• 한국전통조경학회지
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• 제28권4호
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• pp.49-63
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• 2010

본 연구의 목적은 호남지방 전통 별서형 정자의 입지와 배치계획 범주에서 보이는 건축적 공간체험구조로써의 구별수법에 대한 고찰에 있다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 연구를 통해서 이러한 구별수법들은 거경-궁리, 격물-치지의 수양적개념을 전제하고 있음을 살펴볼 수 있었으며, 자연합일은 참된 가치의 인식과 과거의 좁은 인식적 틀을 벗어난 인식적 의미개방을 전제로 하여 앎의 궁극적 상태로써의 '완상'을 통해 이루어진다고 할 수 있다. 따라서, 정자권역에서의 인식적 구별개념이 필요하며, 구체적인 정자권역의 구별개념으로는 속계로부터 1) 정자권역을 구별하기 위한 방법으로써의 '탈속적 떼어놓음'과 2) 인식개방을 위한 '관조적 거리둠'의 개념이라는 서로 다른 두 가지 방법이 있음을 본 정자연구를 통해 알 수 있었다. 본 연구에서 별서 정자원림에 적용되어진 구별을 위한 명확한 수법적 고려를 확인할 수 있었으며, 간접권역 진입부와 정자직접권역 초입부에서의 구별수법들에 의해서 성취되어지고 있었다. 입지적 선정차원인 정자 간접권역 진입부에서는 1) 언덕-넘음(돌아듬), 2) 물-건넘, 3) 산-높음, 4) 숲-통과, 5) 입구-좁음의 구별수법을 사용하고 있음을 알수 있었으며, 배치적 차원인 정자 직접권역 초입부에서의 구별수법으로는 1) 공간적 거리둠과 2) 물(계류)에 의한 거리둠, 3) 물(연못)과 공간적 거리둠의 조합에 의한 구별수법으로 나누어 볼 수 있었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제21권3호
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• pp.247-253
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• 1997

본 연구는 돼지난포란의 체외수정시 정소상체 미부정자의 형태학적 정상정자 비율에 따른 수정율과 배발달율을 조사하고자 실시하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 정소상체 미부정자의 형태학적 정상정자 비율을 10%, 10~30%, 50%로 구분하여 수정율과 배발달율을 조사하였던 바, 50%에서 각각 64%, 26%로 나타나 다른 두 군보다 현저히 높게 나타났다 ( 10%: 27%, 6%, 10~30%: 36%, 5%) (p<0.01). 2. 50% 이상의 정상정자를 가진 정소상체 미부정자를 100% (5$\times$105 cells/ml)로 조정하여 수정하였던 바, 정소상체 미부정자군의 수정율과 배발달율 (63%, 27%)은 동결 융해된 사출정자군 (56%, 35%)과 유사한 결과를 나타냈다. 3. 또한, 정소상체 미부정자군에서 난자와 정자의 비율 (1:6000, 1:6650, 1:7700, 1:10000)에 따라 수정률과 배발달율을 조사하였던 바, 난자당 정상정자 비율이 1:6000 (68%, 32%), 1:6650 (89%, 31%)일 때 가장 높은 수정율과 배발달율을 나타내었다. 따라서, 정소상체 미부정자의 형태학적 정상정자 비율이 50%일 때, 동결 융해된 사출정자와 유사한 배발달을 얻을 수 있으며, 이러한 결과로 미루어 볼 때, 정소상체 미부정자를 체외수정에 사용함에 있어서 정자의 형태학적 평가가 선행되어진다면 더욱더 효과적인 배발달을 유기할 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국가축번식학회지
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• 제25권2호
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• pp.163-169
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• 2001

본 연구는 마우스 정자-난자 결합분석 법(oocytes-sperm binding assay; OSBA)을 이용하여 단백질원, 배양액의 질, 난자의 성숙도에 따라서 정자와 난자의 결합능력을 알아보고 그 유용성을 알아보기 위하여 실시하였다. 4~5주령의 hybrid(C57BL/6 $\times$ CBA/N) F$_1$ 암컷에서 회수된 미수정란에 0.1% hyaluronidase를 이용하여 난구세포를 제거하였으며, 제1극체의 존재유무에 따라 Met. II(mature)와 Met. I(intermediate mature)로 구분하였다. 암컷과 동일 계통의 8주령 이상 된 수컷에서 회수된 정소상체 미부정자를 37$^{\circ}C$에서 10분간 배양하였다. 배양된 정자부유액은 단백원 무첨가배양액과 1:5로 희석하여 10분간 배양한 다음 3 ${\mu}\ell$를 10$\pm$2개의 난자를 들어있는 배양액 소적(30 ${\mu}\ell$)에 넣어서 정자와 난자의 결합을 유도하였다. 정자 주입 후 3시간 혹은 24시간째에 난자를 뽑아내어 세척하였으며, 도립현미경(100$\times$)에서 난자에 부착된 정자의 수를 세었다. 수정란을 이용한 정도관리를 위하여 과배란이 유도된 암컷은 수컷과 합사시켰으며, hCG 주사 16~18시간째에 전핵기의 1세포 수정란을 회수하였다. 단백질원의 종류에 대한 효과를 확인하기 위하여 OSBA를 실시한 결과, 수정 3시간째에 난자당 하나 이상의 정자가 부착된 난자의 비율은 BSA첨가군, 무첨가군, FBS 첨가군의 순으로 유의한 차이를 나타내었다(100% vs. 60.2% vs. 2.1%). 한편, BSA 첨가군에서 정자의 결합능력이 우수하였으나 FBS는 매우 유해하였으며 FBS의 농도가 5%까지는 증가함에 따라 유의한 차이를 나타내었다. 따라서 투명대에 정자가 부착에 있어서 단백원이 매우 중요한 역할을 하며, OSBA는 정자와 난자의 결합에 결정적인 영향을 미칠 수 있는 배양조건을 명확히 판별할 수 있음을 시사하였다. Met. II(mature)와 Met. I(intermediate mature) 난자를 단백원 무첨가, 15% FBS, 0.4% BSA 및 10% AF(양수)가 첨가된 Ham's F-10 배양액에서 OSBA를 실시한 결과, 난자의 성숙도에 상관없이 정자의 결합능력은 비슷한 양상을 보였으며, BSA첨가군, 양수첨가군, 무첨가군, FBS첨가군 순으로 높게 나타났다. 이러한 결과는 OSBA에서 Met. II 난자 대신에 Met. I난자를 이용해도 비슷한 결과를 얻을 수 있음을 시사한다. 생쥐 1세포기배에서 배반포까지의 배발달율을 기준으로 Ham's F-10배양액을 평가하여 일련번호 151은 불량(poor), 152는 양호(good)로 판정한 다음, 동일한 배양액에 OSBA를 실시한 결과 생쥐 1세포기배의 결과와 마찬가지로 일련번호 152 배양액이 151 배양액보다 유의하게 높게 나타났다. 따라서 OSBA는 기존의 정도관리 방법과 동일한 효과를 기대할 수 있을 것이다. 결론적으로, OSBA는 배양액 조건에 따라 정자의 결합능력이 다르다는 것을 보여주었으며, 정토관리 방법으로서의 유용성을 확인시켜 주었다. 또한 쉽게 준비할 수 있는 생쥐의 난자와 정자를 이용하였으며, 배양시간이 3시간으로 짧고, 평가방법이 간편해 시간적, 경제적으로도 효율성이 높다고 사료된다.

• 대한의용생체공학회:학술대회논문집
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• 대한의용생체공학회 1993년도 추계학술대회
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• pp.17-19
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• 1993

정자의 형태 분석은 운동 분석과 더불어 불임의 원인 규명 및 진단에 중요한 정보를 제공한다. 본 연구에서는 Diff-Quick 염색된 정자의 영상에 대해, 제안된 Image segmentation 방법을 적용해 정자 형태 특성을 검출해 내는 알고리즘을 구현했다. 비디오 신호로 보내진 정자 영상을 디지탈화하고, 정확한 테두리를 찾은 뒤, 정자 머리 부분의 형태 정보를 추출한 후, 그 특성을 나타내는 parameter 들을 추정하였다.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권1호
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• pp.1-8
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• 1996

돼지난포란의 체외성숙, 체외수정 및 체외 배양체계의 개발은 핵치환에 의한 복제동물 및 형질전환 동물생산 등과 같은 첨단생명공학연구 추진에 크게 기여할 것이다. 그러나 돼지난자의 체외수정시 다정자 침입은 큰 문제점으로 지적되고 있는데, 그 원인 및 개선책은 많은 연구에도 불구하고 정확히 밝혀져 있지 않다. 따라서 본 연구는 돼지 난포란으로부터 채취한 난자를 체외성숙 후, 체외수정시 체외수정 배양액에 난관액을 첨가하여 수정율 및 다정자 침입율을 조사하고, 또한 체외수정 후 체외 배 발달율을 조사할 목적으로 실시하였다. 수정용 배양액에 1과 5% 난관액을 첨가하였을 때 정자침입율과 수정시 난자에 침입한 정자의 평균 수가 감소하였으며, 또한 투명대에 부착된 정자의 수도 감소하였다. 난관액이 첨가된 수정용 배양액에서 정자를 1.5와 3시간 동안 전 배양을 실시하였을 때 정자의 수정능 획득과 첨체반응이 대조군에 비해 증가되었다. 그리고 1% 난관액이 포함된 배양액에서 체외수정된 난자의 배반포까지 발달율은 18.9%로 대조구의 12.4%보다 유의성 있게 높았다. 이러한 연구결과는 난관 분비액의 어떤 인자가 정자의 첨체반응을 유도해서 정자침입율 및 다정자 침입을 감소시키고, 이어 배발달율을 증가시킨다고 사료된다.

• 한국동물학회지
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• 제37권3호
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• pp.416-427
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• 1994

성숙한 한국산 집고양이(Felis domesticn)의 정자변태 과정을 알아보기 위하여 정소 및 부정소의 조직을 채취하여 광학현미경과 전자현미경으로 관찰한 결과는 다음과 같았다. 1 세포 구조의 차이에 따라 한국산 집고양이의 정자변태과정을 출지, 두모. 첨체. 성숙 그리고 이탈단계로 구분하였는데. 즉 골지, 첨체 및 이탈단계를 각각 전 ·후기로, 두모단계는 전 ·중 ·후기로 성숙단계는 1단계로 하여 전체를 10기로 나눌 수 있었다. 2 정자의 꼬리는 두모중기부터 형성하기 시작한다. 3 염색질 과립은 골지단계에서 응축되기 시작하여 정체후기에서 구형의 형태로 진행되고 성숙단계에서 소멸된다.

• 한국임상수의학회지
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• 제24권4호
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• pp.486-492
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• 2007

개 정액의 정장은 정자를 동결 보존하기전 정액에서 제거되어진다. 그러나 근래 개정장이 정자를 냉각하고 동결하는데 유효한 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 그러므로 본 연구에서는 정자를 냉각과 동결하기 전 정장을 정자 희석액에 첨가하여 정장이 정자의 생존성에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 건강한 4마리의 수캐로부터 정액을 채취 혼합한 후 300g에서 10분간 원심분리하여 얻은 상층액을 다시 원심분리하고 상층액을 회수하여 정장으로 사용하였다. 정자의 희석액으로는 Egg yolk-Tris(EYT)를 사용하였다. 다음과 같이 두 가지 실험을 실시하였다. 실험 1: 정장이 0, 20, 40, 80, 100%비율로 포함된 EYT배지에 정자를 희석하여 두 시간 동안 $4^{\circ}C$나 $25^{\circ}C$에서 보관하였다. 정자수는 $2{\times}10^8/ml$로 조정하였다. 실험 2: 전체적으로 9개 실험군으로 구분하여 4개 실험군은 정장이 20, 40, 80, 100%포함된 EYT배지에 각각 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. 나머지 4개의 실험군은 EYT배지에 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 각각 정장이 20, 40, 80, 100%포함된 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. 대조군으로서 정장을 포함하지 않은 EYT배지에 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. glycerol의 최종농도는 0.6M, 정장의 최종농도는 10, 20, 40, 50%이었으며, 정자수는 $1{\times}10^8/ml$로 조정하였다. 정자를 straw에 충진하고 분당 $25^{\circ}C$의 냉각율과 액체질소를 이용하여 동결하였다. 융해는 $38^{\circ}C$에서 1분간 실시하였다. 정자 운동성, 정자 형질막 보존성(생존력), 정자 첨단체의 보존성을 검사하여 정자의 생존성을 검증하였다. 정자의 운동성은 400배율에서 현미경으로 관찰하였으며 생존력과 첨단체 보존성은 각각 이중형광염색과 Pisum sativum agglutinin을 이용하여 검사하였다. 실험 1의 결과는 보존온도와는 관련없이 희석액에 정장을 첨가하는 것은 정장이 포함되지 않은 희석액과 비교하여 정자의 운동성을 향상시키지 못했다. 실험 2 결과, 동결 전 냉각상태에서 정장을 포함한 EYT+0.6 M glycerol배지에 희석되었던 정자가 정장을 포함하지 않은 EYT+0.6 M glycerol배지보다 높은 진행운동성을 보였다(P<0.05). 그러나, 동결 융해 후 정장을 포함한 EYT+0.6 M glycerol배지에 희석되었던 정자의 생존력은 정장을 포함하지 않은 EYT+0.6 M glycerol배지보다 낮거나 비슷하게 나타났다. 본 실험의 결과를 요약하면 비록 정장이 동결보호제가 포함되지 않은 EYT에 혼합되었을 경우는 냉각되어진 정자의 생존성을 향상시키지는 못했으나 동결보호제가 포함된 EYT에 정장을 혼합한 경우 정장은 정자의 냉각 후 정자의 운동성을 향상시켰다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제35권2호
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• pp.131-141
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• 2008

목 적: 무정자증 불임부부에서 신선 (fresh) 고환정자 (testicular spermatozoa)와 냉동보존-융해(cryopreserved-thawed) 고환정자를 사용한 난자세포질내 정자주입술 (intracytoplasmic sperm injection, ICSI)의 결과를 비교하고자 하였다. 연구방법: 신선 고환정자 및 냉동보존-융해 고환정자를 사용하여 ICSI 시술을 시행하기로 계획된 총 109주기 (66명)를 대상으로 하였고 신선 고환정자를 사용하기로 계획한 군 (신선 고환정자군, fresh group)에는 92주기 (61명)이 포함되었고 냉동보존-융해 고환정자를 사용하기로 계획한 군 (냉동보존-융해 고환정자군, cryopreserved-thawed group)에는 17주기 (13명)가 포함되었다. 양 군간에 수정률, 착상률, 임신률, 유산률 등 ICSI 시술의 결과들을 비교하였고 통계학적 분석은 Mann-Whitney U 검정 및 Fisher의 정확한 검정을 적절하게 사용하였다. 결 과: 신선 고환정자를 사용하여 ICSI 시술을 시행하기로 계획된 총 92주기 중 9주기에서 고환정자를 추출할 수 없어 시술 주기가 취소되었다. 냉동보존-융해 고환정자군과 비교하여 신선 고환정자군에서 수정률이 높은 경향을 보였고 ($58.0{\pm}27.8%$ vs. $45.9{\pm}25.0%$, p=0.076) 양질의 배아 수는 통계적으로 유의하게 높았다 ($0.9{\pm}1.2$ vs. $0.2{\pm}0.5$, p=0.002). 그러나 임상적 임신율, 착상률, 유산율은 양 군간에 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 결 론: ICSI 시술을 위하여 냉동보존-융해 고환정자를 사용하는 경우 수정률 및 배아의 질이 감소하지만 임신율, 착상률, 유산율에는 영향을 미치지 않는 것으로 사료된다. 또한, ICSI 시술이전에 고환정자를 확보하고 냉동보존-융해 고환정자를 사용한다면 난자채취 당일 정자를 확보하지 못하여 주기를 취소하는 경우나 여성배우자의 불필요한 과배란유도를 줄일 수 있으며 반복적인 고환정자추출술로 인한 고환기능의 손상을 줄일 수 있는 유용한 방법으로 사료된다.

• 한국가축번식학회지
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• 제23권2호
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• pp.127-132
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• 1999

본 연구는 소형견 정액의 원정액과 정장제거 정액의 일반성상, 채취분획별 및 단기보존시 정자의 생존성과 아울러 동결보존시의 정자의 생존성에 대해 조사하고자 수행하였다. 1. 원정액과 정장제거 정액에 saline 및 Tris-buffer를 희석 후 각각 일반성상 검사를 실시했을 때 원정액의 경우 정자농도는 5.07$\pm$2.32$\times$$10^{6}$cells/$m\ell$, 정자의 운동성은 95.42$\pm$2.65%, 기행정자수는 4.42$\pm$0.15%로 나타났으며, RSP(saline 및 Tris-buffer)군의 경우 정자농도는 4.69$\pm$3.27~4.25$\pm$3.65$\times$$10^{6}$cells/$m\ell$, 정자의 운동성은 91.17$\pm$3.85~88.52$\pm$3.85%, 기형정자수는 6.57$\pm$0.43~5.54$\pm$0.52%로 나타났다. 2. 분획별 채취 전정액중 제 1 분획에서는 정액량이 0.92$\pm$0.7$m\ell$, 정자농도는 4.57$\pm$0.78$\times$$10^{6}$cells/$m\ell$, 정자활력은 10.72$\pm$3,21%, 기형정자수는 5.50$\pm$0.70%로 나타났으며, 제 2분획에서는 정액량이 2.14$\pm$0.19$m\ell$, 정자농도는 2.01$\pm$0.12$\times$$10^{6}$cells/$m\ell$, 정자활력은 95.44$\pm$4.21%, 기형정자수는 4.31$\pm$0.53%로 나타났다. 또한, 제3 분획에서는 정액량이 2.66$\pm$0.23$m\ell$, 정자농도는 2.35$\pm$0.21$\times$$10^{6}$cells/$m\ell$, 정자활력은 90.71$\pm$2.63%, 기형정자수는 6.33$\pm$0.91%로 나타났다. 3. 원정액과 정장제거 정액을 4$^{\circ}C$ 와 2$0^{\circ}C$ 및 37$^{\circ}C$ 에서 각각 보존했을 때 보존시간별 정자의 활력은 2$0^{\circ}C$ 의 경우 1, 6, 13, 24, 30 및 40 시간에서 각각 98.51%와 98.32%, 86.32%와 92.15%, 83.71% 와 89.20%, 74.29% 와 82.08%, 52.98% 와 72.07%, 15.45% 와 60.02%, 2.41% 와 37.19% 의 정자활력을 나타내어 4$^{\circ}C$와 37$^{\circ}C$에 비해 높은 정자운동성을 나타냈다. 4. 제 2 분획 정액과 정장제거 정액을 각각 제 1차 및 제 2차 희석액으로 희석 평형 시킨 후 동결 융해했을 때 정자의 생존율은 각각 33.3$\pm$8.7, 54.7$\pm$9.5%로서 대조군의 15.4$\pm$5.2% 에 비해 높게 나타났다.

• 한국가축번식학회지
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• 제11권1호
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• pp.42-62
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• 1987

본 실험은 성숙가토의 정자와 정장의 항원성을 조사하여 면역적 불임원인 규명에 필요한 기초자료를 얻고자 시도하였다. 인공질로 채취한 정액을 원심분리하여 얻은 정자와 정장을 항원으로 사용하였으며 항원성의 측정방법은 크로마토그라프에 의한 단백질 분리, SDS-PAGE, HPLC, 한천확산법, 전기영동, 수동적혈구응집방법 및 부동화시험이었다. 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. SDS-PAGE 전기영동시 정상가토 정장에서 약 23개의 단백질이 분리되었고, 그중 분자량이 약 20,000되는 단백질부분이 정관절제 수술한 정장에서 나타나지 않았다. 2. 정상가토 정장을 HPLC를 이용한 분석에서 3개의 peaks을 볼 수 있었고, 정관절제수술한 것에서는 peak 1에 해당하는 단백질이 소실되었다. 3. 한천확산시험에서 정상정장은 이종혈청과는 4개의 침강선을 나타냈고, 전기영동에서는 7개의 침강선을 나타냈다. 4. 이종면역에서 정자 및 정장은 항체가 상승이 용이하였지만, 동종면역시는 추가면역이 필요하였으며 개체간의 역가차이를 보였다. 정자면역한 자성가토에서는 수동적혈구응집반응을 나타냈지만, 한천확산 및 전기영동반응은 보이지 않았고, 같은 처치를 받은 웅성가토에서도 역시 같은 반응양상을 나타냈다. 5. 동종 및 이종항혈청을 이용한 교차전기영동방법으로 정장의 항원적 구성요소를 구별할 수 있었다. 사출된 정액에서 분리된 정장은 일부 항원을 포함하고 있었으며 이는 성숙한 정자에서 기인한 것으로 사료되었다.