성을 나타냈으며, 균종간의 경향은 관찰되지 않았다. 호기 상태에서 48시간 노출시킨 후에 생균수의 변화를 측정한 결과, 실험 균주마다 상이한 결과를 나타내었으며 상대적으로 B. bifidum과 B. longum균주들의 생존력이 우수하였다. 산, 담즙, 산소 노출에 대한 생존력은 균종간의 경향을 나타내지 않고 균주마다 상이한 결과를 나타내었는데, 실험 균주 중에는 B. bifidum B3과 B. longum D6 균주가 모두 우수한 생존율을 나타내었다. 이들 균주는 현재 시판되는 상업용 종균과 비교해서도 동등한 성적을 나타내어 상업용 종균으로서의 사용 가능성을 시사하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제32권2호
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• pp.117-122
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• 2004

DEAE-sephadex ion exchange column chromatography에 의해 Bacillus sp. 유래 $\beta$-mannanase 의정제를 수행하여 비활성 21.57 units/$m\ell$, 정제배율 95.33을 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 단일밴드를 확인하였고, 분자량은 38.9 kDa으로 결정되었다. 정제효소에 의해 guar gum galactomannan을 가수분해하여 1차 activated carbon column chromatography 와 2차 Sephadex G-25 gel filtration에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC 및 FACE 에 의해 주요 당가수분해물은 중합도 5와 7로 확인되었다. B. longum B. bifidum, B. infantis, B. adolescentis, B. animalis, and B. breve의 생육활성에 대한 중합도 5와 7의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS 배지상에 탄소원으로 중합도 5와 7을 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum 에서는 중합도 5 galactomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 Standard MRS와 배교하여 0.62배로 감소하였다. 또한 중합도 5의 올리고당이 중합도 7의 올리고당보다 생육활성에 크게 기여하는 것으로 나타났다.

• 한국식품과학회지
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• 제34권4호
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• pp.732-736
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• 2002

더덕열수추출물의 면역증강효과를 조사하였다. 더덕열수추출물을 1에서 $25\;{\mu}g/mL$의 농도로 첨가했을 때 BSA로 면역된 마우스의 림파절 세포는 무첨가군에 비해 2.8에서 11.2배의 세포증식 효과를 나타냈다. 더덕열수추출물은 인삼열수추출물보다 증식효과가 높게 나타났으며, 면역증강효과가 알려진 B. adolescentis M101-4 와는 유사한 정도의 효과를 보였다. 비장 및 Peyer's patch 세포에 대해서는 1에서 $25\;{\mu}g/mL$의 더덕열수추출물을 첨가했을 때 각각 4.2에서 13.8배, 3.1에서 6.9배의 증식효과를 나타냈다. 더덕열수추출물은 또한 RAW 264.7 세포주에 의한 $TNF-{\alpha}$ 나 IL-6 같은 사이토카인 생산을 자극하였다. RAW 264.7 세포를 lipopolysaccharide로 자극했을 경우, $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6는 무첨가군에 비해 별다른 증진효과를 나타내지 않았으나, 자극하지 않은 RAW 264.7 세포에 대해서는 $TNF-{\alpha}$는 12.6에서 67.8배, Il-6는 2.8에서 10.1배 증가하였다. 이상의 결과로 더덕열수추출물을 이용하여 노화 및 질병에 따라 수반되는 면역력 감소를 방지하는 기능성식품 및 신소재로의 개발이 기대된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제30권4호
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• pp.599-603
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• 2020

In the present study, we examined the effects of interleukin (IL)-10 expression-inducing bacteria Bifidobacterium adolescentis HP1, Lactobacillus mucosae HP2, and Weissella cibaria HP3 on high-fat diet (HFD)-induced obesity and liver steatosis in mice. Oral gavage of HP1, HP2, and HP3 reduced HFD-induced bodyweight gain, triglycerides, and total cholesterol levels in the blood and liver. They also suppressed HFD-induced colitis and the fecal δ,γ-Proteobacteria population. Of the tested bacteria, HP2, which most potently inhibited IL-10 expression, also suppressed HFD-induced bodyweight gain, liver steatosis, and colitis most effectively. These findings suggest that IL-10 expression-inducing gut bacteria can suppress obesity and liver steatosis.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제23권1호
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• pp.1-9
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• 2008

유산균인 비피도박테리아는 사람과 동물에서 유익한 프로바이오틱 미생물로 알려져 있다. 본 연구에서는 이러한 비피도박테리아 균주의 분류를 위한 repetitive DNA element PCR fingerprinting (ERIC-또는 TAP-PCR)의 사용을 평가하였다. 사람분변으로부터 분리한 알려지지 않은 비피도박테리움 균주와 한국생명공학연구원 생물자원센터로부터 분양받은 표준균주를 가지고 분류 및 동정에 ERIC-PCR과 TAP-PCR을 이용한 RAPD-fingerprinting을 수행하였다. 그 결과 비피도박테리움 균주에 대한 속과 종단위의 분류가 가능하였으며, 실험에 사용된 모든 비피도박테리움 균주는 RAPD-fingerprinting 분석을 통해 유전적 다양성을 확인하였다. 또한 ERIC2와 TAP1 프라이머를 이용한 실험에서는 Bifidobacterium adolescenits 특이 유전자 단편을 확인하였으며 이는 B. adolescenits 균주의 동정에 유용할 것으로 사료된다.

• Nutrition Research and Practice
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• 제1권2호
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• pp.94-99
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• 2007

The immunostimulating activities of mucilage fraction from yam were investigated. The proliferation of BSA-primed lymph node cells was enhanced between 4.1- to 10.9-fold compare to control, when cultured with 1 to $25{\mu}g/mL$ of yam-mucilage fraction. It showed strong immunostimulating activity than ginseng extract and as remarkable as Bifidobacterium adolescentis M101-4 known as a positive immunostimulator. Mitogenicity to lymph node cells was fully induced by concanavalin A and lipopolysaccharide. The proliferation of splenocytes and Peyer's patch cells was enhanced between 5.0- to 14.1-fold and 2.4- to 6.4-fold, respectively, when cultured with 1 to $25{\mu}g/mL$ of yam-mucilage fraction. It enhanced the production of cytokines such as tumor necrosis $factor-{\alpha}$ and IL-6 in the culture of RAW 264.7 macrophage cells. In the culture of lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cells, production of cytokines was as similar as compared to controls. In unstimulated RAW 264.7 cells, both tumor necrosis $factor-{\alpha}$ and IL-6 production were enhanced between 15.6- to 60.1-fold and 2.3- to 9.1-fold, respectively. Mucilage fraction from yam is expected to be a safe immunopotentiator to maintain the host immunity and develop a physiologically functional food.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권6호
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• pp.877-883
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• 2006

The immunostimulatory activities of Lactobacillus plantarum, the major microorganism in kimchi fermentations were investigated. Five strains of L. plantarum exhibited weak immunopotentiating activity, but L. plantarum PS-21 showed as strong a mitogenic activity as Bifidobacterium adolescentis M101-4, a known positive strain. It is of interest that, L. plantarum PS-21 stimulated proliferation of Peyer's patch cells, one of the most important tissues in the gut-associated lymphoreticular system. Cell' wall fractions from L. plantarum PS-21 also showed strong mitogenic activity compared with the soluble cytoplasmic fraction. A peptidoglycan fraction (PG) extracted from the cell wall of L. plantarum PS-21 was identified as an active mitogenic component when used in murine lymph node and spleen cell test systems. PG showed dose-dependent mitogenic activity and significantly enhanced antibody production in lymph node cells when studied in vitro. The lysosomal enzyme activity of murine peritoneal macrophages was increased when analyzed following injection of PG to the host animal. Furthermore, PG enhanced the production of cytokines such ($TNF-{\alpha}$ and IL-6) in the in vitro culture of RAW 264.7 macrophage cells.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권3호
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• pp.755-760
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• 2009

The growth-inhibiting activities of persimmon roots-derived materials against intestinal bacteria were evaluated and compared with that of 1,4-naphthoquinone as a positive control. The active constituent isolated from persimmon roots was characterized as 5-hydroxy-2-methyl-1,4-naphthoquinone using various spectroscopic analyses. Treatment with 1,4-naphthoquinone at a dose of 1.0 mg/disc strongly inhibited the growth of 6 intestinal bacteria. Furthermore, when the structure-activity relationships of 1,4-naphthoquinone's derivatives were evaluated, 5-hydroxy-2-methyl-1,4-naphthoquinone and 2-methyl-1,4-naphthoquinone were found to strongly inhibit the growth of Clostridium difficile, Clostridium perfringens, and Escherichia coli without adversely affecting the growth of Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum, and Lactobacillus acidophilus. Additionally, 2-hydroxy-1,4-naphthoquinone and 5-hydroxy-1,4-naphthoquinone strongly inhibited the growth of C. difficile and C. perfringens, but did not inhibit the growth of E. coli. Taken together, these results indicate that persimmon roots-derived materials and some of 1,4-naphthoquinone's derivatives could be useful preventive agents against diseases caused by harmful intestinal bacteria.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제15권4호
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• pp.360-363
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• 2010

To enhance the expression and secretion of pediocin PA-1 from heterologous bacterial hosts, the promoter and deduced signal sequence (PS) of an $\alpha$-amylase gene from a Bifidobacterium adolescentis strain was fused with pediocin PA-1 structural and immunity genes (AB) and the resulting functions were evaluated in Escherichia coli. Two recombinant PCR products were created-one with just the deduced signal sequence and one with the sequence plus the Ser and Thr sequences that are the next two amino acids of the signal sequence. These two products, the PSAB (---AQA::KYY---) and PSABST (---AQA$\underline{ST}$::KYY---), respectively, were inserted into a TA cloning vector (yT&A) and named pPSAB, which was previously reported, and pPSABST. The two recombinant plasmid DNAs were transferred into E. coli JM109 and the transformants displayed antimicrobial activity, where the activity of E. coli JM109 (pPSAB) was stronger than that of E. coli JM109 (pPSABST), indicating that the ST amino acid residues were not necessary for secretion and might have even decreased the antimicrobial activity of recombinant pediocin PA-1.