• 제목/요약/키워드: 실크 단백질

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세리신 단백질의 생리활성과 피부친화성 탐색 (Bioactive and Skin-compatible Properties of Silk Sericin)

  • 이광길;여주홍;이용우;권해용;김종호
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제43권2호
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    • pp.109-115
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    • 2001
  • 실크 세리신 단백질을 추출정제하여 새로운 기능성 소재로 활용하기 위하여 세리신 추출법에 따른 세리신의 특성을 분석하고 약리효능과 피부친화성 소재로의 응용 가능성을 관능평가를 통하여 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 실크 세리신 단백질을 효과적으로 추출하는 방법은 NaOH(0.02wt.%)로 처리하는 방법과 질소공기 하에서 식용효소인 Flavourzyme 3%로 처리하는 방법이 연감을 25wt.% 내외로 거의 100% 세리신을 회수하였다. 2. 추출된 세리신의 분자량 분포는 10,000-30,000 범위였으며 용해도는 90 wt.% 이상이었다. 또한 Actinase 등 단백질 분해 효소로 처리하여 분자량 2,700-4,200 의 저분자화 세리신을 얻을 수 있었으나 아미노산 조성은 고온고압 추출 세리신과 큰 차이가 없었다. 3.세리신의 항산화, 혈당강하 및 알콜대사에 미치는 영향을 살펴본 결과 유의성 있는 항산화 효과를 나타내지는 않았으나 세리신 투여시 sucrose와 maltose에 의하여 유발되는 혈당을 각각 62.6%, 41.5% 낮추는 효과를 나타내었다. 4. 피부친화성 소재로서 세리신의 활용가능성을 검토하기 위하여 중금속 함량을 측정한 결과 활성탄이나 wool filter를 이용함으로서 효과적으로 중금속을 제거할 수 있었으며, 세리신을 포함한 비누와 입욕제에 대한 관능평가 결과 세정력, 기포성, 세면후 피부보습성 등이 우수한 것으로 판정되어 실크 세리신 단백질은 피부친화성 미용 소재로 적용이 가능할 것으로 확인되었다.

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콜라겐 및 실크 피브로인/콜라겐 블렌드 나노섬유의 제조 및 특성분석 (Preparation and Characterization of Collagen and Collagen/Silk Fibroin Blend Nanofibers)

  • 정임;박원호;민병무
    • 한국섬유공학회:학술대회논문집
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    • 한국섬유공학회 2003년도 가을 학술발표회 논문집
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    • pp.31-33
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    • 2003
  • 실크 피브로인은 대표적인 섬유상 단백질의 하나로 생체적합성, 생분해성, 저독성 등의 유용한 특성을 가지므로 생체재료로 상당한 관심과 연구의 대상이 되어 왔다. 콜라겐 또한 우수한 생체적합성과 생분해성을 가지고 있어 유용한 생채재료로서 조직배양용 지지체나 창상피복재와 같은 의료용 분야에 적절하게 응용될 수 있는 장점을 가진다. 본 실험에서는 1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-propanol (HFIP)을 공용매로 하여 실크 피브로인/HFIP 용액과 콜라겐/HFIP 용액을 각각 제조하여, 이들 용액을 75/25, 50/50, 25/75의 비율로 혼합하여 방사용액을 제조하고, 이 용액을 전기방사법으로 방사하여 실크 피브로인/콜라겐 블렌드 나노섬유를 얻었다. (중략)

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품종별 누에고치로부터 얻은 실크 세리신 및 실크 피브로인의 세포 증식 활성연구 (Cell proliferation of silk proteins obtained from Bombyx mori silkworm varieties)

  • 정다은;김성국;조유영;권해용;이광길;김현복
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제53권2호
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    • pp.92-96
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    • 2015
  • 본 연구는 장려 품종 누에고치로부터 실크 세리신과 실크 피브로인으로 분리하여 이들 단백질을 세포 첨가제로 개발하기 위하여 수행되었다. 장려품종 누에고치를 고온 고압기를 통하여 실크 세리신을 먼저 추출하였으며, 남겨진 실크 피브로인을 이용하여 시간별로 용해하여 품종별 실크 피브로인을 얻었다. 이들 실크 세리신과 실크 피브로인을 이용하여 세포 독성, 세포 증식 및 분열 관련 유전자 발현 분석을 확인하였다. 먼저, 누에고치의 특성을 분석하기 위하여 공극률을 측정하였다. 공극률은 금옥잠 누에고치의 경우 84.71%, 대성잠 81.58%, 백옥잠 73.23%의 공극률 값이 나타났다. 분자량 차이에 있어서 실크 세리신은 품종의 영향이 크지 않았으나 실크 피브로인의 경우, 금옥잠은 5시간의 장시간의 용해에도 불구하고 100 kDa 이상의 큰 분자량을 나타내었다. 장려품종 누에를 사용하여 제조된 실크 세리신과 실크 피브로인을 이용하여 세포 증식 실험을 하였으며 백옥잠으로부터 얻은 실크 세리신의 경우 농도에 따라 유의적으로 세포 증식 효과가 나타났으며, 금옥잠으로부터 얻은 실크 피브로인의 경우 5시간 용해 시 세포 증식에 있어서 가장 우수한 결과를 보였다. 또한, 백옥잠 실크 세리신 처리 결과 세포 증식 관련 유전자의 발현수준이 증가됨을 확인할 수 있었다.

실크의 가용화 조건이 효소분해 실크 펩타이드의 분자량 분포에 미치는 영향 (Effect of Solubilization Conditions on Molecular Weight Distribution of Enzymatically-Hydrolyzed Silk Peptides)

  • 채희정;인만진;김의용
    • KSBB Journal
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    • 제13권1호
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    • pp.114-118
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    • 1998
  • 실크의 피브로인 단백짐의 가수분해에 의한 실크 펠타이드의 제조를 위하여 설크의 가용화 조건이 분자량 분포에 미치는 영 향을 고찰하였다 염 화칼숨, ethylenediamine 및 황산에 의해 가용화된 실크의 평균 분자량은 각각 41600, 3308과 1268 dalton 으로서 염화칼숨을 제외한 나머지 두 가용화 방법에서 평균 분 자량이 수천 dalton인 실크 용액을 얻을 수 있었으며 분산계수 는 3-4의 범위뜰 보였다. 가용화 및 분말화한 후 6시간 동안 단백질 분해효소 처리에 의하여 600-1200 dalton의 중량평균 분 자량을 갖는 살크 접타이드틀 얻을 수 있었다. 24시간 염산에 의한 산분해 처리에 의해 얻은 실크 웹타이드의 평균 분자량은 145 dalton으로 80%의 높은 유리 아미노산 함량을 나타내었다. 여러가지 가용화 방법 및 가수분해 방법 중 낮은 농도의 황산용 액으로 우선 실크를 가용화한 후 중화 및 효소처리에 의해 웹타 이드로 가수분해하는 방법이 과도한 아미노산의 유리를 억제하 면서 분자량의 조절도 용이할 것으로 판단되었다.

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피부세포 증식에 관여하는 실크단백질 탐색 (Effect of Bombyx mori, Antheraea Yamamai and Antheraea pernyi Silk Protein in Skin Fibroblast Cell Proliferation After Injury)

  • 한상미;이광길;여주홍;권해용;우순옥;백하주;박관규
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.72-76
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    • 2004
  • 가잠과 천잠 및 작잠의 실크 단백질 분획물로부터 피부섬유아세포에 대한 증식 효과를 알아본 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 가잠 및 천${\cdot}$작잠 단백질로부터 다양한 분자량대의 실크 단백질을 순수 분리 분획화 하여 사람 피부세포(human skin fibroblast; CCD-986sk)에 기계적 상처를 준 후 처리한 결과, 평균분자량(Mw)이 300-500 및 950-1500 분획군이 세포 증식에 뛰어난 효과가 있음을 확인${\cdot}$선발하였다. 2. 가잠의 경우 평균 분자량 590(BM-1), 1400(BM-2)에서, 천잠은 340(AY-1), 940(AY-2), 작잠에서는 300(AP-1), 1440(AP-2)에서 $10\;{\mu}g/ml$의 농도로 처리했을 경우 피부섬유 아세포의 증식이 무처리구에 비하여 40% 이상의 증식 효과를 갖았다. 또한 유효 농도 범위에서 대식세포인 RAW 264.7 세포에 대해서는 세포독성을 지니지 않았다. 3. 아미노산 조성에 있어 저분자량 AY-1 분획의 전아미노산 및 유리아미노산은 Tyr 함량이 매우 높게(25-48 g/100g)나타났으며, 작잠의 저분자 분획인 AP-1에서는 Lys 함량이 높게(5.2 g/100g) 나타남을 확인하였다. 4. 동일한 실크 단백질일 경우 저분자량 분획물에서 피부 세포 증식에 좀 더 효과적이였다.

효소 분해에 의한 가용성 실크 펩타이드의 제조 (Preparation of Soluble Silk Peptides by Food-grade Proteinases)

  • 하재석;송재준;조형권;이승구
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제34권2호
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    • pp.115-120
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    • 2006
  • 천연 단백질인 실크를 가수분해하여, 건강기능성 식품 등에 다양하게 활용될 수 있는 가용성 실크 펩타이드를 생산하는 효소공학적 연구를 수행하였다. 효소는 Bacillus, Aspergillus, 파파야, 파인애플 등으로부터 유래하는 10종의 프로티아제를 사용하였으며,가수분해 효율을 높이기 위하여 생 실크를 $CaCl_2$- 에탄올 공용액에 녹인 가용화된 실크를 제조하였고, 이를 상온 중성의 조건에서 50시간 동안 투석하여 효소반응을 위한 기질로 사용하였다. 효소반응은 37, pH 7.0에서 수행하였으며, 파인애플 유래 프로티아제인 Bromelain과 Bacillus유래 효소인 Alcalase가 실크의 가수분해에 적합한 것으로 확인되었다. 특히 파인애플 유래의 Bromelain은 가수분해 도중 불용성 침전물의 형성으로 인한 생산 수율의 감소가 가장 적어 가용성 실크 펩타이드의 제조에 적합하였고, 분자량 분포에 있어서도 보다 다양한 것으로 확인되었다.

실크 생체막에 대한 세포 부착 및 세포 증식 (The Promotion of Cell Attachment and Proliferation on Silk Fibroin)

  • 조유영;권해용;이광길;남성희;이희삼;여주홍
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제54권3호
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    • pp.166-170
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    • 2011
  • 실크 피브로인은 누에로부터 생산되는 천연단백질로서 생분해성과 생체적합성을 가지고 있어 생체재료로 사용하기에 적합한 물질이다. 본 연구에서는 이러한 실크 피브로인이 세포 생장에 미치는 영향을 확인하기 위해서, 다양한 농도의 실크 피브로인 용액을 만들고 이를 이용하여 실크 피브로인 필름을 제작하였다. 제작된 실크 필름에서 세포를 배양한 후 세포부착과 증식 능력, 형태등을 관찰하였으며, 세포 부착과 생장관련 유전자의 발현을 분석하였다. 그 결과 0.1과 1% 실크 피브로인 필름에서 배양한 세포가 세포 부착능력이 가장 우수했으며, 특히 1% 필름에서 자란 세포의 경우 다른 농도의 필름에서 보다 그 생장이 매우 좋았다. 또한 세포 생장과 관련된 유전자의 발현 수준은 0.1과 1% 실크 피브로인 필름에서 증가됨을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과는 실크를 이용하여 다양한 용도의 의료용 소재로 사용하는데 있어 기존의 다른 생체막을 대체할 수 있을 뿐 아니라, 실크 생체막의 사용으로 결손된 부위에 대한 빠른 치유효과 또한 기대할 수 있을 것이라 생각된다.