목적 : Acetylcholine은 콜린과 아세트산의 에스테르로 인체에서 중요한 신경전달물질로 Acetylcholine-sterase(AChE)라는 효소에 의해 분해된다. Alzheimer's disease, ataxia, myasthenia gravis, Parkinson' disease 등의 질환에 AChE 억제제가 사용되어 왔으며 최근 한약재의 AChE 억제 효능에 관한 연구들도 진행되고 있다. 봉독은 관절염, 통풍 등의 질환에 응용되어 왔으며 진통효과 및 항염증작용에 대한 임상적, 실험적 연구가 많이 보고되어 왔으나 AChE 억제효과에 대한 연구는 아직까지 보고된 바 없다, 본 연구에서는 봉독약침액과 봉독의 과민반응 유발항원 중 하나인 Phospholipase A2 억제효능이 있는 것으로 알려진 상백피를 혼합한 상백피봉독약침액의 AChE 억제효과를 알아보았다. 방법 : PC12 세포주에서 추출한 AChE와 0.1, 0.01 and $0.001mg/m{\ell}$ 농도의 봉독약침액 및 상백피봉독약침액을 60분간 반응시켰다. 효소면역측정법(ELISA)을 이용하여 흡광도를 10분, 30분, 60분 경과시 각각 측정한 후 효소활성저해도(%)를 계산하였다. 효소활성저해도(%) = [(Cc - Ce)/Cc] ${\times}$ 100 Cc : 대조군 흡광도, Ce : 실험군 흡광도 결과 : 1. 봉독약침액은 0.1, 0.01, $0.001m{\ell}/mg$의 농도에서 30분 경과 후부터 유의성 있는 억제효과를 나타내었다. 2. 상백피봉독약침액은 $0.1m{\ell}/mg$ 농도에서 10분 경과 후부터 유의성 있는 억제효과를 나타내었고, $0.01m{\ell}/mg$ 농도에서 30분경과 시 유의성 있는 억제효과를 나타내었다. 3. 봉독약침액과 상백피봉독약침액의 AChE 억제효과 비교에서 봉독약침액의 억제효과가 상백피봉독약침액 보다 뛰어났다. 요약 : 봉독약침액과 상백피봉독약침액의 AChE 억제효과를 확인하여 두 군 모두 유의성 있는 결과를 얻을 수 있었다. 앞으로 알츠하이머병이나 치매와 같은 신경퇴행성 질환에 대한 봉독의 임상적 활용 및 보다 넓은 범위에 대한 연구가 필요할 것이라 사료된다.
목적 : 본 연구는 녹용약침액의 주름 개선 효과에 대하여 여러 가지 in vitro 실험을 통해 확인해 보고자 계획되었다. 방법 : 녹용약침액의 항산화효과를 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거법을 이용하여 측정하였고, 또, elastase 억제 효과를 측정하였다. 그리고 녹용약침액이 사람 정상 섬유아세포 HS 68에서 UVB 조사 후 type I procollagen의 생산량 회복에 미치는 효과를 ELISA법을 이용하여 측정하였다. 결과 : 녹용약침액에서 우수한 DPPH 자유라디칼 소거 효과가 관찰되었다. 또한 통계적으로 유의한 elastase 활성 억제 효과를 관찰할 수 있었다. 사람 섬유아세포 HS 68을 이용한 실험에서는 녹용약침액 처치군에서 UVB 조사로 감소된 type I procollagen이 유의하게 회복되는 것이 관찰되었다. 결론 : 본 연구 결과에 의하면, 녹용약침액에는 유효한 주름개선 효과가 있어, 미용약침 소재로 개발할 수 있을 것으로 사료된다.
목적 : 홍화(紅花)는 활혈거어(活血祛瘀), 해독지통(解毒止痛)의 효능이 있어 관절염, 동맥경화(動脈硬化), 종양(腫瘍), 월경부조(月經不調), 뇌혈전(腦血栓)에 사용되어 왔다. 이에 홍화약침액(紅花藥鍼液)의 분자생물학적 효능 분석을 하고자 Lipopolysaccharide(LPS)로 염증을 유발한 RAW 264.7 cell의 유전자(遺傳子) 발현(發顯)에 미치는 영향을 Microarray를 통하여 관찰하였다. 방법 : RAW cell을 배양하고 홍화약침액(紅花藥鍼液)의 세포 독성을 확인한 후 (1) LPS, (2) 홍화약침액(紅花藥鍼液), (3) 홍화약침액(紅花藥鍼液)과 LPS를 처치했을 때의 유전자 발현양상을 microarray를 이용하여 관찰하였다. 대조군에 비해 2배 이상 발현의 차이가 있는 경우를 유의한 것으로 보았다. 결과 : 8,170개의 유전자 중 (1) LPS를 처치하였을 경우 35개의 유전자에서 발현이 상승되었고, (2) 홍화약침액(紅花藥鍼液)을 처치하였을 경우 11개의 유전자에서 발현이 상승되고 53개의 유전자에서 발현이 억제되었으며, (3) 홍화약침액(紅花藥鍼液)과 LPS를 동시에 처치하였을 경우에는 47개의 유전자에서 발현이 상승되었고 11개의 유전자에서 발현이 억제되었다. LPS 자극으로 발현이 상승되었지만 홍화약침액(紅花藥鍼液)을 처치할 때 발현이 억제되는 유전자는 SUMO1/sentrin specific protease 7(SENP7), Serine(or cysteine) proteinase inhibitor, clade B(ovalbumin), member 7(SERPINB7), M-phase phosphoprotein, mpp8(HSMPP8), Glycogenin 2(GYG2), InaD-like(Drosophila)(INADL), Copine III(CPNE3), Loss of heterozygosity, 11, chromosomal region 2, gene A(LOH11CR2A), Chromosome 9 open reading frame 33(SHC3), NADH dehydrogenase(ubiquinone) 1 beta subcomplex, 2, 8kDa(NDUFB2)로 9개가 있었다. 요약 : 홍화약침액(紅花藥鍼液)이 LPS로 염증을 유발시킨 RAW 264.7 cell의 유전자 발현에 미치는 영향을 Microarray를 통해 분석하였다. 홍화약침액(紅花藥鍼液)이 LPS로 발현을 항진시킨 35개의 유전자 중 9개를 효과적으로 억제하는 것을 확인하여 염증 치료 기전을 시사하는 유용한 자료를 얻을 수 있었으며 홍화약침액(紅花藥鍼液)이 발현을 항진시킨 유전자들을 통해 혈관생성과 종양억제 등 보다 넓은 범위에 대한 연구가 가능할 것으로 사료된다.
목적 : Elastin 섬유는 피부, 폐, 동맥, 정맥 등 조직에서 발견된다. Elastin 섬유의 손실은 대동맥, 동맥, 세동맥의 탄력 등과 연관되어 폐기종, 혈액순환 부전 및 폐동맥 고혈압을 악화시킬 수 있다. 본 연구는 당귀약침액의 elastase 효소활성에 대한 효과와 항산화 효과에 대하여 연구하고자 계획되었다. 방법 : 당귀약침액의 elastase 억제효과와 DPPH, 및 NO 소거능을 측정하여 항산화 효과를 측정하였다. 결과 : 당귀약침액에서 통계적으로 유의한 elastase 활성 억제효과를 관찰할 수 있었다. 또한 통계적으로 강한 DPPH free radical 소거 효과가 관찰되었다. 그리고 NO 소거효과를 관찰할 수 있었으며, 그 효능은 pH 6.0에서 가장 강한 효능을 보였다. 결론 : 본 연구 결과에 의하면, 당귀약침액에는 유효한 elastase 활성 억제효과와 강한 항산화 효과가 있어, 폐기종 및 폐동맥 고혈압 치료에 유효한 작용이 있을 것으로 사료된다.
오종(五種) 약침액(藥鍼液)(약침액(藥鍼液)의 명칭(名稱) : V. OK. I. HO. B)의 안전성(安全性)을 실험적(實驗的)으로 검토(檢討)하기 위하여 급성독성여부(急性毒性與否)를 연구보고(硏究報告)한 이후 발열성시험(發熱性試驗), 피부자극시험(皮膚刺戟試驗), 용혈반응(溶血反應) 및 간독성(肝毒性)과 신독성시험(腎毒性試驗)을 실시(實施)하여 유의(有意)한 결과(結果)를 얻었다. 모든 약침액(藥鍼液)은 발열성시험(發熱性試驗)과 피부자극시험(皮膚刺戟試驗), 간독성(肝毒性) 및 신독성시험상(腎毒性試驗上) 이상소견(異常所見)이 발견(發見)되지 않았으나 용혈반응(溶血反應)의 경우 일부(一部) 약침액(藥鍼液)에서 용혈반응(溶血反應)을 의심(疑心)할 수 있으므로 향후(向後) 이에 대(對)한 연구(硏究)와 세포독성(細胞毒性) 및 항원성시험(抗原性試驗)이 필요(必要) 할 것으로 사려(思慮)된다.
엘라스타제는 폐의 탄성 섬유를 파괴하여 폐기종과 폐고혈압을 유발하는 역할을 한다. 이에 본 연구는 택사(澤瀉) 약침액(藥鍼液)의 엘라스타제 억제효능과 항산화효능을 측정하여 폐기종과 폐고혈압 치료의 가능성을 확인하고자 실시 하였다. 방법 : 택사(澤瀉) 약침액(藥鍼液)의 엘라스타제에 대한 억제효능과 di(phenyl)-(2,4,6-trinitrophenyl) iminoazanium (DPPH) 및 nitric oxide (NO) 자유기 소거능을 측정하였다. 결과 : 택사(澤瀉) 약침액(藥鍼液)은 엘라스타제 활성을 통계적으로 유의하게 억제하였고, DPPH 및 NO 자유기 소거능이 있음이 통계적으로 유의하게 확인되었다. 결론 : 본 연구를 통해 택사(澤瀉) 약침액(藥鍼液)의 엘라스타제 억제효능과 항산화 효능이 확인되었다. 본 연구 결과를 근거로 시험관내 실험이외의 추가적인 연구를 통해 폐기종과 폐고혈압 치료제로서 택사(澤瀉) 약침액(藥鍼液)의 활용을 고려해 볼 수 있을 것으로 기대한다.
Taraxacunf mongofieum Hand-Mass aqua-acupuncture solution (TMAS) was prepared and investigated og, the effect on initiation of carcinogenesis. The following effe.Is as a blocking agent were measured. .(a) Indu.ction of quinone reductase, (b) Induction of glutathione S-transferase activity (c) Increase of reduced glutathione. TMAS was potent inducer of quinone reductase in Hepa Iclc7 murine hepatoma cells. Clutathione S-transferase activity was increased with TMAS. In addition glutathione levels were increased about 1.6-fold with TMAS in cultured murine hepatoma Hepa Iclc7 cells.
본 연구는 육미지황환(六味地黃丸) 약침액(藥鍼液)가 사람 피부 섬유아세포의 콜라게나제 활성 및 프로 콜라겐 합성에 미치는 영항과 티로시나제 활성에 미치는 효과를 측정하고자 실시하였다. 방법 : HS68 사람 정상 섬유아세포에 UVB 조사 후 육미지황환(六味地黃丸) 약침액(藥鍼液)가 type I procollagen 생성과 콜라게나제 효소활성에 미치는 효능과 티로시나제 효소활성에 미치는 효능을 평가하였다. 결과 : 육미지황환(六味地黃丸) 약침액(藥鍼液)은 UVB 조사된 세포의 콜라게나제 효소활성을 통계적으로 유의하게 억제하였고, 티로시나제 활성과 L-DOPA oxidation 활성 또한 통계적으로 유의하게 억제하였다. 그러나 티로시나제와 L-DOPA oxidation 억제활성의 정도는 미약하였다. 결론 : 육미지황환(六味地黃丸) 약침액(藥鍼液)의 콜라게나제 억제효능은 주름개선 약침 치료에 활용이 가능할 것으로 생각된다.
본 실험에서는 녹용 약침액의 항 골재흡수 속성을 조사하였다. PTH, $1,25(OH)_2D_3$와 IL-1을 각각 골재흡수 인자로 사용하여 생쥐의 두개골에서 osteoblast 세포를 격리, 배양, 그리고 자극시켰을 때 collagenolysis의 증가를 보였다. 두 가지를 동시에 사용한 결과, IL-1은 골재흡수성을 촉진시키고 재 흡수력을 생산하였다. In vitro에서의 세포독성 결과는 $1-200{\mu}g/ml$의 녹용 약침액 농도 분포에서 무세포독성을 보였다. 또한 녹용 약침액은 생쥐의 두개골 골아세포 내에서 PTH (2 unit/ml), IL-$1{\alpha}$ (1 ng/ml), $1,25(OH)_2D_3$ (10 ng/ml), IL-$1{\alpha}$ 및 IL-$1{\beta}$로 인해 유발된 collagenolysis에 대해서 대항하는 보호활동성을 나타내었다. 녹용약침액은 IL-$1{\alpha}$ 와 IL-$1{\beta}$로 인해 유발된 collagenolysis에 대항하는 보호활동성을 지녔다. DAS는 IL-$1{\alpha}$와 IL-$1{\beta}$로 인해 촉진된 골재 흡수력을 억제하는 효과를 보였다. 이와 같은 결과는 녹용약침액이 골다공증과 연관된 질환에 대해서 매우 안정적인 임상적 사용이 가능한 것을 관찰할 수 있으므로 추후 이와 관련한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료되었다.
목적 : 본 연구는 최근 임상에서 많이 사용하는 자하차(紫河車) 약침액(藥鍼液)이 과산화수소($H_2O_2$)로 야기된 송과선 세포의 apoptosis에 있어서 세포 보호에 미치는 영향과 그 기전을 분석하였다. 방법 및 결과 : MTT assay를 이용하여 분석한 결과 처리 시간 및 농도에 따른 세포 독성의 효과가 $H_2O_2$ 투여로부터 관찰되었다. 또한 자하거 약침액은 세포 증식 효과를 나타내었고 자하거 약침액을 전처치하고 $H_2O_2$를 처치하였을 때 세포 독성이 크게 감소되었다. DAPI staining에서 자하거 약침액 투여군은 $H_2O_2$ 투여군에 비해 fragmentation이 억제되었다. TUNEL assay를 통하여 자하거 약침액 투여군은 $H_2O_2$ 투여군에 비하여 TUNEL 양성세포의 발현이 감소되었다. Flow cytometry를 통하여 자하거 약침액 투여군은 $H_2O_2$ 투여군에 비하여 세포주기 중 sub G1 분획의 증가가 억제되었다. 결론 : 이상의 결과를 통하여 자하거 약침액이 $H_2O_2$로 유발된 apoptosis에서 세포보호 효과가 있음이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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