Based on their virulence, the avian influenza viruses (AIVs) are classified into two pathotypes: low pathogenic avian influenza (LPAI) virus and highly pathogenic avian influenza (HPAI) virus. Among the 16 HA subtypes of AIV, only the H5 and H7 subtypes are classified as HPAI. Some AIVs, including H5 and H7 viruses, can infect humans directly. Six H7 subtype isolates from wild birds of the H7N7 (n=4) and H7N1 (n=2) subtypes were characterized in this study. Phylogenetic analysis showed that eight viral genes (HA, NA, PB2, PB1, PA, NP, M, and NS) of the H7 isolates clustered in the Eurasian lineage, the genetic diversity of which is indicated by its division into several sublineages. The Korean H7 isolates had two motifs, PEIPKGR and PELPKGR, at the HA cleavage site, which have been associated with LPAI viruses. Six H7 isolates encoded glutamine (Q) and glycine (G) at positions 226 (H3 numbering) and 228 of HA, suggesting avian-type receptor-binding specificity. None of the Korean H7 isolates had the amino acid substitutions E627K in PB2 and I368V in PB1, which are critical for efficient replication in human cells. The Korean H7 isolates showed no deletions in the NA stalk region and in NS. These results suggest that the Korean H7 isolates from wild birds are different from the H7N9 influenza viruses isolated in China in 2013, which are capable of infecting humans.
Swine influenza virus (SIV) causes one of the most common diseases of the pig population, and its subtypes are determined by hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA). Recently, the SIV subtype diagnosis has been developed. The method using antigen-antibody reaction rather than PCR was mainly used because of the large change in the ribonucleotide sequences of SIV. Here, we have developed 10 diagnostic primer sets through multi-nucleotide sequences alignment of spreaded SIV since 2008 in Korea and then optimized the reaction of the one-step RT-PCR for rapid determination of SIV subtype. In addition, specific primers were designed to early determine the pandemic SIV by detecting unique M sequences proven in highly infectious and virulent subtypes of the influenza H1N1 (pH1N1). Here, some of the SIVs spread in Korea from 2008 to 2014 have been tested to determine the subtypes and pandemic potential of SIV. All diagnostic primer sets were found to be able to accurately determine the SIV subtype and to detect the pandemic SIV. In conclusion, it was confirmed that the optimized one-step RT-PCR analysis using these primer sets is useful for rapid diagnosis of SIV subtypes. These results can be used for development of SIV subtype diagnostic kit to early detect before virulent SIV spreads do.
Kim, Eul-Hwan;Lee, Dong-Woo;Han, Sang-Hoon;Kwon, Soon-Hwan;Yoon, Byoung-Su
Korean Journal of Microbiology
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v.43
no.1
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pp.23-30
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2007
The most rapid Real-time PCR based detection method for Avian influenza A virus (AIV) subtype H5N1 was developed. The target DNA sequence in this study was deduced from H5N1 subtype-specific 387 bp partial gene of hemagglutinin, and was synthesized by using PCR-based gene synthesis on the ground of safety. Real-Time PCR was performed by $GenSpector^{TM}$ using microchip-based, total $1{\mu}l$ of reaction mixture with extremely short time in each steps in PCR. The detection including PCR-amplication and analysis of melting temperature was totally completed within 13 min. The H5N1-specific 189 bp PCR product was correctly amplified until 2.4 molecules of hemagglutinin gene as minimum of templates. This kind of PCR was designated as Quick Real-Time PCR in this study and it could be applied to detect not only AIV H5N1, but also other pathogens using PCR-based detection.
Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2014.11a
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pp.57-58
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2014
인플루엔자 A 바이러스의 아형인 H5N1은 고병원성으로 조류 독감을 일으킨다. H5N1 바이러스는 원래 조류끼리만 감염되는 독감이고, 사람에게는 전염되지 않는다고 알려져 있었으나, 2003년에 베트남과 중국을 시작으로 현재까지 168명의 사망자가 기록되고 있다. 그러나 현재 시판되고 있는 진단키트(Rapid diagnostic kits)들은 H5N1 에 특이적인 것이 아니라 influenza A virus 모두를 진단한다. 따라서 influenza 감염여부는 확인 할 수 있지만, 이것이 H5N1 인지는 확인 할 수가 없다. H5N1은 전염성이 강하기 때문에 빠르게 진단하여 감염조류를 살 처분 하여야 더 많은 경제적 손실을 줄일 수 있다. 따라서 H5N1 에만 특이적인 epitope를 네트워크 기반으로 예측하여 진단제에 응용할 수 있도록 하고자 한다. 각 서열 정보는 Openflu (http://openflu. vital-it.ch/browse.php)에서 얻었다. H5N1은 H1N1에서 유래되었기 때문에 두 subtype의 차이점을 알아보고자 TCOFFEE에서 multiple sequence alignment를 수행한 결과 N-terminal 부분이 상이하였다. 상이한 H5N1의 N-terminal 부분이 H5N1 virus에 감염된 모든 host에서 존재하는지 알아보기 위해 host가 사람인 경우와 조류인 경우를 TCOFFEE에서 alignment 하였다. 그 결과 H5N1의 N-terminal 부분은 사람과 조류에서 보존적이었다. 따라서 H5N1의 N-terminal이 다른 subtype과 유사하지 않고 H5에만 특이적이기 때문에 진단키트 제작을 위한 epitope로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.
Purpose: This study was to identify the current status of vaccination against the pandemic (H1N1) 2009 virus among university students from the fields of nursing and allied health from a local community and verify factors influencing vaccination. Methods: The study included 227 students in the fields of nursing and allied health from a provincial university. Data were obtained from these participants between May 31 and June 11, 2010 by using self-report questionnaires. Results: The rate of vaccination against the pandemic (H1N1) 2009 virus for these participants was 14.5%. No difference was observed in this regard between majors and school year. Factors that influence vaccination against this virus included previous vaccination against seasonal influenza and participants’ attitudes toward general vaccination. Conclusion: The results suggest that for effective pandemic (H1N1) 2009 vaccination of university students from the fields of nursing and allied health, students who have not been vaccinated should be intensively managed. Developing a vaccination program that encourages a positive attitude toward vaccination is recommended.
Jin, Hyuk Hee;Kwon, Young Joon;Jeong, Hee Yeon;Han, Sun Ho
Korean Journal of Biological Psychiatry
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v.3
no.1
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pp.121-126
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1996
Objects : There is considerable interest in the role of serotonin(5-HT) in the pathophysiology of schizophrenia. Cimetidine, $H_2$ antagonist, produces transient increase in serum prolactin(PRL) levels by indirect serotonergic mechanism in man following intravenous administration. Therefore the authors investigated the effects of cimetidine on serum PRL levels of male unmedicated schizophrenics. Method : Baseline serum prolactin level and psychopathology were measured at 9:00 AM. in the two groups(12 positive schizophrenics, 7 negative schizophrenics) and $T_{30}$ levels were measured 30 minutes after intravenous injection of cimetidine (ie, 9:30 AM) Results: 1) Baseline prolactin levels were not different in the three groups. 2) Prolactin levels of 30 minutes after intravenous injection of cimetidine($T_{30}$) compared with baseline prolactin levels were increased all in the three groups. 3) Degrees of interval change from baseline to $T_{30}$ were significantly different between normal control and negative schizophrenics(p<0.05). Conclusion : The prolactin response to cimetidine was significantly blunted in negative male schizophrenics than normal control. These data are consistent with the hypothesis of an abnormality of serotonergic activity, including down-regulation $5-HT_2$ receptors, in male negative schizophrenics.
This ultra real-time PCR (UPCR) based diagnosis system for avian influenza A virus (AIV) subtype was designed. The target primer in this study was derived from H5N1 subtype-specific 133 bp partial gene of hemagglutinin (HA), and was synthesized by using PCR-based gene synthesis on the ground of safety. UPCR was operated by Mini-Opticon Q-PCR Quantitative Thermal Cycler using aptamer-based molecular beacon, total 10 ${\mu}l$ of reaction mixture with extraordinarily short time in each steps in PCR. The detection including UPCR and analysis of melting temperature was totally operated within 15 min. The AIV-specific 133 bp PCR product was correctly amplified until 5 molecules of HA gene as minimum of templates. This kind of PCR was drafted as UPCR in this study and it could be used to detect not only AIV subtype, but also other pathogens using UPCR-based diagnosis.
Dibenamine inhibited [$^{3}$H]quinuclidinyl benzilate ([$^{3}$H]QNB) binding in both concentration and incubation time-dependent manners. The $IC_{50}$/ value of dibenamine for the inhibition of the specific binding of 100 pM [$^{3}$'H]QNB following incubation of cerebral microsomes with dibenamine at 37.deg. C for 15 min was 20.mu.M. Dibenamine irreversibly decreased the binding site concentration for [$^{3}$H]QNB binding without affecting the affinity of [$^{3}$H]QNB for the muscarinic receptor. Analysis of the pirenzepine inhibition curve of [$^{3}$H]QNB binding to cerebral microsomes indicated the presence of two receptor subtypes with high(M$_{1}$ receptor, Ki=5nM) and low (M$_{2}$ receptor, Ki=160nM) affinity for pirenzepine. However, dibenamine(20.mu.M) treatment under the condition employed in these experiments caused steepening of the pirenzepine competition curve. The Ki value for pirenzepine in dibenamine treated-microsomes was approximately 120nM. suggesting a selective decrease in the number of M$_{1}$ receptor. Although dibenamine also inhibited [$^{3}$H]QNB binding to ventricular microsomes with $IC_{50}$/ value of 120.mu.M, the sensitivity for dibenamine in the ventricle was much lower than that in the cerebrum. These results indicate that dibenamine at low concentrations welectively inactivates the muscarinic M$_{1}$ receptor.
Influenza is an important public health problem which occurs almost every winter in temperate climates and is often associated with increased rates of hospitalization and death. In 1999, our influenza surveillance was initiated with 4 voluntary sentinel physicians and the Public Health Center. During the 2003-2004 influenza season, 124 influenza viruses were isolated from 401 clinical specimens, which were collected from patients with Influenza-like illness(ILI) in Seoul. The case definition of ILI is a case with fever more than $38^{\circ}C$ and systemic symptoms; cough, or sore throat. ILI was the highest at the 20-49 age $group(23\%)$ and the rate of virus isolation was the highest at the 7-19 age $group(50\%)$. Among 124 influenza viruses, isolates 83 were identified as A/H3N2 type and others were subtyped as influenza B viruses in 2003-2004 season. Influenza viruses were collected $39.1\%$ at Nowon-Gu, $13.5\%$ Gangnam-Gu and Seocho-Gu etc. and the isolate rate of virus had the area difference; Yongsan-Gu $66.7\%$, Gangnam-gu $50.0\%$, Nowon-Gu $39.9\%$, Kangbuk-Gu $36.8\%$, Seocho-Gu $27.8\%$, Dongjak-Gu $21.2\%$. Out of 401 individuals, 160 was vaccinated $(40\%)$ and the vaccination rate was the highest at the 20-49 age $group(32\%)$. These findings may contribute to the recommondation of the influenza vaccine formulation and the development of influenza control measure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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