연구배경: Interleukin-12 (IL-12) 는 자연살해세포와 T 림프구 활성을 증가시킬 뿐 아니라 증식을 촉진시키고 mterferon-$\gamma$와 granulocyte-macrophage colony stimulating factor 그리고 tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$)의 생성을 유도한다고 알려져 있으며 여러 동물실험에서 악성종양의 치료에 상당한 효과가 있음이 알려져 있다. 이런 결과는 종양내 염증세포의 침윤이 증가함과 밀접한 관련이 있다고 밝혀져 있지만 이들 염증세포가 종양내로 이동하는 단계에 IL-12가 미치는 영향에 대해서는 잘 알려진 바가 없다. 본 연구에서는 IL-12가 종양의 성장 및 전이에 미치는 영향과 활성화된 내피세포에 발현되는 것으로 알려진 E-selectin의 발현에 미치는 영향을 관찰하고자 하였고 또한 E-selectin의 발현이 IL-12에 의해 생산이 증가되고 여러 유착분자의 발현을 유도하는 작용이 있는 것으로 알려진 TNF-$\alpha$와 연관이 있는지 알아보고자 하였다. 방법: C57BL/6 마우스를 대상으로 Lewis 폐암세포주를 피하주사하여 암세포를 이식한 후 각 군마다 각각 IL-12 또는 TNF-$\alpha$ 생리식염수를 복강내 투여하였다. 암세포이식 28일째 마우스를 도살하여 폐전이 결절의 수를 측정하였으며 피하종양에 대해 CD4, CD8, CD16, E-selectin에 대한 면역화학조직염색을 시행 하였다. 결과: IL-12를 투여한 군에서 대조군에 비해 암세포 이식부위의 종양 크기가 감소하였으며 폐전이 결절의 수도 감소하였다. IL-12를 투여한 군에서 대조군에 비해 CD4+ 및 CD8+ 그리고 CD16+ 세포의 종양내 침윤이 증가하였다. IL-12를 투여하지 않은 대조군에서 E-selectin은 발현되지 않았으나 IL-12 투여군에서 종양내 혈관내피세포에서의 E-selectin 발현이 증가되었다. TNF-$\alpha$ 투여시 종양내 혈관내피세포에서의 E-selectin 발현 증가가 관찰되었으며 또한 종양내 CD4+ 및 CD8+ 그리고 CD16+ 세포의 침윤이 증가되었다. 결론: 이상의 결과로 보아 IL-12는 Lewis 폐암모델에서 종양내 염증세포의 침윤을 일으켜 종양의 성장과 전이를 억제하는 작용을 나타내며 염증세포의 침윤에는 E-selectin이 관여할 것으로 생각된다. 또한 E-selectin의 발현증가에는 IL-12 에 의해 생성이 유도되는 TNF-$\alpha$가 작용할 가능성을 추정할 수 있겠다.
Moxibustion is one of major healing technique in oriental medicine. It has been widely used in many diseases such as rheumatoid arthritis, Hashimoto disease, breech presentation, etc. However, till now, effects of moxibustion on NK cell activity and relations between sympathetic nerve system(SNS) and the immune alteration induced by moxibustion were not well studied. This study was designed to evaluate effects of moxibustion on NK cell activity and the intervention of SNS in the alteration of NK cell activity induced by moxibustion. Splenic NK cytotoxity was measured in a standard 4-h 51Cr release assay. We measured the NK cytotoxity at after moxibustion stimulation for 1,3,5, and 7 days, and also measured the NK cell cytotoxity after 3 and 7 days burn stimulation with similar temperature. IL-2, IL-4, INF-γ in serum were measured by rat IL-2, IL-4, INF-γ ELISA TEST KIT. To evaluate the effects of sympathectomy on alteration of NK cell cytotoxity, 6-hydroxydopamine(6-OHDA : 5Omg/kg) was used. We showed that NK cell activity of moxibustion stimulation group increased at the 3rd day, and declined at 7th day in comparison with that of contol group. In moxibustion stimulation group, NK cell activity of 3 day stimulation group was significantly higher than sham group. On the contrary, in burn stimulation group, NK cell activity was significantly higher than that of sham groups at 3rd, 7th days. Patterns between moxibustion and burns were different. INF- γ level of 3 days moxibustion stimulation group significantly higher than sham group. IL 2 level among groups were not different. IL-4 was not detected in serum with this method. Sympathectomy abolished the NK cell activity alteration induced by moxibustion. The results suggest that moxibustion induces the alteration of NK cell activity, along with INF-γ and SNS is related to these effects.
The anti-metastatic activity of water extract of Samguikoeuitang (WSGKE) consisting of Ginseng Radix, Angelicae Radix, Sophora flavescens and Coicis Semenwas examined. Ethanol extract of Samguikoeuitang (ESGKE) showed significant cytotoxicity against colon 26-M3.1 carcinoma cells, while WSGEK did not. However, WSGKE significantly increased the production of IL-6 and IL-12 in thioglycollate-induced macrophages from Balb/c mice, whereas ESGKE did not. WSGKE significantly increased natural killer (NK) cell cytotoxicity against effecter YAC-1 cells in an Effecter cells/Target ratio dependent manner. Also, WSGKE significantly suppressed lung metastasis after i.v. injection of colon26-M3.1 carcinoma cells. Inhibitory effect of WSGKE on lung metastasis totally abolished in NK cells-deficient mice by treatment with anti-asialo GM1 serum. In addition, the combination treatment of cisplatin and WSGKE (100 ${\mu}g$/mouse) prolonged the lifespan of mice inoculated by colon26-M3.1 cell. These findings suggest that WSGKE can inhibit lung metastasis and prolong life span via immunological enhancement as a Biological Response Modifier.
A line of study reported that electroacupuncture(EA) modulate natural killer cell(NK Cell) activities. One report suggested that EA enhanced splenic interferon-gamma($IFN-{\gamma}$), interleukin-2(IL-2), and NK cell activity in Sprague-Dawley rats. Another study suggested that $IFN-{\gamma}$ mediates the up-regulation of NK cell activity, and endogenous ${\beta}$-endorphin secretion also play a role in the up-regulation of NK cell activity induced by EA stimulation. In order to better understand the molecular regulation underlying the activation of NK cell induced by EA, we have utilized cDNA microarray to elucidate how EA alters program of gene expression of spleen in rats. First, we divided three groups, group I was EA group treated with EA in restriction holder, group II was sham group with only holder stress, and last group III was control group with no treatment. We measured NK cell activity after EA stimulation three times for 2 days using $^{51}Cr$ release assay. Second, Biotin-labeled cDNA probes synthesized from EA group and sham group, were competitively hybridized to the microarray that contained variable genes. Such high-throughput screening has identified a number of EA-responsive gene candidates. Of these, we found that EA induced a subset of genes of genes that functionally could modulatory effects on NK cell activity. Genes(vascular cell adhesion molecule-1, protein-tyrosine kinase, CD94 mRNA) related to boost NK cell activity, were increased by EA And, genes(protein-tyrosine-phospatase mRNA, protein-tyrosine phosphatase(SHP-1) mRNA) related to inhibit NK cell activity, were decreased by EA. These EA-responsive genes may provide key insights from which to understand mechanisms of activation of NK cell induced by EA.
본 연구에서는 지난 30여년간 빠르게 환경의 변화를 겪은 순천만 염하구 해안습지를 대상으로 인위적 환경 변화가 초래한 해안지역 퇴적환경의 변화를 분석하였다. 이를 위해 지형분류 및 권역별 지형분석, 인위적 환경변화 추적, 퇴적물 분석을 통한 퇴적과정의 변화를 분석하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 연구지역의 지형은 크게 하천의 영향이 강조하고 조류의 영향을 거의 받지 않는 권역 1, 하천의 영향이 감소하면서 조류에 의한 퇴적현상이 활발하게 일어나는 권력 2, 조류의 파랑의 영향을 받으면서 해양생태계에 근접한 권역 3으로 구분할 수 있다. 둘째, 연구지역은 지난 30여년간 해안선과 유로 변화, 댐 건설에 따른 수문환경의 변화를 겪었다. 1963년부터 1980년대까지 계속된 해안선과 유로 변화, 그리고 1991년 축조된 홍수조절용 댐 건설에 따른 수문환경의 변화를 겪었으며, 이는 연구지역의 퇴적과정을 변화시키는 중요한 역할을 하였다. 섯째, 주상시료와 표층퇴적물의 물리적 특성은 권역 1과 권영 2.3이 명확하게 구분되며, 이를 통해 댐 건설 이전과 이후의 퇴적과정 변화를 파악할 수 있었다. 그러나, 댐 건설 이후에는 조류의 영향이 권역 2로 공간적인 제한을 받고 있으며, 홍수의 조절에 따라 갯강 양안에 점토 비율이 높은 미립물질이 지속적으로 퇴적되고 있는 환경이다. 따라서 연구지역의 퇴적환경은 댐건설 이전에는 조류와 하천의 영향이 연구지역 전체에서 평형을 이루는 것이었으나, 현재는 하천의 영향이 강한 구역과 조류와 영향이 강한 권역으로 공간적 분화를 보이는 변화를 나타내고 있다. 이는 연구지역이 인위적인 환경변화를 겪음에 따라 새로운 평형 환경으로 전이되고 있는 것과 밀접한 관계가 있는 것이다. 나타내었으며(P<0.05), 실험종료시 첨가군의 비만도도 약 10.8% 더 높게 나타났다(P<0.05).다. Alcohol과 lactone은 저장 중 감소되고 ketone은 증가되었다.
그 이상 AsA가 중요하다는 것이 밝혀졌다.해 비교적 그 효과가 미흡하였다. 본 실험연국려과에서 옛부터 약재, 식품 보존제로 이용되어온 당귀는 메탄올 및 헥산 분배층에서 인채암세포 4종에 대해 항암효과가 뚜렷하였고 HepG2 세포주에서는 에탄올과 헥산 분배층에서 암예방효과의 지표로 사용되는 quinone reductase 효소활성 유도효과가 아주 좋았으므로 보다 단계적인 물질의 분리 동정이 이루어져 향후 당귀를 이용한 기능성 식품 소재로서뿐 아니라 암예방 차원의 건강 천연물로서의 개발 및 응용성이 높을 것으로 기대된다.종한 후 참지 추출물을 투여한 생쥐에서 용혈반 형성 세포수와 혈청 단백질 중 immunoglobulin의 relative %가 현저히 증가되었다. 그러나 비장의 자연 살해 세포의 활성에는 변화를주지 않았다. 이상의 결과로 보아, 참치의 석유 에델 추출물중에 in vitro에서 인체 장암세포 및 백혈병성 임파모세포의 증식 억제 및 생체내에서 면역 증강 효과를 나타내는 성분이 존재함을 알 수 있다.심으로 살펴봄으로서 아직 국내에서는 널리 알려지지 않은 본 기 술의 활용을 넓이고자 한다. within minimum time from beginning of the shutdown.및 12.36%, $101{\sim}200$일의 경우 12.78% 및 12.44%, 201일 이상의 경우 13.17% 및 11.30%로 201일 이상의 유기의 경우에만 대조구와 삭제 구간에 유의적인(p<0.05) 차이를 나타내었다
한방사료 첨가제인 어보산이 첨가농도별(0, 0.15, 0.3 및 0.6%) 넙치의 생존율 성장, 사료 계수 및 비만도에 미치는 효과를 비교한 결과, 생존율에 있어 첨가군은 대조군에 비해 7.7~15.5% 유의하게 높은값(P<0.05)을 보여 어보산이 넙치의 생존율 향상에 크게 기여함을 알 수 있었다. 체중의 성장은 실험 4중 후부터 대조군와 첨가군간에서 통계적으로 유의한 차이를 보이기 시작하였으며(P<0.05), 0.3% 첨가군이 가장 높은 성장 증가 효과를 보여 대조군에 비해 27.5%나 더 성장하였다. 실험 전 기간을 통해 어보산 첨가군들의 일일성장률은 대조군보다 6.4~13.9% 더 좋은 결과를 보였고(P<0.05), 첨가군들의 사료계수도 대조군보다 11.3~26.5% 더 낮아 사료효율이 향상됨을 보였다(P<0.05). 실험종료시 비만도는 0.3% 및 0.6% 첨가군이 대조군에 비해 각각 3.9% 및 2.9% 더 향상되어(P<0.05), 성장 및 사료계수의 결과와 마찬가지로 0.3% 첨가군에서 가장 높은 값을 보임으로써, 어보산의 넙치 MP 사료에 대한 적정첨가농도는 0.3% 판명되었다. 0.3%의 어보산 첨가사료를 48주간 장기간 공급하였을 때 넙치의 생존율, 성장, 사료효율 및 비만도에 미치는 효과를 조사한 결과, 어보산 첨가군의 생존율은 대조군에 비해 앞서의 실험 결과와 같이 유의적으로 높게 나타났으며(P<0.05), 체중의 성장은 실험 8중부터 유의한 차이가 나기 시작하여(P<0.05), 실험종료시 첨가군(평균 1,024 g)은 대조군(평균 860 g)에 비해 약 19.0%의 체중증가가 관찰되었다(P<0.05). 일일성장률과 사료 효율도 첨가군이 각각 4.8% 및 13.6% 더 향상된 결과를 나타내었으며(P<0.05), 실험종료시 첨가군의 비만도도 약 10.8% 더 높게 나타났다(P<0.05).다. Alcohol과 lactone은 저장 중 감소되고 ketone은 증가되었다.
그 이상 AsA가 중요하다는 것이 밝혀졌다.해 비교적 그 효과가 미흡하였다. 본 실험연국려과에서 옛부터 약재, 식품 보존제로 이용되어온 당귀는 메탄올 및 헥산 분배층에서 인채암세포 4종에 대해 항암효과가 뚜렷하였고 HepG2 세포주에서는 에탄올과 헥산 분배층에서 암예방효과의 지표로 사용되는 quinone reductase 효소활성 유도효과가 아주 좋았으므로 보다 단계적인 물질의 분리 동정이 이루어져 향후 당귀를 이용한 기능성 식품 소재로서뿐 아니라 암예방 차원의 건강 천연물로서의 개발 및 응용성이 높을 것으로 기대된다.종한 후 참지 추출물을 투여한 생쥐에서 용혈반 형성 세포수와 혈청 단백질 중 immunoglobulin의 relative %가 현저히 증가되었다. 그러나 비장의 자연 살해 세포의 활성에는 변화를주지 않았다. 이상의 결과로 보아, 참치의 석유 에델 추출물중에 in vitro에서 인체 장암세포 및 백혈병성 임파모세포의 증식 억제 및 생체내에서 면역 증강 효과를 나타내는 성분이 존재함을 알 수 있다.심으로 살펴봄으로서 아직 국내에서는 널리 알려지지 않은 본 기 술의 활용을 넓이고자 한다. within minimum time from beginning of the shutdown.및 12.36%, $101{\sim}200$일의 경우 12.78% 및 12.44%, 201일 이상의 경우 13.17% 및 11.30%로 201일 이상의 유기의 경우에만 대조구와 삭제 구간에 유의적인(p<0.05) 차이를 나타내었다.는 담수(淡水)에서 10%o의 해수(海水)로 이주된지 14일(日) 이후에 신장(腎臟)에서 수축된 것으로 나타났다. 30%o의 해수(海水)에 적응(適應)된 틸라피아의 평균 신사구체(腎絲球體)의 면적은 담수(淡水)
Natural Killer cells are considerd to play an important role in antitumor immune surveilance mechanism. In this study, 21 putative anticancer drugs selected from reference were assessed by evaluating the effect on rat Natural Killer cell activity (NKCA). All 21 herb drugs were extracted in boiling water, lyophilized, autoclaved, and then used for experiment. Culture supernatant of concanavalin-A (Con-A)-stimulated rat spleen cells as a source of lymphokine was also used as a control of comparison. Rat spleen cells were used as effector and NKCA was measured in 4hr $^{51}Cr-release$ assay against Yac-1 mouse lymphoma cell line. In order to determine the optimal conditions for NKCA augmentation, effector cells were treated with 3 different concentrations of each drug for 24, or 48 hrs before testing of NKCA, In optimal conditions determined from previous results, the effect of herb drugs on NKCA were assessed in 3 to 5experiments. NKCA was significantly enhanced by treatment with 4 herb drugs(Ponciri Fructus, Houttuyniae Herba, Aurantii Pericarpium, Nepetae Herba). Culture supernatant of Con-A-stimulated spleen cells also augmented the rat NKCA more significantly. The results show that 4 of the herb medicines supposed to display anticancer effect may have activity as a biological response modifier through augmentation of NKCA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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