The separation of metallic and semiconducting single-wall carbon nanobubes (SWCNTs) by agarose gel method was carried out in this study. The effect of concentration of agarose, SDS (sodium dodecyl sulfate), and pH in the solution on separation behavior was investigated. With increasing the concentration of agarose in the solution, it showed that the ratio of metallic SWCNTs, which was analyzed from UV-vis-NIR spectroscopy, was increased in the solution phase, while the overall concentration of SWCNTs was decreased. With increasing the concentration of SDS, we could observe that the ratio of metallic SWCNTs was increased due to more affinity between SDS molecules and metallic SWCNT. The highest metallic SWCNTs ratio was reached up to 58.4% when the pH of solution was 8.2.
Cellulophga sp. J9-3, is a gram-negative, aerobic marine bacterium belonging to the family Flavobacteriaceae. In addition to cellulose degradability, the J9-3 strain is also capable of hydrolyzing agar in the solid and liquid medium, and the production of agarase in the presence of agarose can be remarkably induced by the bacterium. From the cell culture broth of Cellulophga sp. J9-3, ammonium sulfate precipitation and three kinds of column chromatography were successively performed to purify a specific agarase protein, the AgaJ93. Purified AgaJ93 showed the strongest hydrolyzing activity towards agarose (approximately 22%), and even displayed activity towards starch. AgaJ93 hydrolyzed agarose into neoagarotetraose and neoagarohexaose via various oligosaccharide intermediates, indicating that AgaJ93 is an endo-type β-agarase. AgaJ93 showed maximum activity at a pH of 7.0 and temperature of 35 ℃. Its activity increased by more than six times in the presence of Co2+ ions. The N-terminal sequence of AgaJ93 showed 82% homology with the heat-resistant endo-type β-agarase Aga2 of Cellulophaga sp. W5C. However, the biochemical properties of the two enzymes were different. Therefore, AgaJ93 is expected to be a novel agarose, different from the previously reported β-agarases.
In this study, diffusion coefficients of 20 kDa FITC-dextran in 2% agarose gel with different cell concentrations were measured using fiberoptic-based fluorescence recovery after photobleaching technique. As increasing cell concentration suspended in agarose gel, the diffusion coefficients were decreased. The diffusion coefficient of agarose gel which contains $10{\times}10^6$ cells/ml was decreased to 11% that of in agarose gel without cells. The distribution of fluorescence dye in 3D scaffold was also simulated. The simulation result shows that the diffusion coefficient is more significant factor than the scaffold structure.
Liquid and solid fuels currently in use have various pros and cons. As a result, researches are dedicated to produce a new form of fuel that utilizes the advantages and overcomes weakness of conventional fuels. In the present study, a new method for making solidified ethanol fuel is introduced, and its preliminary properties and combustion characteristic are observed. The solidified ethanol fuel was made through the production of agarose hydrogel, and its subsequent soaking into pure ethanol. The properties of the solidified ethanol fuel were quantitatively and qualitatively observed, and its validity and applicability discussed.
Lee, Da Young;Cho, Jae Ho;Lim, Woon Ki;Shin, Hae Ja
Journal of Life Science
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v.24
no.1
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pp.54-60
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2014
Aromatic hydrocarbons are toxic environmental pollutants that are detrimental to the ecosystem and human health. Among them, chlorotoluene and nitrotoluene are toxic to hydrobios and irritate the skin, eyes, and respiratory organs of humans. We herein report the development of recombinant microbial biosensors for cheap and rapid monitoring of chlorotoluene and nitrotoluene compounds. Plasmids were constructed by inserting the xylR regulatory gene for BTEX (benzene, toluene, ethylbenzene, and xylene) degradation into upstream of Po' (the DmpR activator promoter Po with the deletion of its own upstream activating sequences) or Pu (the cognate promoter of XylR)::lacZ (the ${\beta}$-galactosidase gene) and transformed into Escherichia coli $DH5{\alpha}$. In the presence of inducers, the biosensor cells immobilized in agarose developed a red color in 1-2 h due to the hydrolysis of chlorophenol red ${\beta}$-D-galactopyranoside (CPRG), a substrate of ${\beta}$-galactosidase that was expressed by the inducers. Among BTEX, high responses were specifically observed with o-, m-, p-chlorotoluene ($0.1{\mu}M-100 mM$) and o-, m-, p-nitrotoluene (0.1 mM-100 mM). Po' demonstrated higher responses than those with Pu. The biosensors immobilized in agarose showed good stability after 21 days' storage at $4^{\circ}C$, and responses in untreated wastewater spiked with chlorotoluene and nitrotoluene, suggesting they can be used to detect compounds in wastewater.
Molecular cloning of metalloprotease gene from Serratia marcescens ATCC 21074 into Escherichia coli JM109 was carried out. Chromosomal DNA of S. marcescens was completely digested with Hind111 and southern hybridization with a synthetic oligonucleotide probe revealed that a 50 KD metalloprotease gene was contained in 4.0 Kb chromosomal DNA fragment, 4.0 Kb chromosomal DNA fragments eluted from agarose gel were ligated with pUC19 and transformed into E. coli JM109. Nine positive clones were obtained from about $1\times 10^3$ transformants by colony hybridization. Their recombinant plasmids, pSPl and pSP2 have same chromosomal DNA fragments in pUC19 in opposite-orientations. When cloned metalloprotease gene was expressed in E. coli, about 52 KD precursor protein of metalloprotease was detected by western blot analysis from E. coli harboring a recombinant plasmid pSP2. Plasmid pSP2 showed no protease activities in E. coli but overproduced the active metalloprotease in S. rnarcescens ATCC 27117.
Park, Jeong-Hun;Lee, Seung-Jae;Lee, In-Hwan;Cho, Dong-Woo;Rhie, Jong-Won
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.26
no.3
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pp.137-143
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2009
It has been reported that mechanical stimulation takes a role in improving eel/ growth in skeletal system. Various research groups have been showed their own bioreactors which stimulate cell-seed three-dimensional scaffold. In this study, we hypothesized that the various conditions of mechanical stimulation would affect cell growth and proliferation. To prove our hypothesis, we designed a custom-made bioreactor capable of applying controlled compression to cell-encapsulated scaffolds. This device consisted of a circulation system and a compression system. Each parts of the bioreactor was fabricated using the rapid prototyping technology By using the rapid prototyping technology, we can modify and improve the bioreactor very rapidly For dynamic cell-culture, cell-encapsulated agarose gel was fabricated in 2% concentration. We performed dynamic cell-culture using this agarose gel and developed bioreactor in 3 days.
Agar was prepared from Gelidium amansii collected from Jeju Island, South Korea. This agar preparation has high gel strength and low sulfate content compared with G. amansii agar from Morocco. Accordingly, agarose was made from the Jeju agar through the consecutive refining processes of dimethyl sulfoxide (DMSO) extraction and ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) washing. The physicochemical properties of the resulting agarose were compared with those from agarose prepared using only DMSO extraction. Consecutive DMSO extraction and EDTA washing more strongly affected the physicochemical properties of the agarose (purified agarose) compared with the use of DMSO extraction alone. These properties were similar to those of commercial agarose used for electrophoresis. In DNA electrophoresis, the separation and movement speed of the purified agarose were similar to those of the commercial agarose. In a $^{13}C$ NMR analysis, the purified agarose exhibited the same carbon peak as the commercial agarose. When observed under scanning electron microscopy, the agar had an even and smooth surface without irregularities or pores, and the purified agarose had a wide surface area with a large number of pores; the commercial agarose had an irregular surface that would allow the solvent to easily permeate. These results illustrate that the physicochemical properties of agarose prepared from DMSO extraction and EDTA washing were more effective than those observed after DMSO extraction alone; thus, these processes used in succession will be useful in agarose industries.
A new forensic saliva test method using $SALIgAE^{(R)}$ was evaluated in this study. The sensitivity and specificity of $SALIgAE^{(R)}$ were examined and compared to those of other saliva test methods such as agarose gel diffusion method and $Phadebas^{(R)}$ test sheet method. $SALIgAE^{(R)}$ showed high sensitivity and specificity to human saliva in addition to quickness. Moreover modified $SALIgAE^{(R)}$ method was cheap and easy to use in crime scene and DNA laboratory. $SALIgAE^{(R)}$ was very stable at room temperature and had no effect on STR typing.
Lee Sung-A;Lee Jung-Hyun;Kim Sang-Jin;Kim Hyung-Kwoun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.33
no.1
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pp.29-34
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2005
Lipase-producing bacteria (S3) were isolated from intertidal flat at Saemanguem. A isolated strain was identified as Psychrobacter species by physiological and fermentational characterization as well as 16S rRNA analysis. The strain was then named as Psychrobacter sp. S3. P. sp. S3 grew most rapidly at $30^{\circ}C$, but grew well even at $10^{\circ}C$ and its lipase activity was most high when cultivated at $20^{\circ}C$. Lipase S3 had optimum temperature of $30^{\circ}C$ for the hydrolysis of p-nitrophenyl caproate and had more than $80^{\circ}C$ activity even at $10^{\circ}C$. The activation energy was calculated to be 1.5 kcal/mol, which showed that it was a typical cold-adapted enzyme. It was an alkaline enzyme with optimum pH of $9.0\~9.5$. It could hydrolyze various length of triglycerides. Among them, it hydrolyzed most rapidly $C_4,\;C_{14},\; C_{16}-length$ triglycerides. When added to tributyrin-agarose gel, lipase S3 hydrolyzed tributyrin most rapidly at 30 and $40^{\circ}C$, but it could hydrolyze well even at $4^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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