We examined the responses of PBMCs to house dust mite (HDM) allergen in atopic and healthy, non-atopic dogs to identify differences in lymphocyte reactivity that might reflect the immunologic status of atopic dermatitis. Thirteen of 20 (65%) atopic dogs showed a positive lymphocyte proliferative response to HDM allergen. The rate of response was significantly higher in the atopic dogs than that in healthy, non-atopic dogs insensitive to the allergen (P = 0.007). The proliferative responses were positively correlated with the level of HDM-specific IgE in serum (P = 0.035), and were thereby confirmed to reflect the activity of lymphocytes competent to promote IgE production. These results suggest that HDM-specific lymphocytes were present in peripheral blood and played a role in the pathogenesis of canine atopic dermatitis.
Clonorchis sinearis is a liver fluke which is the most prevalent helminth of humans in Korea. The better diagnostic measure of clonorchiasis is required for its nationwide control program. The present study observed antigenic bands of C. sinensis and reacting immunoglobulins in serum of infected residents. Adult C. sinensis were recovered from experimentally infected rabbits and soluble crude extract of the worms was used as the antigen after supplementation of E-64, a cysteine proteinase inhibitor. SDS- PAGE of the crude antigen resolved more than 20 protein bands between 200 and 14 kDa. The sera of infected humans collected at an endemic village showed specific IgG and IgE antibodies but little IgM and IgA antibodies. The protein bands of 94, 80, 72, 68, 52, 47, 43, 37, 34, and 28-25 kDa strongly reacted with serum Ig(GMA) or IgG antibody and 64, 62, 52, 47,44, 34,28, and 26 kDa bands reacted with serum IgE antibody. However, the 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa bands of C. sinensis antigen were found non specific. The protein bands of 43, 34, and 28-25 kDa of C. sinensis are primary target molecules of further analysis.
In vitro IgE class switching could be induced through co-culture of CD40L-expressing KU812 cells and CD40-expressing B cells in the presence of IL-4 or IL-13. It has been generated several B cell lines, which produce rice allergen (RA)-specific IgM antibody by in witγo immunization (IVI) using peripheral blood lymphocyte (PBL). In this study, induction of RA-specific IgE antibody by KU812 cells was attempted. Before co-culture, we determined the CD40 expression in RA-specific B cell lines, RA9G11 and the CD40 ligand (CD40L) expression in activated KU812 cells by treatments with phorbol myristate acetate (PMA) and ionomycin for 6 hrs. Flow cytometric analysis shown that RA9G11 and activated KU812 cells expressed high level of CD40 and CD40L, respectively. RA9G11 cells were cultured with activated KU812 cells for 12 days in the presence of IL-4 for IgE class switching. Mature $C{\varepsilon}$ mRNA level and RA-specific IgE spot forming cells (SFC) were observed in all culture condition, and especially, high level of RA-specific IgE synthesis was determined the same ratio of RA9G11 and activated KU812 cells in the presence of 50U IL-4. Therefore, induction of RA-specific IgE synthesis by activated KU812 cells can be contributed in the application for allergic therapy and prevention.
기니픽과 New Zealand White Rabbit에서 PDT-Hepa에 대한 항원성 시험을 실시하였다. 1) Active Systemic Anaphylaxis (ASA), 2) Passive Systemic Anaphylaxis (PSA), 3) Passive Custaneous Anaphylaxis (PCA) 시험을 실시한 결과 ASA, PSA 실험에서 anaphylaxis와 관련된 어떠한 특이적인 임상증상도 나타나지 않아 PDT-Hepa는 기니픽과 토끼에서 항원성이 없는 것으로 보인다. 또한 PCA 실험에서 청색반점이 관찰되지 않은 것으로 보아 PDT-Hepa specific IgE는 생성되지 않는 것으로 판단된다.
Antigenicity tests-ASA(Active Systemic Anaphylaxis), PSA(Passive Systemic Anaphylaxis), PCA(Passive Cutaneous Anaphylaxis)- of Bovine Somatotrophine(BST, Lucky Ltd.) were performed according to the established regulations of National Institude of Safety Research. The results were as follows: 1. No specific clinical signs related anaphylaxis were observed. Therefore, it was considered that BST has no antigenicity in guinea pigs and rabbits. 2. No blue spots were observed on the back of guinea pig in the peA test; BST-related IgE was not produced.
Administration of hot water extracts from Acanthopanax senticosus (GF-2) prophylactically and therapeutically inhibited the systemic anaphylactic shock induced by compound 48/80 in mouse. GF-2 significantly inhibited the production of histamine and eosinophyl in mouse serum through the injection of compound 48/80 in a dose-dependent manner. GF-2 inhibited dose dependently $TNF-{\alpha}$ production of peritoneal exudative cells activated by lipopolysaccharide. Intraperitoneal injection of GF-2 suppressed the production of IgG1 and IgE antibodies in mice immunized with a mixture of ovalbumin and aluminium hydroxide. These results suggest that GF-2 may be beneficial for the treatment of nonspecific and specific anaphylactic reactions and can be potentially applied to the treatment of allergic diseases.
This experiment was carried out to develope the production of specific yolk antibody from laying hens immunized with antigens from Salmonella enteritidis. Antigenic protein isolated from the flagella of Salmonella enteritidis, determined by SDS-PAGE, was pure and has a molecular mass of approximately 54.6 kDa. It was observed that the antibody titers both in egg yolk and serum were performed at 2 weeks after immunization with flagella antigen to the laying hen. And the level was increased gradually to 6 weeks after immunization. At the time of 6 weeks, the antibody titer of yolk showed higher than that of serum. According to the results of specificity test(ELISA), the yolk antibody did not react with different bacterial strains(S. choleraesuis, ETEC Kl2:K99, K88,987P), but reacted only with S. enteritidis strain. The contents of immunoglobulin(IgY) in an egg yolk was 106mg approximately. By the isolation procedure of IgY from the egg yolk, 88.3 percent of IgY content was recovered in this study.
Jang, Joo Young;Kim, Hyo Bin;Lee, So Yeon;Kim, Ja Hyung;Kim, Bong Seong;Seo, Hee Jung;Hong, Soo-Jong
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.49
no.3
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pp.298-304
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2006
Purpose : We compared the asthma predictive index(API) and the modified asthma predictive index (mAPI) of the Tuscon Children's Respiratory Study Group in Korean children with recurrent wheezing. We investigated the atopic profiles and presence of allergen sensitization of each risk group, and ascertained the significant clinical risk factors. Methods : Two hundred and sixty two children, who visited for recurrent wheezing from 1998 to 2005, were enrolled and divided into groups by API and mAPI. We investigated the history of the patients and their families, atopic profiles, and sensitization to aeroallergen and food allergens. Twenty nine children were followed up to 6 years of age and we evaluated the sensitivity, specificity and positive and negative predictive value of both indices. Results : The high risk group of API were of older age, were more likely to be sensitized to aeroallergen(P=0.001) and food allergen(P=0.034) and had higher levels of total eosinophil count, eosinophil percent, serum ECP, total IgE, and D.p-, D.f-specific IgE. High risk group of mAPI showed higher levels of atopic markers such as egg-, milk-, D.p- and D.f-specific IgE. Even though API did not include allergen sensitization, the high risk group was more significantly sensitized to common allergens than the low risk group. Twenty nine children were followed up until 6 years of age; therefore 15 children were diagnosed as asthma, clinically. The sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of mAPI were higher than API. Conclusion : Both high risk groups of API and mAPI had higher levels of atopic markers and were more sensitized to common allergens. These findings suggest that sensitization to aeroallergens and food allergens are more objective markers as asthma predictive indices. In addition, mAPI is a more reliable index in predicting asthma in Korean children with recurrent wheezing than is API. But only 29 patients were followed until the age of 6, so we need to include more children with long term follow up for future study.
We performed the PARR (PCR to detect antigen receptor rearrangements) test on DNA isolated from twelve archival canine cytological slides including nine lymphoma, two reactive lymphocytes and one sample from Ehrlichia canis infected dog. As a result, our PCR control gene, $C{\mu}$, was successfully amplified from all of the DNA samples. Six out of nine lymphoma samples showed a clonal rearrangement of immunoglobulin gene whereas three samples did a clonal rearrangement of T cell receptor gamma ($TCR{\gamma}$) gene. However, we observed no visible or clear bands from PCR conducted using our antigen receptor rearrangement primers on DNA from a reactive lymphoid cell proliferation used as a negative control. False-positive amplification in $TCR{\gamma}$ gene was observed only in one sample from E. canis infection. The use of archival cytological specimens demonstrated in this study offers potential advantages for cost-effective specimen acquisition and efficient high-fidelity DNA analysis.
Two hybridoma cell lines against Cwptosporinium possum oocysts nFRl-CN911 were produced. The isotype of these 2 monoclonal antibodies (mAbs) was IgG2b (lE7.2) and and IgM (C6). Enzyme immuno-transfer blotting analysis showed that 157.2 reacted specifically to 36 kDa protein and C6 reacted to 67 and 70 kDa proteins. C. pcnlum was bound specifically to the surface region of oocysts by these mobs. No cross-reactivity was observed with tachyzoites of ToxopLosma gonnii and oocysts of Eimeria zuernii,5. bouis and E. canadensis of bovine origin. The indirect immunofluorescence assay (IIF) using mAb C6 was successful with counterstain. With the IIF using mob C6, oocysts appeared as 3 to $5{\mu}m$ spherical objects fluorescing bright apple green against a reddish dark background. The IIF using mAb C6 was agreed in specificity and sensitivity with those of a commercial diagnostic kit. These results demonstrated that the produced mAbs were specific to C. parvum and that the mAb C6 could be used for diagnosis of cryptosporidiosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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