In order to identify the morphological changes of tissues in mouse after irradiation. We have observed the redistribution of LDH isozymes and the morphological changes of skeletal muscle, heart, kidney, liver and testis in mouse according to variation amount with the time after the 1 Gray and 3 Gray irradiation each. As a result of H-E (hematoxylin-eosin) stain, the apoptotic bodies were more easily observed in the liver than the other tissues and the quantity of the apoptotic bodies was proportionated to radiation amount. The number of apoptotic bodies was shown the highest at 1 day in most tissues and at 7 day in testis after irradiation. TUNEL (terminal deoxyribonucleodtidyl transferase-mediated dUTP-digoxigenin nick end labeling) staining was shown the same results as H-E staining. After the irradiation, the protein content was reduced in tissues except kidney. And protein content was reduced in all tissues at the initial period of 2 hours after 3 Gy irradiation. But it increased at 7 days after irradiation. LDH (EC 1.1.1.27, lactate dehydrogenase) activity was increased mostly in tissues at the early stage after 1 Gy irradiation. The maximum activity was detected earlier stage after 1 Gy irradiation than 3 Gy irradiation. The activity of LDH $A_4$ isozyme was decreased in the skeletal muscle, heart, kidney, and testis. The activity of $B_4$ and $A_2$$B_2$ sozyme was increased in the skeletal muscle and heart, and the activity of heterotetramer isozyme was increased in kidney The activity of $A_4$ isozyme in liver was detected high level and the activity of isozyme including subunit C elevated in testis. Therefore, LDH isozyme seems to play a role of lactate oxidase in most tissues except liver after irradiation. These data support that LDH isozyme is predomintly involved in the aerobic metabolism.
Heat shock proteins serve as chaperone by preventing the aggregation of denatured proteins and promote survival of pathogens in harsh environments. In bacteria, ethanol shock induced the major chaperone GroEL and DnaK, but in Streptococcus pneumoniae, it induced neither GroEL nor DnaK but alcohol dehydrogenase (ADH). In this study, ADH gene encoding a 104-kDa (p104) protein was identified and characterized. The deduced amino acid sequence of pneumococcal ADH shows homology with other members of the ADH family, and particularly with Entamoeba histolytica ADH2 and E. coli ADH. S. pneumoniae adh is composed of 883 amino acids and its estimated isoelectric point is 6.09. Although ADH is conserved between S. pneumoniae and E. coli, immunoblot analysis employing antisera raised against pneumococcus ADH demonstrated no cross-reactivity with ADH analog in Eschericha coli, Staphylococcus aureus and human HeLa cells. Also secretion of ADH was demonstrated by subcellular fractionation and immunoblot analysis of proteins. These results suggest that S. pneumoniae ADH could be a highly feasible candidate for both diagnostic marker and vaccine.
To confirm the function of lactate dehydrogenase (LDH) (EC 1.1.1.27, LDH), its metabolism was studied by activity, kinetics, and isozyme analysis in tissues of Ldh testis-specific C expressing mice (Mus musculus) maintained in a state of starvation for 48 hr and 96 hr. In skeletal muscle, liver, and eye tissues, LDH and LDH $A_4$ activity increased and anaerobic metabolism predominated. While LDH activity in the heart and kidney tissues decreased, LDH $B_4$ activity increased and aerobic metabolism predominated, producing pyruvic acid. In the testis tissue, LDH $C_4$ activity decreased. In the brain tissue, LDH activity increased, but the isozyme change was small and the amount of pyruvic acid decreased. $K{_m}^{PYR}$ increased in tissues other than kidney tissue, and the affinity for pyruvic acid decreased. Consequently, in Ldh-A and B-expressing tissues, the activities of isozymes with higher concentrations increased. However, in Ldh-A, B, and C-expressing tissue, $C_4$ decreased and the function of the tissue also decreased. In particular, LDH in brain tissue played a role as a pyruvate reductase. Therefore, this process might be the mechanism for producing energy in the state of starvation.
Metabolism of lactate dehydrogenase (EC 1.1.1.27, LDH) was studied to identify the function of LDH-C. Tissues of LDH liver-specific Ldh-C expressed Carassius auratus and eye-specific Ldh-C expressed Lepomis macrochirus after starvation were studied. LDH activity in liver tissue from C. auratus was increased after starvation. And LDH specific activity (units/mg) and LDH/CS were increased in tissues. It means the anaerobic metabolism was taking place in C. auratus after starvation. LDH B4 isozyme was decreased in skeletal muscle and increased in heart tissue. LDH C4 isozymes those showed in eye and brain tissues were identified as liver-specific C4 isozymes and disappeared after starvation. And C hybrid in eye, A4 isozyme in brain, and both C hybrid and C4 isozyme in liver tissue were increased, respectively. In L. macrochirus, the level of variation of LDH activities was low but greatly increased especially in eye tissue and LDH A4 and AC hybrid were increased in brain tissue. The LDH activities in tissues from C. auratus and L. macrochirus remained 30.30-18.64% and 25-18.75%, respectively, as a result of the inhibition by 10 mM of pyruvate. The KmPYR values of LDH in C. auratus were increased. As a result, LDH liver-specific C4 isozyme was expressed in liver, brain and eye tissues during starvation. It seems metabolism of lactate was predominant in brain tissue. After starvation, the liver-specific LDH-C was affected more than eye-specific LDH-C.
The aim of this study was to examine the metabolic adjustment of lactate dehydrogenase (EC 1.1.1.27, LDH) isozymes to a change in dissolved oxygen (DO) in bluegill (Lepomis macrochirus). After bluegills were adapted to a constant environment in an aquarium, the DO was changed to investigate the activity of LDH isozyme and the relative ratio of subunits A, B, and C for each tissue. When the DO was decreased from 18 ppm to 6 ppm, LDH in skeletal muscle, heart, and brain tissues recovered to the level of control activity within 12, 12, and 6 hr, respectively. LDH activity changed in accordance with a change in DO. The compensation was performed rapidly and is thought to be an important function of LDH in enabling bluegills to adapt to their environment. In bluegill heart, eye, and brain tissues, the relative ratio of subunit A increased and showed a tendency to recover similarly to the subunit ratio of control groups up to 12 hr. It is thought that the anaerobic metabolism using subunit A was increased in the initial stage when DO was changed. In addition, the results revealed that subunit C was more similar to subunit A than subunit B. In bluegills, subunits A and C of LDH seem to be evolutionarily similar. LDH isozymes, mainly containing subunits A and C, are likely responsible for the function of pyruvate reductase, which plays a role in making the bluegill adapt to a hypoxic environment through anaerobic metabolism.
근세포의 분화에 있어서의 근특이 단백질의 합성 순서를 구명하기 위하여 계배 근세포를 2$\\sim$9일간 배양하면서 단백질합성야상을 SDS-polyacrylamide 겔전기 영동법, 등전점초점2차원 전기영동법 및 방사자기법으로 분석하였다. Actin은 분화의 초기부터 활발히 합성되어 그 양이 다량으로 축적되나, myosin은 배양 3일째부터 대량 합성되기 시작하였다. Myosin의 대량합성시기는 배양 근원세포가 융합을 활발히 일으키는 시기와 거의 같았다. Myoglobin은 분화초기부터 서서히 합성축적되기 시작하여 배양 5일에서 최대치에 달하였다. Creatine phosphokinase는 배양 3일만에, 그리고 glyceraldehyde dehydrogenase는 6일만에 전기영동상에 검출되었다. Tropomyosin $\\alpha$와 $\\beta$, 그리고 troponin C는 분화초기부터 비교적 다량 합성되고 있었다. 젖산탈수소효소의 활성은 배양 2$\\sim$5일 사이에서 급격히 증가하고 이후 거의 변화가 없었다. 이 효소의 동위효소 조성은 초기 근원세포에서는 $H_4$와 $H_3M$형이 많으나 분화가 진행됨에 따라 $HM_3 와 M_4$형이 서서히 출현하였다. 그리고 배양 5일만에 5종의 동위효소가 모두 검출되었다.
A quantitative analytical method has been established for the measurement of inosine 5'-monophosphate dehydrogenase (IMPDH) activity in human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) by ion-pair reversed-phase high performance liquid chromatography equipped with ultraviolet detection (HPLC/UV). IMPDH is a ${\beta}$-nicotinamide adenine dinucleotide hydrate (NAD+)-dependent dehydrogenase in which the enzyme converts inosine 5'-monophosphate (IMP) into xanthosine 5'-monophosphate (XMP). Its activity was measured by quantifying a HPLC chromatogram corresponding to XMP produced during the incubation of lysed PBMCs with IMP as a substrate and $NAD^+$ as a coenzyme. XMP produced was detected at a wavelength of 260 nm. The mobile phase was composed of a mixture of 37 mM potassium dihydrogen phosphate containing 7 mM tetra-n-butylammonium hydrogen sulfate adjusted to pH 5.5 and methanol (85:15, v/v) with a flow rate of 1 mL/min. The calibration curve was linear ($r^2$=0.999999) in the range of $0.2-50.0\;{\mu}M$ and the limit of quantification (LOQ) was $0.2\;{\mu}M$. The intra- and inter-day precisions were between 0.88-1.47% and 0.85-5.24%, respectively. The intra- and inter-day accuracies were between 98.74-99.99% and 99.95-101.65%, respectively. IMPDH activity in 11 Korean healthy volunteers ranged from 18.29 to 36.60 nmol/h/mg protein (mean = $27.70{\pm}6.28\;nmol/h/mg$ protein).
Kyung-Hyun Park;Su-Han Koh;Tae-Kyu Kim;Seon-Young Son;Soo-Min Ha;Do-Yeon Kim
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.40
no.6
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pp.1309-1321
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2023
This study was conducted by dividing L-arginine intake group (n=14) and placebo group (n=14) to investigate the effect of L-arginine intake on athletic performance, lactate, lactate dehydrogenase, and ammonia of men's college Taekwondo Kyorugi players during 8-week of intensive winter training. The L-arginine intake group consumed a total of 3 g, including 1 g for breakfast, 1 g for lunch, and 1 g for dinner, and the placebo group consumed maltodextrin in the same way. The 8-week winter training program was conducted at 70-90%HRR (heart rate reserve). Two-way repeated measures ANOVA was used for the interaction between the L-arginine intake group and the placebo group of the measured data, paired t-test was used for the difference between the periods within the group, and the difference between groups was analyzed using independent t-test. As a result, there was an interaction between groups in the average number of kicks among the performance ability through the TAAA (Taekwondo-specific aerobic anaerobic agility) test , and the main effect between groups was shown (p<.05). In addition, there was an interaction between groups and time in the kick fatigue index (p<.05). In lactate, the time-interaction were shown (p<.05) and interaction effects and inter-time main effects were observed in lactate dehydrogenase (LDH)(p<.05). In the case of ammonia, the interaction effect between the group and time was shown (p<.05). These results show that L-arginine intake can play a positive role in quickly synthesizing nitric oxide in blood vessels and expanding blood vessels to quickly remove fatigue-causing substances in the body for athletes who are easily exposed to fatigue after high-intensity training for male college Taekwondo Kyorugi players. Therefore, it is recommended to take L-arginine as a way to improve the performance of high-intensity elite Taekwondo Kyorugi players and recover from fatigue.
Soil management for environment-friendly agriculture depends on the effects of soil microbial activities and soil fertility. To improve soil health for the upland crops, this study evaluated a relationship between soil chemical properties and soil microbial diversities at 25 sites in upland soils in Gyeongnam Province. The average nutrients in the upland soils were 1.7 times for available phosphorous, 1.4 times for exchangeable potassium and 1.5 times for exchangeable calcium higher compared to recommend concentrations in the upland soils. We found a significant positive correlation between the soil organic matter and the soil microbial biomass C (p<0.01). Contents of organic matter and dehydrogenase in the inclined piedmont soils were significantly higher than those in the other topographical soils (p<0.05). In addition, concentrations of organic matter and microbial biomass C in the loam soils were significantly higher than in the silt loam soils (p<0.05). In principal component analyses of chemical properties and microbial populations in the upland soils, our findings suggested that available phosphorous should be considered as potential factor responsible for the clear upland soils differentiation. The soil organic matter was positive correlation with Bacillus sp. and fungi, whereas soil pH was also positive correlation with Pseudomonas sp. in upland soils.
The effects of sperific inhibitors of $3\beta-hydroxy-\Delta^5-steroid\;dehydrogenase$$(3\beta-HSD;\;an\;enzyme\;catalyzing\;conversion\;of \Delta^5\;steroids\;to\;\Delta^4 steroids),$ cyanoketone and trilostane, on $^3H-pregnenolone$ metabolism in isolated ovarian thecal layers have been investigated in vitro. At all doses of cyanoketone $(10^{-5}\;and\;10^{-4}\;M)$ and trilostane $(10^{-5}\;and\;10^{-4}\;M)$$(3\beta-HSD$ enzyme activity that transforms pregnenolone to $17\alpha-hydroxyprogesterone$ was inhibited in the thecal layers. Trilostane appeared to be more efficient than cyanoketone. Trilostane at doses of $10^{-8},\;10^{-7},\;10^{-6},\;and\;10^{-5},\;M/ml$ caused a dose-response inhibition of $\Delta^4$ steroids accumulation in the medium from pregnenolone, but not completely blocked the conversion of $\Delta^5\;to\;\Delta^4$ steroids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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