• 생명과학회지
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• 제18권3호
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• pp.350-356
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• 2008

가지 열매로부터 neutral saline에 의한 추출, $(NH_4)_2SO_4$ 침전 및 Sephadex-G100을 이용한 affinity chromatography에 의해 분리한 lectin의 생화학적 특성을 연구하였다. Trypsin을 처리하지 않은 사람, 쥐와 토끼의 적혈구에서는 혈구 응집반응이 일어나지 않았으며, Trypsin을 처리한 사람, 쥐와 토끼의 적혈구 중에서는 쥐의 적혈구에서만 혈구 응집반응이 일어났다. SDS-PAGE에 의해 가지 lectin의 분자량을 확인한 결과, 19.3 kDa의 단일 band 임이 확인되었다. D-glucose를 포함하는 7개의 탄수화물은 100 mM 이하의 농도에서 lectin과 적혈구의 응집을 저해시키지 않았으므로, 탄수화물에 대한 특이성이 나타나지 않았다. 최적 반응온도 범위는 $10-20^{\circ}C$로서, $20-70^{\circ}C$에서 열에 대해 안정하였으며, 안정된 pH 범위는 pH 6.2-7.2로 확인되었다. $Ca^{2+},\;Co^{2+},\;Cu^{2+},\;Fe^{2+},\;Mg^{2+}$ 및 $Mn^{2+}$ 20 mM 이하의 농도에서는 lectin과 적혈구의 응집을 저해시키지 않았으므로, 금속이온에 대한 특이성이 나타나지 않았다

• 대한수의학회지
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• 제12권1호
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• pp.77-84
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• 1972

이 실험(實驗)은 뇌염(腦炎)바이러스(MVE virus)들 acetone, Tween-ether 그리고 Tween-ether-protamine-sulphate 로 처리한 후 그 바이러스가 지니고 있는 적혈구응집력가(赤血球凝集力價), 보체결합력가(補體結合力價) 그리고 감염력가(感染力價)의 변화 여부를 관찰함과 아울러 초원심분리법(超遠心分離法)에 의하여 이 바이러스가 지니고 있는 위의 세 가지 활성물질(活性物質)의 분획(分劃) 가능성(可能性)을 검토한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) Acetone, Tween-ether 그리고 Tween-ether protamine-sulphate 처리에 의하여 MVE virus가 지니는 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 8~16 배(倍)로 증가 하였다. 2) Acetone 및 Tween-ether 처리로 보체결합력가(補體結合力價)는 4 배(倍)로 증가 되었으나 Tween-ether protamine-sulphate 처리로는 저하되는 경향이 있었다. 3) Tween-ether로 처리하면 감염력가(感染力價)는 완전히 상실 되나 acetone으로 처리하면 $TCID50/log_{10}$ 3이 감퇴 되었다. 4) 위의 화학제의 처리와 관계없이 바이러스의 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 $37^{\circ}C$ 에서 10 분간 가열(加熱)됨으로써 완전 소실 되었으나 보체결합력가(補體結合力價)는 상승 하였으며 이 활성도(活性度)는 $65^{\circ}C$ 에서 20 분간 까지도 계속 유지되었다. 5) 처리되지 않은 바이러스와 acetone 처리된 바이러스의 보체결합력가(補體結合力價)나 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 Tween-ether 나 Tween-ether-protamine-sulphate 로 처리한 바이러스의 그것보다 열(熱)에 대해서 더 안정(安定)하였다. 6) 적혈구응집억제반응용(赤血球凝集抑制反應用) 항원제조(抗原製造)에 있어서 Tween-ether 로 처리하거나 acetone 으로 처리하여 만든 두가지 항원(抗原)은 모두 동일(同一)한 역가(力價)를 보였다. 7) 10~60%의 sucrose gradient centrifugation 에서 처리되지 않은 바이러스는 두개의 보체결합(補體結合)피크가 저농도(低濃渡)와 고농도(高濃渡)에서 각각 나타났으며 저농도(低濃渡)에서 얻은 재료는 적혈구응집력(赤血球凝集力)과 감염력(感染力)을 동반하고 있었다. 8) Acetone 으로 처리된 바이러스의 초원심분리(超遠心分離)에서는 위에 말한 두 보체결합(補體結合)피크 중 고농도부(高濃渡部)의 것은 감소 되었으나 다른 하나는 영향을 받지 않았다. 그리고 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)가 증가된 반면 감염최고력가(感染最高力價)는 감퇴 되었으며 이 세 가지 활성(活性)은 acetone 처리 후에는 명확히 분획(分劃)되지 않았다. Tween-ether 로 처리된 바이러스는 초원심분리(超遠心分離)에 의하여 고농도부(高濃渡部)에 있는 보체결합(補體結合)피크는 완전 소실된 반면 저농도부(低濃渡部)에 있는 보체결합최고력가(補體結合最高力價)는 영향을 받지 아니 하였으며 이 피크는 감염력(感染力)을 동반하지 않는 적혈구응집소(赤血球凝集素)와 분획(分劃)이 가능 하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제24권4호
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• pp.587-593
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• 1995

택사로부터 황산암모늄 분별 침전, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, Sephadex G-150 chromatography 등의 방법을 이용하여 렉틴을 분리, 정제하였다. 정제한 렉틴의 분자량은 gel filtration법에 의해 측정한 결과 90,500 dalton이었으며, SDS polyacrylamide gel 전기영동을 실시한 결과 subunit 분자량은 각각 42,000, 27,000, 22,500 dalton으로 나타나므로 택사 렉틴이 heterotrimer임을 알았다. 정제된 택사 렉틴은 사람 적혈구의 경우 모든 혈액형에 대하여 응집현상을 나타내었으며 돼지, 쥐 및 개 등의 적혈구에 대해서도 모두 응집현상이 나타나 혈구 비특이성임을 보여주었다. 또한 이 렉틴은 sialic acid, glucose, ribose, sucrose, lactose, galactose 등 당에 의해서, 그리고 $Hg^{2+},\;Fe^{2+},\;Cu^{2+}$ 이온 등에 의해 적혈구 응집력이 저해되었다.

• 한국작물학회지
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• 제34권2호
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• pp.120-126
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• 1989

본 실험은 대두(Glycine max L.) 방사품종의 종자단백질에서 렉틴을 분리하여 그 특성을 조사하기 위하여 수행되었다. 렉틴의 분리방법은 (NH$_4$)$_2$SO$_4$의 50~80% 포화침전단백질을 Carboxymethyl cellulose column과 Sephadex G 100 column을 거쳐서 분리, 정제되었다. 순도의 검정은 2~30% polyacrylamide porosity gradient gel을 사용한 전기영동법으로 단일 band를 확인하였고 또한 분자량은 11% sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel에 의하여 134,000 dalton임을 추정하였으며 45,000 dalton의 3개의 subunits로 구성되어 있음을 알았다. Schiff reagent에 의하여 분홍색 반응을 일으켰으므로 이것은 당단백질임을 알 수 있었다. 본 당단백질은 토끼와 사람의 적혈구 모두에서 적혈구응집 반응이 일어났으며 사람의 혈액형중에서 적형구응집 정도는 A>B>O>AB형의 순서로 응집이 잘 일어났다. 당류에 의한 적혈구응집저해는 N -acetyl-D-galactoseamine 과 D-galactose에 의하여 일어났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제42권4호
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• pp.304-309
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• 1999

식용버섯인 팽이버섯(Flammulina velutipes)으로부터 적혈구 응집능력을 갖는 렉틴(flammulina velutipes lectin, FVL) FVL-1과 FVL-2을 정제하였다. FVL-1과 FVL-2의 분자량은 각각 10.6 kDa과 37 kDa으로 추정되었다. FVL-2는 사람적혈구의 경우 모든 혈액형에서 응집현상을 나타내었으나, FVL-1은 O형의 적혈구에 대하여 높은 상대활성도를 나타내었다. 렉틴의 hemagglutination inhibition test 결과 FVL-1과 FVL-2는 fetuin, bovine submaxillary mucin, asialofetuin, porcine stomach mucin에 의해 적혈구 응집력이 저해되었다. FVL-1은 1.56 mM $Cu^{2+}$에서 적혈구 응집력이 저해되었으며, $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Ca^{2+}$, $Fe^{2+}$ 등에서도 저해되었다. 반면 FVL-2는 금속 이온에 대한 저해가 나타나지 않았다. pH 안정성에 있어서 FVL-1은 pH $5{\sim}11$에서 안정하였으며, FVL-2는 pH 4까지의 범위에서 안정하였다. 온도 안정성에 있어서는 FVL-1과 FVL-2 각각 $55^{\circ}C$, $45^{\circ}C$까지 안정하였다. FVL-1은 단백질이었으며 FVL-2는 당 단백질이었다.

• 대한기계학회:학술대회논문집
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• 대한기계학회 2004년도 추계학술대회
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• pp.1510-1515
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• 2004

Aggregability of red blood cells (RBCs) was determined by a laser backscattering light analysis in a microfluidic channel. Available techniques for RBC aggregation often adopt a rotational Couette-flow using bob-and-cup system for disaggregating RBCs, which causes the system to be complex and expensive. A disposable microfluidic channel and vibration generating mechanism were used in the proposed new detection system for RBC aggregation. Prior to measurement, RBC aggregates in a blood sample were completely disaggregated by applying vibration-induced shear. With the present apparatus, the aggregation indexes of RBCs can be easily measured with small quantities of blood sample. The measurements with the present aggregometer were compared with those of LORCA and showed a strong correlation between them. The aggregability of the defibrinogenated blood RBCs is markedly lower than that of the normal RBCs. The noble feature of this design is the vibration-induced disaggregation mechanism, which enables to incorporate disposable element that holds the blood sample.

• 한국음향학회:학술대회논문집
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• 한국음향학회 2004년도 추계학술발표대회논문집 제23권 2호
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• pp.179-182
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• 2004

혈관의 협착으로 인만 혈류의 교란과 그로 인한 초음파 반향의 영향을 튜브에 편심 협착 (eccentric stenosis)을 부착하고 돼지 혈액을 이용해 실험실에서 연구했다. 상용화된 GE LOGIQ 700 Expert 시스템과 M12L 의 선형 트랜스듀서를 이용해 B-모드 영상을 얻은 후 편심 협착 상류 지점과 하류 지점의 초음파 영상을 비교하여 분석하였다. 분당 20 회와 40 회의 박동율과 혈류속도를 바꿔가며 혈류의 교란에 따른 혈액에서의 초음파 영상을 분석한 결과, 편심 협착으로 인한 혈류의 교란으로 적혈구 응집현상이 달라져 복잡한 초음파 반향 분포가 형성되었다. 비침습적 실시간 초음파 영상은 편심 협착으로 인한 혈류의 교란과 그로 인한 혈액의 적혈구 응집 현상을 이해하고 연구하는데 도움이 된다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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• pp.320-320
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• 1994

Carboxyethylgermanium sesquioxide(Ge-132)를 투여용량(300,600, 900mg/kg)과 투여일을 변화시켜 정상마우스와 cyclophosphamide(CY)로 처리한 마우스에 경구투여한 후, Ge-132가 CY 에 의해 변화된 마우스의 면역기능에 미치는 효과를 실험하였다. SRBC 항원 주사전, 동시 또는 후에 Ge-132를 투여시 SRBC에 대한 적혈구 응집소가와 비장세포의 용혈반 형성세포(PFC)수가 항원 주사일과 관계없이 용량의존적으로 증가되어 체액성 면역반응을 강화시켰으며, 마크로파지의 탐식능도 항진시켰다. 그러나 DNFB에 대한 접촉성 지연형 과민반응은 DNFB 감작일과 투여용량에 관계없이 Ge-132투여로 억제되었다. CY를 투여한 마우스에 Ge-132를 병용 투여한 군이 CY 단독 투여군에 비하여 적혈구 응집소가와 PFC수 및 혈중 탄소입자의 제거율이 현저하게 증가되어, CY로 억제된 체액성 면역반응과 마크로파지의 탐식능이 항진된 것으로 나타났다. DNFB 감작 전 CY 투여로 증폭된 접촉성 지연형 과민반응이 Ge-132 병용투여로 감소되어 CY로 유도된 면역독성 반응에 대한 Ge-132의 저지효과를 시사해 주었다.

• 순환기질환의공학회:학술대회논문집
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• 순환기질환의공학회 2006년도 제6회 학술대회
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• pp.21-23
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• 2006

• 한국식품과학회지
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• 제21권5호
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• pp.606-612
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• 1989

한국산 바지락으로부터 새로운 렉틴을 아세톤파우더, 황산암모늄 침전, 친화력 크로마토그라피 및 FPLC의 이온교환 크로마토그라피법으로 분리 정제하였다. 이 렉틴은 사람의 적혈구를 비특이적으로 응집시켰으며, 생쥐와 토끼의 적혈구 및 생쥐의 복수 Sarcoma 180 세포를 응집시키지 않았고 사람의 말초혈관 임파구도 분열 촉진시키지 못하였다. 전기영동상에서 하나의 주된 띠로 나타났으며 분자량은 Biogel P-300겔 여과에서 131,000, SDS 전기영동상에서는 125,000으로 나타났다. Subunit는 33,000과 30,000의 다른 폴리펩타이드로 tetramer로 추정된다. EDTA에 의해서 활성이 저해된 바지락 렉틴은 $Ca^{++}$과 $Mn^{++}$에 의하여 적혈구 응집력이 회복되었다. 또한 이 렉틴은 약 4.2% 중성당을 함유한 당단백질임이 확인되었다.