• 한국축산식품학회:학술대회논문집
• /
• 한국축산식품학회 2005년도 정기총회 및 제35차 춘계 학술 발표대회
• /
• pp.322-325
• /
• 2005

본 연구는 ${\beta}-galactosidase$에 의한 isoflavone 배당체의 비배당화 연구를 실용화하기 위하여 바람직하지 않은 관능적 요소와 화학적 반응을 제어하기 위하여 두 물질을 미세캡슐화 하고 그것의 in vitro 안정성을 연구하여 기능성식품개발에 응용토록 하는데 목적을 두었다. 실험 결과, 미세캡슐화 수율이 매우 높았으며, 인공위액 상태에서의 안정성은 높은 반면에, 인공 소장액 상태에서의 안정성이 매우 낮았다. 또한 인공소장액에서 유리된 ${\beta}-galactosidase$에 의한 유리 isoflavone의 비배당화율이 약 75% 정도로 관찰되었다. 결과적으로 판단해 볼 때, isoflavone과 ${\beta}-galactosidase$의 미세캡슐화를 통한 소화기 내에서의 비배당화와 흡수율을 극대화하는데 매우 긍정적인 가능성을 보였다.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제8권1호
• /
• pp.1-5
• /
• 1995

ATPase was the most available phosphatase in culture broth of 5. coli P90C. To measure the stable phosphatase activity it was necessary to react nth reaction reagent over 30 min and then we can get stable optical density at 410 m. Transfer time from preculture to main culture for the production of $\beta$-glactosidase was good after 3 hrs cultivation. Phosphatase activity was highest at log phase in main culture and as the cell begins to make $\beta$-galactosidase phosphatase activity begins to decrease.

• Journal of Ginseng Research
• /
• 제22권4호
• /
• pp.310-315
• /
• 1998

The effect of red ginseng saponins (total saponins, Rbl- and Rgl- fraction of saponins) on the induction of $\beta$-galactosidase in yeast, hccharomyces cereuisiae, was investigated to see that ginseng saponins would penetrate the cell membrane and have a function in a nucleus as steroid hormones do. To attain such a kind of purpose, a DNA fragment (685bp) containing GALI promoter was inserted into the sites of EcoRl and BamHl of polylinker region, upstream of lace gene of the plasmid YEp356 (7.966 Kb), and thus the resulting plasmid pGALl-lacZ is supposed to express $\beta$- galactosidase only in the presence of galactose. The plasmid pGALl -lacZ was introduced into yeast, Ky106 (a leu2 ura3 his3 trp 1 Iys2), and the growth of the transformed cells was much slower in the presence of galactose than glucose. The effects of saponins on the specific activity of P-galactosidase from transformed yeast cells were detected. No significant increase was observed in case of total saponins, but the Rbl- or Rgl- fraction of saponins gave much higher increase in the activity. Maximum increase was observed as 35% in 10-3% of Rbl and as 75% in 10-1% of Rgl. These data suggest that ginseng saponins might be able to enter the nucleus and stimulate transcription. However, further studies to find out the putative saponin receptor are needed to confirm this possibility. Key words : Red ginseng saponin, $\beta$-galactosidase induction, Saccharomyces cerevisiae.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
• /
• 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
• /
• pp.758-761
• /
• 2001

In this study, the nar promoter of E. coli was characterized to see whether the nar promoter cloned onto pBBR122 can be used as an expression promoter of gram negative microbes. For this purpose, a plasmid with lacZ gene expressing ${\beta}-galactosidase$ instead of the structural genes of nar operon in a gram negative host strain(Agrobacterium.tumefaciens) was used to simplify an assay of induction of the nar promoter. The following effects were investigated to find optimal conditions: methods of inducing the nar promoter, optimal nitrate concentration, maximally inducing the nar promoter, the amount of expressed ${\beta}-galactosidase$ and induction ratio(specific ${\beta}-galactosidase$ activity after maximal induction/specific ${\beta}-galactosidase$ activity before induction). The following results were obtained from the experiments: the growth of Agrobacterium with E.coli nar promoter was not much affected by nitrate concentration in the shake-flask; induction of nar promoter was optimal when Agrobacterium was grown in the presence of 1% nitrate ion at the beginning of culture and when overnight culture was completely grown in the shake-flask before being transferred to other shake-flask; the amount of ${\beta}-galactosidase$ per cell and per medium volume was maximal when Agrobacterium was grown under aerobic condition to $OD_{600}$ of 1.7; then the nar promoter was induced under microaerobic and anaerobic condition made by lowering dissolved oxygen level(DO). After 2-3h of induction in the YEP medium selected as a main culture medium, the specific ${\beta}-galactosidase$ activity became about 17,000 Miller units in the fermentor cluture.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제9권4호
• /
• pp.213-218
• /
• 1981

순수분리정제된 $\beta$-galactosidase의 분자량은 Sephadex G-200 gel filtration법에서 130,000이며 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis에서 130,000외에 70,000이 확인되어 이 효소는 70,000인 2개의 subunit로 구성되어 있다고 판단되었다. 효소의 안정pH는 4.5~7.0이며 효소활성의 최적 pH는 4.7 최적온도는 5$0^{\circ}C$였다. 효소활성 및 안정제로 1가, 2가 금속ion을 필요로 하지않았으며 C $u^{++}$ 1mM에서 59%, galactose 100mM에서 48% 저해되었다. 5% lactose용액, 시유 및 10% skim milk 용액에 이 정제된 $\beta$-galactosidase 10units/$m\ell$를 사용하여 5$0^{\circ}C$에서 4시간 동안 반응시켰을 때 lactose가 각각 69.5%. 88.7% 및 72.6%가 glucose와galactose로 전환된 결과를 얻었다.

• 한국양식학회지
• /
• 제7권1호
• /
• pp.41-54
• /
• 1994

E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자를 미꾸라지 수정난에 미세현미 주입하고 이를 분석함으로써 미꾸라지에 외래 유전자 이식을 위한 reporter 유전자로서의 유용성을 검토하였다 X-gal 염객분석, 4-methylumbelliferyl-$\beta$-D-galactoside (MUG) 분석을 수행한 결과 유전자 이식 처리군 및 대조군에서 모두 \beta-galactosidase$의 활성이 관찰되었으며 PCR, dot blot 및 southern blot분석결과 역시 유전자 이식 처리군과 대조군에서 모두 유사한 양상을 나타내었다. 처리군 및 대조군의 PCR product의 염기서열은 E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자와 매우 높은 homology를 갖고 있었으며 pH에 따른 X-gal 염색 분석을 수행한 결과 미꾸라지에 관찰되는 본 효소는 pH 4.5에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 따라서 앞으로 미꾸라지를 대상으로 한 외래 유전자 이식시 E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자의 reporter 유전자로서의 사용은 신중한 재검토가 이루어져야만 할 것으로 판단된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제20권11호
• /
• pp.1546-1554
• /
• 2010

A bacterial strain capable of producing extracellular ${\alpha}$-galactosidase was isolated from a sample of sugarcane industrial waste. Microbiological, physiological, and biochemical studies revealed that the isolate belonged to Bacillus sp. Furthermore, based on a 16S rDNA sequence analysis, the new isolate was identified as Bacillus megaterium VHM1. The production of ${\alpha}$-galactosidase was optimized based on various physical culture conditions. Guar gum and yeast extract acted as the best carbon and nitrogen sources, respectively. The optimum pH was 7.5 and the enzyme remained stable over a pH range of 5-9. The enzyme was optimally active at $55^{\circ}C$ and thermostable with a half-life of 120 min, yet lost 90% of its residual activity within 120 min at $60^{\circ}C$. One mM concentrations of $Ag^2$, $Cu^2$, and $Hg^{2+}$ strongly inhibited the ${\alpha}$-galactosidase, whereas the metal ions $Fe^2$, $Mn^{2+}$, and $Mg^{2+}$ had no effect on the ${\alpha}$-galactosidase activity, and $Zn^{2+}$, $Ni^{2+}$, and $Ca^{2+}$ reduced the enzyme activity slightly. When treated with the B. megaterium VHM1 enzyme, the flatulence-causing sugars in soymilk were completely hydrolyzed within 1.5 h.

• 한국식품위생안전성학회지
• /
• 제35권4호
• /
• pp.304-311
• /
• 2020

Galacto-oligosaccharides(GOS)는 프로바이오틱스 미생물의 성장을 증진시켜 인류 건강에 유익한 작용을 갖게 하는 프리바이오틱스이며 식품 산업에서 다양한 활용성을 갖는다. GOS는 보통 β-galactosidase에 의해 촉매 반응이 일어난 lactose로부터 생성된다. 한편, 세포 표면 발현은 살아있는 세포 표면의 펩타이드와 단백질을 세포의 기능성 성분에 융합시켜 발현시키는 것이다. 표층 발현 세포는 다양한 잠재적 이용가치를 갖는다. N 말단 부근에 위치하는 것으로 생각되는 Flo1p 응집 functional domain은 세포의 flocs로의 가역적인 응집을 유발하면서 α-mannan carbohydrates와 같은 세포벽 성분과 비공유결합을 한다. 한외여과한 유청을 농축, 분무건조한 유청막투과액(Whey Permeate, WP)을 이용하여 β-galactosidase 재조합 Pichia pastoris (P. pastoris) 로 표층 발현 처리 (surface engineering)하는 GOS의 합성법은 폐기물을 활용하는 새로운 효율적인 방법이라 할 수 있다.

• 한국식품과학회지
• /
• 제21권1호
• /
• pp.164-172
• /
• 1989

Streptococcus thermophilus 510의 ${\beta}-galactosidase$는 유당을 가수분해 하는 동시에 galactose전이반응을 일으켜 세 종류의 galactooligosaccharides를 형성 하였다. Oligosaccharide의 최대 생성 조건은 40% 유당 용액에 효소 50 ONPG units/ml를 첨가한 혼합액을 $37^{\circ}C$에서 4시간 반응시켰을 때 이며, 이 조건에서 유당이 약 94% 가수분해 되었고 생성된 oligosaccharides의 양은 총 당의 약 30% 이었다. 생성된 총 oligosaccharides의 69%는 $6-o-{\beta}-D-galactopyranosyl-D-glucose(allolactose)$, 23%는 $6-o-{\beta}-D-galactopyranosyl-D-galactose(isogalactobiose)$ 이었으며, 형성된 galactooligosaccharides을 Bio-Gel P-2 gel permeation chromatography 방법에 의해서 순수하게 분리 정제하여 구조를 조사하여 본 결과 glucose, galactose, allolactose, 그리고 isogalactobiose 임을 확인할 수 있었다.

• Journal of Ginseng Research
• /
• 제24권2호
• /
• pp.89-93
• /
• 2000

6년생 고려인삼근(panax ginseng C.A. Meyer)중 수종의 exo-O-glycosylhydrolase 활성을 중심부와 주피부로 나누어 생육시기별로 조사하였다. $\alpha$-D-galactosidase, $\beta$-D-galactosidase, $\alpha$-L-man-nosidase , N-acetyl-$\beta$-D-giucosarninidase, $\alpha$-D-galactosidase, $\alpha$-L-arabinosidase와 $\beta$-D-fucosidase는 중심부와 주피부에서 모두 활성이 있으나 $\beta$-L-mannosidase, $\alpha$-D-xylosidase, $\beta$-D-xylosidase, $\alpha$-D-rhamnosidase와 $\beta$-D-glucosidase의 효소활성은 검색되지 않았다. $\beta$-D-galactosidase의 활성은 연중 높게 유지되었고 $\alpha$-L-mannosidase의 활성도 높은 경향이었다. 인삼근중 탄수화물 대사효소의 활성은 생육시기와 환경조건 및 부위에 따라 매우 다른 양상을 나타내었다.