To study the role of mutant precore region in expression and secretion of hapatitis B viral core antigen, we have cloned core antigen gene(HBc) with or without precore region in geterologous expression vectors containing SV40 promoter, yeast promoter, and lambda $P_{L}$ promoter. In COS cells transfected with plasmid containing C-gene with precore region, antigens were detected in both cell extract and cultured medium. However, in the cells transfected with plasmids containing C-gene without precore or with mutated precore region by one nucleotide (T) addition at the nucleotide 1,821, HBcAg was detected only in cell extracts. These results support that the mutation by one nucleotide addition shifted the initiation codon of precore region to 53 nucleotides upward and the elongated precore region also played a major role in the secretion of HBcAg in mammalian cells. In the case of yeast and E. coli, HBcAg was detected only in cell extracts in spite of the presence of precore region, which suggest that precore region could not affect HBcAg secretion in these system.
Currently, natural food colorants and preservatives are being used for their general health benefits. Monascus koji, the product of certain fungi that grow on rice grains, has been added to many foods for coloring and preservation. In this study, the antimicrobial activities of Monascus koji ethanol extracts were investigated. Six Monascus strains (M. araneosus KFRI 00371, M. kaoliang ATCC 46597, M. pilosus IFO 4520, M. purpureus IFO 4482, M. ruber IFO 32318 and M. sp. ATCC 16437) were selected based on their relative intensity of red pigment. Two Monascus extracts, M. kaoliang ATCC 46597 and M. purpureus IFO 4482, displayed antimicrobial activities against Bacillus subtilis, B. cereus, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium in concentration-dependent manners. The two extracts showed their strongest antimicrobial activity against S. typhimurium, a cause of food poisoning. Therefore, these results suggest that Monascus koji could be used as a natural food colorant and preservative.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.13
no.1
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pp.115-129
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2011
This study was performed to investigate the effects of food organism and water quality on the mass production of larval red marbled rockfish, Sebastiscus tertius. When rotifer cultured with different food stuffs were supplied to the larvae, rotifer cultured with concentrated Chlorella provided the highest in total length 11.9 mm and survival rate was the highest by 47.0% fed that cultured with ω-yeast Growth and survival rate of larvae fed on enriched rotifer with ω-yeast and super selco, super selco of enriched treatment showed that the best results not only growth but also survival rate. For instance of Artemia, the growth was not significantly different with other treatment but the survival rate was significantly higher than others. The growth of larvae fed with different diets indicated that rotifer+Artemia+commercial diet treatment was the highest on the total length and body weight 18.40 mm and 18.1 mg, respectively, whether the survival rate was rotifer+Artemia treatment was the highest as 57.5%. The most effective density of Chlorella was 10×105 cells/ml for growth of larvae. That density showed that total length and body weight were 11.83 mm and 14.3 mg, respectively. The survival rate was the most effective for 20×105 cells/ml of Chlorella density. That density represented the highest survival rate as 54.5%. Comparing of PSB adding effect, PSB density 15×105 cells/ml was the most effective for growth of larvae and but for survival rate PSB density 10×105 cells/ml was the highest as 61.0%.
We studied the effect of fermented Rhus verniciflua stem bark (FRVSB) extract (used in herbal med-icine by Koreans) on the microbial growth and enzyme activity of 12 soybean-fermenting microorganisms, including Bacillus spp., lactic acid bacteria, yeast, and other harmful bacteria. The ethanol and methanol extracts of FRVSB inhibited the growth of Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus cereus, and Zygosaccharomyces rouxii, and in the disk diffusion assay, their inhibition zone diameters were 11.06-12.23, 12.32-18.38, 11.47-11.84, and 13.59-14.21 mm, respectively. The water extract did not show any inhibitory effect. In fact, the water extract addition enhanced the growth of B. subtilis and B. licheniformis by 1.3-4.5 fold and that of B. cereus by 1.2-1.4 fold. However, the water extract did not affect the growth of Lactobacillus plantarum, Lactobacillus mesenteroides, Saccharomyces cer-evisiae, and Escherichia coli. The addition of water extract increased the amylase and protease activity of B. subtilis and B. licheniformis.
Dominant lactic acid bacteria (LAB) strains were isolated from traditional fermented foods to obtain rare ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA)-producing LAB. Out of 147 isolates, 23 strains that could produce GABA with 1% (w/v) L-monosodium glutamate (MSG) were first isolated. After further screening of these rare GABA-producing LAB by analysis of the glutamate decarboxylase and 16S rRNA gene sequences, Enterococcus faecium JK29 was isolated, and 1.56 mM of GABA was produced after 48 h cultivation in basic de Man, Rogosa, and Sharpe (MRS) medium. To enhance GABA production by E. faecium JK29, the culture conditions were optimized. When E. faecium JK29 was cultivated in optimized MRS medium containing 0.5% (w/v) sucrose and 2% (w/v) yeast extract with 0.5% (w/v) MSG, GABA production reached 14.86 mM after 48 h cultivation at initial conditions of pH 7.5 and $30^{\circ}C$.
This study is focused on establishing the optimal conditions to enhance the production of antilisterial substances by Lactobacillus paracasei BK57 isolated from Baikkimchi. In addition, the growth and in situ lactic acid and bacteriocin production of this strain were investigated during the manufacture of fresh cheese. And then the efficacy of using Lactobacillus starter as a protective culture to improve the safety of fresh cheese against Listeria monocytogenes KCTC 3569 was estimated. Maximum growth rate and activity of antibacterial substances were obtained in Lactobacilli MRS broth at $37^{\circ}C$ with controlled pH 6.0 after 30 h of incubation under aerobic condition. However, the growth rate and antimicrobial activity of bacteriocin produced in whole milk supplemented with yeast extract (2.0%) as a substrate were lower than those obtained in MRS broth. Live cells and cell-free culture supernatant of BK57 strain were effective in the suppression of L. monocytogenes in milk, whereas the inhibitory of the bacteriocin obtained from BK57 strain was higher in BHI broth than in milk. During storage at $4^{\circ}C$ and $15^{\circ}C$ for 6 days, no significant difference was found in the cell viability and antimicrobial activity of BK 57 strain in fresh cheese. In samples held at two temperatures, there was at least a 15% reduction in the numbers of the pathogen in fresh cheese artificially contaminated with approximately $10^5CFU/ml$ of L. monocytogenes within 6 days. Our results demonstrated the usefulness of L. paracasei BK57 having antilisterial activity as a biopreservative in the cheese making process.
An optimization for fermentation processes to make lactic acid juice with extracts from apples, carrots, celery, watercress, jujube and lycii (3 : 3 : 1 : 1/2 : 1 : 1/2) using co-cultures of Leuconostoc mesenteroides, Lactococcus lactis and Lactobacillus cellobiosus isolated from Dongchimi had been investigated on the emphasis of composition of sugars and sodium chloride at various temperatures. The concentration of sugars less than 25% and salt less than 0.8% did not affect remarkably the cell growth of lactic acid bacteria and acid formation during fermentation. The fermenting juice showed increases in the population of lactic acid bacteria and acidity, and decreases in population of coliform bacteria and sugar concentration with high cultural temperature. At $25^{\circ}C$ viscous substance was not formed as it had at $15^{\circ}C$. The optimum composition, based on the sensory evaluation, was determined to be oligosaccharide and 0.2% for sodium chloride. It took 3 days to produce the most preferable juice of pH 3.62 at $25^{\circ}C$. At the optimal state the fermented juice showed viable cell counts (cfu/mL) of exponential numbers 8 for lactic acid bacteria and 4 for yeast. Coliform bacteria which had been $5.6{\times}10^2\;cfu/mL$ at the beginning of fermentation were not detected.
The demand of L-arabinose has been increased recently because of its advantages including clinical effect. L-arabinose can be produced from dilute acid hydrolysis of agricultural wastes. In this study, optimum conditions of L-arabinose production using dilute acid hydrolysis of agricultural wastes and nutshells were determined. Among the tested various agricultural wastes and nutshells, corn fiber was selected as the best raw material for the production of arabinose. The highest arabinose production was achieved an acid hydrolysis of corn fiber for 1 h at 130$^{\circ}C$ with 0.4% sulfuric acid. Above optimal conditions, it was obtained 20.1 g/L glucose, 10.1 g/L xylose, 7.8 g/L arabinose and 1.8 g/L galactose from 90 g/L of corn fiber. For the purification of arabinose, it was carried out to remove all of sugars except arabinose by the Candida tropicalis cultivation of acid hydrolyzate and an organic contaminants such as pigments by the active carbon treatment of fermentation broth. Moreover, experiments were carried out to eliminate an ions by exchange chromatography. Finally, we obtained 3.1 g of partially purified L-arabinose powder with about 40% yield by evaporation and vacuum drying.
Marine organisms were investigated to identify the marine actinomycetes that produced noble bioactive compounds. Microorganism counts range from $2.1{\times}10^3\;to\;1.2{\times}10\;CFU/g$ of marine organisms. Actinomycetes constituted 0.01 to $0.5\%$ of culturable microbial community. We identified the marine actinomycetes that produced novel bioactive compounds. During the course of screening for bioactives from the marine microorganisms, we found that the strain in sponge had antimicrobial activities. From the morphological, cultural and various physiological characteristics, this strain was identified for Actinomycetes No. 101. The optimal compositions of culture medium for Actinomycetes No. 101 were starch 30g/l as carbon source, casamino acid 10g/l as nitrogen source. The optimal pH of medium and fermentation temperature were $6.5{\sim}7.0$ and $30^{\circ}C$, respectively. Fermentation has been conducted in the marine broth at $30^{\circ}C$ for 72 hour. The yield of fermentation got about 3g as dry weight(per liter of broth). The distribution of antimicrobial activity of Actinomycetes No. 101 was screened by paper disc. The extract of cultured cell and broth inhibited the growth of Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, but the inhibition action was week against yeast and mold.
A thermotolerant yeast strain, Saccharomyces cerevisiae KNU5377 (abbreviated as KNU5377, was exposed to inorganic acids including sulfuric, nitric and hydrochloric acid. As a stressor, each inorganic acid is very easily dissociated in water, resulting in lowering environmental pH. When compared with a reference S. cerevisiae ATCC24858, KNU5377 could overcome such a severe condition containing a final 0.4% concentration of sulfuric acid or nitric acid to grow at the overnight culture, but this reference could not. Additionally, this strain showed a surprisingly strong tolerance by surviving despite of exposure to the regime of 0.35% of hydrochloric acid for over 90 min and also to 0.6% of sulfuric acid for 30 min. On the contrary, both strains could not survive against a final 0.45% concentration of nitric acid. This strain KNU5377 could produce ethanol of 3% in 2 days by using the fermentation medium containing a final 0.3% concentration of sulfuric arid. Moreover, change into a final 0.2% concentration of sulfuric acid caused this strain to enhance fermentation productivity up to about 4.5% even at $40^{\circ}C$. In exposure to a final 0.2% of sulfuric acid for 60 min, trehalose was most accumulated within 30 min in KNU5377, and this suggested a cellular defense system led by this disaccharide was profitable for this strain to lead to no morphological changes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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