Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2003.11a
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pp.67-68
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2003
한국 재래 닭의 유전적 특성 규명 및 기능 유전체 연구의 기초재료를 확보하고자 대량 EST 염기서열 결정 및 생물정보학 분석을 실시하였다. 대량 EST 염기서열 분석을 위한 첫 번째 단계로 재래 닭의 뇌, 비장, 정소, 배아 생식기를 이용하여 cDNA library를 구축하였다. 각각의 library로부터 총 15,121개의 클론을 선정하여 염기서열을 결정하였다. 생물정보학 분석결과 15,121개의 염기서열은 총 10,353개의 contig로 정리되었다. 이들 염기서열을 기존 데이터베이스를 대상으로 tBlastX(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST) 분석을 실시한 결과, 염기서열 중 56 %가 기존 데이터베이스에 존재하는 유전자와의 상동성을 보였다. 상동성을 보이는 유전자들은 유전자의 구조 및 기능 분석에 이용될 것이고, 상동성을 보이지 않는 유전자들은 microarray와 같은 대량 유전자 발현분석 시스템을 이용하여 선별한 후 기능분석이 실시될 것이다.
We developed 14 transgenic lines of Chinese cabbage (Brassica rapa) harboring the T-DNA border sequences and CryIAc1 transgene of the binary vector 416 using Agrobacterium tumefaciens-mediated DNA transfer. Six lines had single copy cryIAc1 gene and four of them contained no vector backbone DNA. Of the left border (LB) flanking sequences six nucleotides were deleted in transgenic lines 416-2 and 416-3, eleven nucleotides in line 416-9, and 65 nucleotides including the whole LB sequences in line 416-17, respectively. And we defined 499 bp of genomic DNA (gDNA) of transformed Chinese cabbage, and blast results showed 96% homology with Brassica oleracea sequences. PCR with specific primer for the right border (RB) franking sequence revealed 834 bp of PCR product sequence, and it was consisted of 3' end of cryIAc1, nosterminal region and 52 bp of Chinese cabbage genomic DNA near RB. RB sequences were not found and the 58 nucleotides including 21 bp of nos-terminator 3' end were deleted. Also, there were deletion of 10 bp of the known genomic sequences and insertion of 65 bp undefined genomic sequences of Chinese cabbage in the integration site. These results demonstrate that the integration of T-DNA can be accompanied by unusual deletions and insertions both in transgenic and genomic sequences.
Background : Examining the biological susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to pyrazinamide (PZA) in vitro is very difficult as PZA is inactive under normal culture conditions. The biological susceptibility test, an enzyme assay for Pzase activity, and a genetic test for pncA gene mutations, were performed in order to predict PZA resistance. Methods : 28 cultured clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis were tested. The biological susceptibility was performed by the absolute concentration method using Lowenstein-Jensen media. The PZase activity was tested by means of Wayne's method. A 710-bp region includes the entire open reading frame of pncA was amplified and sequenced. Results : All six strains with positive PZase activity exhibited no pncA mutations with one strain showing a false resistance in the biological susceptibility test. Among the 22 strains with no PZase activity, 21 exhibited showed pncA mutations. In the biological susceptibility test, 20 strains were resistant, and one was susceptible, and the other flied to test. The mutation types varied with ten missense, one silent and one nonsense mutation 1 slipped-strand mispairing, and 6 frameshift mutations. Three strains had an adenine to guanine mutation at position -11 upstream of the start codon. Conclusion : The mutation at the pncA promotor region is frequent at -11 upstream position. Automatic sequencing of pncA is a useful tool for rapid and accurate detection of PZA resistant M. tuberculosis, and for demonstrating the epidemiological relatedness of the PZA resistant M. tuberculosis strains.
Ha, Hye-Jeong;Ryou, Sang-Mi;Lee, Kang-Seok;Jeon, Che-Ok
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.39
no.1
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pp.93-96
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2011
It has been shown that a nucleotide substitution at position 770 in Escherichia coli 16S rRNA, which is implicated in forming the evolutionary conserved B2c intersubunit bridge, has a detrimental effect on ribosome function. In order to isolate second-site revertants that complement ribosomes containing C770G, we performed a random mutagenesis of the 16S rRNA gene and selected clones that could produce more CAT protein translated by specialized ribosome. One of the clones contained two nucleotide substitutions at positions 569 and 904 (C569G and U904C) and these mutations partially complemented the loss of protein-synthesis ability caused by C770G. Further studies using the isolated revertant will provide information about which part of 16S rRNA is interacting with C770 and the consequence of the structure formed by these interactions in the process of protein synthesis.
Although Energy demands of modern society increase rapidly, current energy would be exhausted shortly. Therefore development of bio-ethanol production process from cellulose containing materials was extremly demanded. Therefore development of highly functional cellulase is requisite for this purpose. In this study cellobio-hydrolase (CBH1) gene from Trichorderma reesei was used to increase cellulase activity by directed evolution and highly functional cellobio-hydrolase was obtained and characterized.
Koo, Jachoon;Chae, Mi Suk;Lee, Jeoung-Ki;Whang, Sung Soo
Korean Journal of Plant Taxonomy
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v.37
no.4
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pp.419-430
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2007
This study was conducted to know the taxonomic features of nuclear ribosomal ITS DNA sequences, ITS1, ITS3 and 5.8S regions, as to nine individuals belonging to four Oxalis species in Korea and an induced species. Sequences of the same regions of sixteen taxa deposited in GenBank were also aligned with those of Korean species as outgroups. The length of ITS sequences aligned in this study is 679 by in total. Evidences, from not only the sequence similarities and divergences but also the phylogenetic and statistical treatments with ITS sequences aligned, were useful for the taxonomy of the genus. The similarity of sequences, among both cauline and acauline taxa, is high as 89% and 95% respectively, but between cauline and acauline taxa, relatively low in the range of 64~69%. The sequence divergences, among both cauline and acauline taxa, is also high as much as 0.36~0.42, but between both cauline and both acauline taxa, low as 0.04~0.06. Two groups between cauline and acauline taxa are paraphyletic, and each group makes a single Glade with a high bootstrap value. The analysis of variance, using ITS sequence aligned, revealed that taxa are significantly different in the level of 0.5%, and O. corymbosa, an induced speices, is also separated from the Korean taxa in the Duncan analysis.
It has been reported that extracts of globe thistle (Echinops spp.) and thistle (Circium spp., Carduus spp. and Onopordum spp.) have anti-bacterial and anti-fungal activities. Methanol extracts of Echinops setifer and Carduus spp. were used to test and see if the extracts of these plants could suppress growth of Mycobacterium smegmatis and Mycobacterium fortuitum. Although extract of Echinops setifer showed no anti-mycobacterial activities, extract of Carduus spp. showed inhibition zones when tested with filter discs. Genomic DNA was isolated from Carduus spp. and PCR was performed to clone a DNA fragment containing ITS1, 5.8S rRNA gene and ITS2. A 733-bp PCR product was obtained and its DNA sequence was reported to the GenBank (accession number GU188570). BLAST search of the obtained DNA sequence did not show a match with any DNA sequences in the Genbank. Carduus crispus and Carduus defloratus had the closest phylogenetic relationships to this plant.
The analysis of Al (III) hydrolysis species with PACls prepared by different basicity showed that mononmeric Al species were reduced while precipitate Al species were increased with an increase in basicity for PACls. In the case of the PACl with 13.6% basicity, monomeric Al species were 81%, polymeric Al (III) species 19%, precipitate Al (III) species was 0%, as showing the dominant monomeric Al species. The PACl with 13.6% basicity showed above 80% of turbidity removal efficiency without any restabilization. In addition, the PACl with 13.6% basicity showed higher organic removal expressed by $UV_{254}$ which was caused by lower coagulation pH. The PACl containing the higher amount of monomeric Al species was the most beneficial for T-P and $PO_{4}-P$ removal.
Park, Chang-Seo;Jung, Kwang-Young;Kim, Jai-Joung;Cho, Seong-Jin
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.17
no.4
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pp.337-342
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1984
224 profiles representing 19 soil series were subjected to multiple regresion analysis to determine the relative contribution of organic matter(OM) and clay content to total cation exchange capacity(CEC) in sandy soil. The independent variables were OM and clay, with the dependent variable CEC. Simple correlation coefficients showed high significance at CEC-OM and CEC-clay. The partial regression coefficients indicated that CEC for each gram of OM was calculated to be 0.549 and 1.351 meq of top and subsoil. The clay contributions of top and subsoil were 0.247 and 0.226 meq, respectively. The standard partial regression coefficients appeared that clay content was 1.23 times as important as orgnic matter in predicting CEC.
To investigate the gene rearrangement via short repeated sequences in chloroplast DNA, the pattern of heterologous gene clusters containing the 151 bp repeated sequence with the development of plastid was compared in rice and the homologous gene clusters from various plant sources were searched for comparative analysis. Southern blot analysis of rice DNA using rp12 gene containing 151 bp repeated sequence as a probe showed the presence of heterologous gene clusters. Such heterologous gene clusters varied with the development of plastid. Also it was observed that the heterologous gene clusters were observed in all of the rice cultivars used in this work. Finally the comparative analysis of DNA sequence of the homologous gene clusters from various plants showed the evolutionary gene rearragngement via short repeated sequence among plants. These results suggest the possible relationship between the plastid development and gene rearrangement through short repeated sequences.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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