본 연구는 MC3T3-E1 조골전구세포에 실크피브로인 처리 시 파골세포분화 관련 국소인자 중 파골세포로의 분화를 강력히 유도하는 IL-$1{\beta}$의 발현 및 파골세포로의 분화억제에 관여하는 국소인자인 OPG의 발현변화를 조골세포 조건 배양액에서 살펴보았으며, 이 조골세포 조건배양액을 RAW264.7 파골전구세포에 처리 시 파골세포로의 분화를 억제하는지를 알아보았다. 조골세포 조건배양액에서 OPG의 발현은 농도별($0.001\;mg/mL{\sim}0.1\;mg/mL$) 실크피브로인 처리 시 $86%{\sim}100%$로 양성대조군(+C)과 유의적 차이가 없었다. 그러나 IL-$1{\beta}$의 발현은 0.1 mg/mL 실크피브로인 처리 시 양성대조군(+C)의 1.8% 수준으로 그 발현을 현저히 억제 하였다. 조골세포조건배양액을 처리한 RAW264.7 세포의 파골세포로의 분화정도는 농도 의존적으로 현저히 감소 하였다. 특히, 0.1 mg/mL의 실크피브로인을 처리한 조골세포 조건배양액 처리 시 파골세포로 분화하지 않은 음성대조군(-RANKL) 수준으로 파골세포 분화를 현저히 억제한 것은 OPG의 발현 증가가 아닌 IL-$1{\beta}$의 발현 억제에 의한 것으로 사료되며, 추후 연구를 통해 관련 기전의 연구가 필요할 것으로 생각되어진다.
실크단백질을 이용한 나노화 소재개발을 위한 기초연구의 일환으로 실크 피브로인과 PVP를 반응시켜 제조한 견단백질/PVP의 열 특성을 살펴보기 위하여 시차열분석 및 열중량분석을 행하였다. 1. PVP의 유리전이온도는 $175^{\circ}C$ 부근에서 관찰되었으며 실크 단백질과 반응에 의하여 영향을 받지 않았으나 견단백질/PVP는 $220^{\circ}C$ 부근에서 미지의 발열피크를 나타내었다. 2. 열중량 분석 결과 PVP의 함량이 증가함에 따라 실크 단백질에 기인한 열분해시작온도가 상대적으로 증가하는 것으로 관찰되었다.
The intermolecular hydrogen bond between silk fibroin in aqueous solution facilitates gelation of silk fibroin. The dependence of gelation by the concentration of silk fibroin, pH and temperature was investigated. The gelation time of silk fibroin is decreased with increasing the concentration of glycerol and temperature within a limited range. The pH optimum for gelation found out to be 9. Hydrophobic additives were investigated to reduce gelation time.
견피브로인의 응용가능성을 높이기 위하여 대표적인 생체고분자인 히아론산을 이용하여 견피브로인/히아론산 브렌드 필름을 제조하였으며 구조 및 열 특성을 살펴보았다. 1. 적외선 분광분석 결과 견피브로인과 히아론산 두 고분자 사이에는 수소결합 등의 상호작용이 존재하지 않는 것으로 나타났다. 또한 브렌드 필름내에 존재하는 실크피브로인은 EDC 에탄올 용액처리에 의하여 $\beta$-sheet 구조로 전이되었다. 2. 견피브로인/히아론산 브렌드 필름에서 견피브로인과 히아론산 각각의 열분해 흡열피크와 발열피크 온도에는 큰 변화가 없었으나, 열분해 피크의 폭이 넓어지는 것으로 봐서 실크 피브로인과의 브렌드 또는 EDC 처리에 의하여 열분해 반응이 매우 복잡한 환경하에서 진행되고 있음을 알 수 있었다. 3 견피브로인/히아로산 브렌드 필름은 자기 중량 대비 평균 70배의 수분을 흡수하였다.
혈관내피세포는 혈관 안쪽을 덮고 있는 편평한 세포층으로, 혈관의 기능과 혈관평활근세포의 증식을 조절한다. 폴리락타이드글리콜라이드 공중합체(PLGA)는 물성이 좋고 분해속도를 조절하기 좋은 생분해성 합성고분자이며, 여러 형태로 제조하기 쉽다. 누에에서 얻은 실크 피브로인은 18가지 아미노산으로 구성되어 있고 세포의 부착과 세포 기능 유지에 중요하며 화장품, 의료분야 등 다양한 분야에서 응용되고 있다. 본 연구에서는 용매 증발법을 이용하여 0, 10, 20, 40 및 80 wt%의 실크를 이용하여 실크/PLGA 하이브리드 필름을 만들었으며, MTT, SEM, ELISA, 면역세포화학염색법을 실시하였다. 실크/PLGA 하이브리드 필름에서 실크 함량에 따른 인간 대동맥 내피세포의 부착과 증식을 측정한 결과, 40 wt%의 실크/PLGA 하이브리드 필름에서 세포의 부착과 증식이 가장 높았으며, 이런 결과들은 실크가 세포의 증식에 좋은 영향을 미치고 실크/PLGA 하이브리드 필름의 표면이 인간 대동맥 내피세포의 성장에 알맞은 환경이라는 것을 확인할 수 있었다.
Effect of the acid hydrolysate of silk fibroin on obesity was investigated in obese(057BL/KsJ-db/db) mice. After 8 weeks feeding of 1%(w/w) or 3%(w/w) fibroin hydrolysate, the extents of reduction in body weight were significantly higher than that of obese control. The weight reduction in female mice was higher than that in male mice. Plasma leptin in male mice increased up to 1.8-fold higher level than obese control by feeding hydrolysate. In case of female mice, however, it rather decreased with increased feeding concentration of hydrolysate. From the results of high glycine and serine contents of peptide fractions contained in fibroin hydrolysate, it was inferred that fibroin peptides might affect xylosyltransferase(XT) activity on chondroitin sulfate synthesis causing to change susceptibility of adipocytes to hormones such as insulin followed by the reduced leptin synthesis in female mice. The result of the higher lipolysis in hydrolysate-fed group than obese control indicated that the reduction in body weight was due to the increased lipolytic activities in male and female mice in common.
This study was designed to investigate the effects of silk fibroin powder on oxygen radicals and their scavenger enzymes in serum of rats. Sprague-Dawley(SD) male rats (160${\pm}$10 g) were fed experimental diets (SFP-2.5 and SFP-5.0 groups)added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. Triglyceride levels were remarkably inhibited (15∼25%) in SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Hydroxyl radical ($.$OH) formations resulted in a marked decrease (15%∼25%) compared with control group, while superoxide radical and hydrogen peroxide formations resulted in a significant decrease (6∼12% and 10%). Lipid peroxide and oxidized protein (>C=O group) productions resulted in a significant decrease (6∼12% and 6%) compared with control group. Superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities were remarkably increased (35∼55% and 40∼50%), but glutathione peroxidase (GSHPX) activities were significantly increased (13%) compared with control group. These results suggest that anti-aging effect of silk fibroin powder (SFP) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes.
Piezoelectric generators use direct piezoelectric effects that convert mechanical energy into electrical energy. Many studies were attempted to fabricate piezoelectric generators using piezoelectrics such as ZnO, PZT, PVDF. However, these various inorganic/organic piezoelectric materials are not suitable for bio-implantable devices due to problems such as brittleness, toxicity, bio-incompatibility, bio-degradation. Thus, in this paper, piezoelectric generators were prepared using a silk fibroin film which is bio-compatible by dip-coating method. The silk fibroin films are a mixed state of silk I and silk II having stable β-sheet type structures and shows the d33 value of 8~10 pC/N. There was a difference in output voltages according to the thickness. The silk fibroin generators, coated 10 times and 20 times, revealed the power density of 16.07 μW/cm2 and 35.31 μW/cm2 using pushing tester, respectively. The silk fibroin generators are sensitive to various pressure levels, which may arise from body motions such as finger tapping, foot pressing, wrist shaking, etc. The silk fibroin piezoelectric generators with bio-compatibility shows the applicability as a low-power implantable piezoelectric generator, healthcare monitoring service, and biotherapy devices.
가잠 실크 피브로인의 아미노산 조성 중 가장 많은 비율을 차지하고 있는 Glycine에 동위체 라벨링([1-13C]-Gly)을 실시하여 5령 1일째부터 고치를 지을 때까지의 생합성의 상태를 NMR법을 이용하여 추적하였다. 그 결과 5령 5일을 기준으로 가잠 실크의 결정부분을 형성하는 아미노산이 형성은 되나 실크의 결정부분을 형성하는 아미노산이 형성은 되나 실크가 되었을 때 결정성의 고배향 구조를 이루지 못하고 결정성의 저배향 구조를 형성하고마는 형태로 된다고 생각되어 졌다. 이 사실은 배향시료의 고체CP-NMR 스펙트럼의 피크 분리로부터 확인할 수 있었다. 그 결과 수소결합에 관여하는 N-H의 방향이 거의 수직이라고 할 수 있는 83˚의 분자축 부분이 18˚의 고배향 분포를 이루면서 82% 존재하고, 또 나는 N-H의 결합방향이 60˚인 분자축 부분이 18% 존재하면서 62˚의 배향분포를 이룬다고 하는 시뮤레이션의 결과로 설명되어졌다.
이 연구는 화상이 유발된 mouse에 사이클로덱스트린/폴리에틸렌이민/실크 피브로인이 함유된 수화겔을 처치하여 화상 치유효능을 평가한 실험이다. 상처치유 효능을 갖는 것으로 알려진 silk fibroin (SF)을 함유한 polyethyleneimine (PEI)/${\beta}$-cyclodextrin (${\beta}CD$) conjugate를 epichlorohydrin (EPI)로 가교시켜 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔을 제조하였고, 이를 화상이 유발된 mouse에 처치하여 일반 거즈만 처치한 음성대조군과 상용화되어 있는 상처치유 제품(OTC)을 처치한 양성대조군과 비교해 시간에 따른 화상치유 경과를 지켜보았다. 약물이 로딩되지 않은 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔과 약물이 로딩된 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔을 처치한 동물 실험군의 화상치유경과는 육안으로 관찰 시, 음성대조군과 비교했을 때에 큰 차이가 없었고 오히려 상처가 악화되는 경향을 보였다. 반면 OTC 연고를 처치한 양성대조군에서는 상처의 크기가 눈에 띄게 줄어들었다. H&E staining을 통하여 진피 층에서의 상피재생을 확인한 결과 또한 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔의 화상치유에 대한 효능이 뚜렷하게 나타나지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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