Ee-Hwa, Kim;Youn-Hee, Kim;Youn-Jung, Kim;Mi-Hyun, Jang;Joo-Ho, Chung;Chang-Ju, Kim
대한한의학회지
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제22권1호
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pp.90-95
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2001
목적:인진 약침액이 SK-N-MC 신경아세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스에 미치는 영향을 조사하였다. 방법 : SK-N-MC cell line에서의 아폽토시스 변화를 관찰하기 위해서 MTT assay, DAPI staining 및 flow cytometric analysis 방법을 이용하였다. 결과: MTT assay를 이용하여 분석한 결과 농도에 따른 세포 독성의 효과가 에탄올 투여로부터 관찰되었다. 또한 인진 약침액으로 전처치하고 에탄올을 처치하였을 때 세포 독성이 크게 감소되었다. DAPI staining에서 인진 약침액 투여군은 에탄올 투여군에 비해서 fragmentation이 억제되었다. Flow cytometry를 통하여 인진 약침액 투여군은 에탄올 투여군에 비하여 세포주기 중 sub $G_1$ 분획의 증가가 억제되었다. 결론 : SK-N-MC 신경아세포주에서 에탄올에 의해서 유발된 아폽토시스는 전형적인 세포사별 형태를 나타내었다. 또한 인진 약침액은 에탄올에 의해서 유발된 아폽토시스에서 세포보호 효과가 있음이 확인되었다.
이산화염소는 살충효과를 지니며, 이는 이 물질이 발생시키는 활성산소에 기인된다. 살충효과를 주는 주요 원인으로 이산화염소의 세포독성에 주목하고 있다. 본 연구는 이산화염소가 유발하는 세포독성이 활성산소에 기인한 아폽토시스 유발로 가설을 세우고 이를 검증하였다. 화랑곡나방(Plodia interpunctella) 유충에 이산화염소를 주입한 결과 전체혈구수의 뚜렷한 감소를 보였고, 이후 처리 유충은 사망하였다. 아폽토시스 세포치사과정을 규명하기 위해 TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase nick end translation) 분석법을 적용하였다. 곤충 세포주의 하나인 Sf9 세포에 서로 다른 이산화염소를 처리하고 TUNEL 분석법으로 관찰한 결과 처리 농도에 비례하여 아폽토시스 비율이 증가하였다. 다음으로 서로 다른 농도의 이산화염소를 화랑곡나방 유충에 주입하고 혈구 세포를 TUNEL 분석법으로 관찰한 결과 이산화염소는 처리 농도에 비례하여 아폽토시스 유발을 나타냈다. 그러나 항산화제인 비타민 E를 이산화염소와 함께 처리하면 비타민 E의 농도에 비례하여 이산화염소의 아폽토시스 유발을 억제하고 이에 따라 살충률도 감소하였다. 이러한 결과는 이산화염소에 기인한 세포독성은 활성산소에 기인한 아폽토시스 유발로 이뤄졌다는 것을 제시하고 있다.
목적: 오가피가 mouse testis에서 유래된 Leydig 세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스에 미치는 영향을 조사하였다. 방법: TM3 세포주에서의 아폽토시스 변화를 관찰하기 위해서 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), DNA fragmentation assay, 및 reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 방법을 이용하였다. 결과: MTT assay를 이용하여 분석한 결과 농도에 따른 세포독성의 효과가 에탄올 투여부터 관찰되었다. 또한 오가피로 전처치하고 에탄올을 처치하였을 때 세포독성이 크게 감소되었다. DAPI staining에서 오가피 투여군은 에탄올 투여군에 비해서 fragmentation이 억제되었다. RT-PCR의 분석에 의하여 caspase-3 mRNA 발현이 오가피 투여군은 알코올 투여군보다 유의성있게 억제됨을 보여주었다. 결론: TM3 Leydig 세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스는 전형적인 세포사멸 형태를 나타내었다. 반면에 오가피 투여군은 에탄올에 의해서 유발된 아폽토시스에서 세포보호 효과가 있음이 확인되었다.
목 적 : 과산화수소는 산화적 스트레스를 통해 아폽토시스를 유도하는 것으로 알려져 있다. 본 논문에서는 과산화수소로 유발된 신경아세포종 아폽토시스 과정에서 호도약침액의 효과를 관찰하였다. 방 법 : 과산화수소로 인한 신경아세포종의 아폽토시스에서 호도약침액의 효과를 알아보기 위해 배양 중인 신경아세포종에 과산화수소를 처리하고, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MIT)분석법, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 염색법, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), western blotting의 방법으로 확인하였다. 결 과 : 과산화수소로 인한 신경아세포종의 아폽토시스에서 호도약침액을 처리한 결과, 약침액을 처리한 세포의 생존이 약 30% 정도 증가하고, 핵 응축과 단편화를 막아주며, CASP3와 BAX단백질의 발현이 감소되었다. 결 론 : 이러한 결과로 호도약침액이 과산화수소로 인한 신경아세포종의 아폽토시스과정에서 보호효과를 나타내는 것으로 사료된다.
Totopoisomerase II 저해제인 etoposide는 핵안에 DNA double strand breaks를 일으키므로써 세포의 DNA에 손상을 초래한다. 본 연구에서는 인간 망막색소상피세포인 ARPE-19 세포에서의 세포성장 및 아폽토시스에서 etoposide의 역할을 살펴보았다. Etoposide는 세포의 성장을 크게 감소시켰으며 TUNEL에서 아폽토시스를 나타내는 DNA fragmentation의 증가를 유도하였다. 게다가, etoposide는 산화적 손상에 대해 세포나 조직을 보호하는 역할을 하는 것으로 알려진 세포내 항산화효소인 heme oxygenase-1 (HO-1)의 발현을 크게 증가시켰다. Etoposide에 의한 HO-1 발현증가는 항산화물질 NAC에 의해 억제되었는데, 이는 etoposide에 의한 세포내 ROS의 증가가 HO-1 발현에 중요한 역할을 한다는 것을 의미한다. 또한 HO-1 발현을 억제하기 위하여 HO-1 siRNA 방법을 사용하였다. 흥미롭게도, HO-1 유전자의 knock-down은 etoposide에 의해 유도되는 DNA fragmentation의 정도를 증가시켰다. 이들 결과를 종합해볼 때, etoposide에 의해 자극되어진 ARPE-19 세포에서 발현증가된 HO-1은 etoposide에 의한 아폽토시스 유발과정에서 세포를 보호하는 항아폽토시스의 기능을 한다는 것을 시사한다.
본 연구는 건전지나 플라스틱 등 산업물질, 식품, 흡연 그리고 공기, 물 등을 통해 인간과 생태계에 노출되고 있는 중금속 카드뮴을 인간 유방암 세포 MCF-7에 처리하였을 때 일어나는 현상을 살펴보고 나아가 카드뮴의 독성기전을 규명하기 위해 시행되었다. 카드뮴으로 인한 아폽토시스는 DNA분절 현상과 핵의 쪼개짐, 세포주기에 있어서 sub-G1의 출현 그리고 아폼토시스시에 발현되는 단백질 caspase의 발현, 특히 산화적 스트레스상태에서 마이토콘드리아가 손상을 입었을 때 발현되는 caspase-9의 발현을 통해 확인하였다. 카드뮴으로 인한 산화적 스트레스는 활성 산소종이 대조군에 비해 증가하고 이를 방어하기 위한 항산화효소 superofide dismutase, catalase, glutathion redurtase가 감소함을 통하여 확인하였다. 이 상의 결과들을 통해 카드뮴은 인간 유방암 세포 MCF-7에서 산화적 스트레스를 유발시켜 아폼토시스를 일으키는 것으로 추정할 수 있다.
목적 : 인진(茵蔯)이 SK-N-MC 신경아세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스에 대한 보호작용의 기전을 연구하였다. 방법 : SK-N-MC cell line에서의 세포 보호 기전을 알아보기 위하여 reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) 기법을 이용하여 bcl-2, bax 및 caspase-3의 변화를 관찰하였다. 결과 : RT-PCR을 이용하여 분석한 결과 SK-N-MC neuroblastoma에서 에탄올 처치는 bax, bcl-2 및 caspase-3 mRNA의 발현을 증가시켰다. 인진액의 전처치후 에탄올 처치한 신경 아세포에서는 에탄올에 의해서 증가된 bax와 caspase-3 mRNA 발현이 억제되었으나, bcl-2의 발현에는 유의한 증가를 나타내지 않았다. 결론 : 이상의 결과를 통하여 에탄올에 의해서 유발된 신경아세포의 아폽토시스에서 인진이 세포보호 효과가 있음이 확인되었고 그 기전은 bax와 caspase-3의 억제에 기인할 가능성을 시사한다고 할 수 있다.
사람의 몸을 이루고 있는 세포들은 이웃끼리 대화도 나누고 몸 전체의 균형을 위해 자살도 한다. 오래된 세포는 옆에 있는 세포가 죽어달라고 요청하면 즉시 스스로 목숨을 끊는다. 그러나 암세포는 이러한 자살명령을 거부하고 제멋대로 자라게 되어 몸의 균형을 잃게 한다. 암세포도 일반 세포처럼 스스로 자살을 할 수 있도록 하는 길을 열면 암은 정복될 것이다.
동물복제ㆍ인간복제로 떠들썩한 요즈음 우리나라에서 유전공학 바람을 일으키는 주축으로 활약하고 있는 서울대 자연대 미생물학과 강현삼교수. 강교수는 원숭이에서 암을 유발시키는 SV40 바이러스가 가진 암유발유전자와 형질 변형시킨 사람의 각질세포를 이용한 조직배양 실험을 통해 인슐린 등 생존요소를 투입할 경우 아폽토시스 과정을 촉진시켜 암을 억제할 수 있다는 논문을 발표해 관심을 끌고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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