Kim, Hye Jin;Yoon, Hae Min;Kim, Tae Young;Lee, Won Jun
Journal of Life Science
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v.26
no.7
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pp.758-763
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2016
Fatty acid transporters are key mediators of skeletal muscle lipid metabolism. Several protein groups have been implicated in cellular long-chain fatty acid uptake or oxidation, including fatty acid transporter proteins (FATPs), the plasma membrane fatty acid-binding protein (FABPpm), and the fatty acid translocase (FAT/CD36). FAT/CD36 is highly expressed in skeletal muscle and known to be regulated by various factors such as exercise and hormones. Insulin-like growth factor-I (IGF-I) is a well-known regulator of skeletal muscle cells. However, it has not been studied whether there is any interaction between IGF-I and FAT/CD36 in skeletal muscle cells. In this study, the effects of IGF-I treatment on FAT/CD36 induction were examined. Differentiated C2C12 cells were treated with 20 ng/ml of IGF-I at different time points. Treatment of C2C12 cells with IGF-I resulted in increased FAT/CD36 mRNA and protein expression. After 24 and 48 hr of IGF-I treatment, FAT/CD36 mRNA increased 89% and 24% respectively. The increase of both proteins returned to the control level after 72 hr of IGF-I treatment, suggesting that the FAT/CD36 gene is regulated pretranslationally by IGF-I in skeletal muscle cells. These results suggest that IGF-I can regulate the expression of FAT/CD36 in skeletal muscle cells. In conclusion, IGF-I induces a rapid transcriptional modification of the FAT/CD36 gene in C2C12 skeletal muscle cells and has modulating effects on fatty acid uptake proteins as well as oxidative proteins.
Hypoxia is a common condition found in a wide range of solid tumors and is often associated with metastasis and poor clinical outcomes. In the present study, we found that HIF-$1{\alpha}$ was induced by cobalt chloride (500 ${\mu}M$) treatment on human lung cancer cells, A549 and H460, for 24 hr. However, cobalt chloride (500 ${\mu}M$) did not affect cell proliferation of A549 and H460 in 48 hr. Cobalt chloride (500 ${\mu}M$) additionally induced epithelial-to-mesenchymal-like transition (EMT) such as reduced E-cadherin expression and increased ${\alpha}$-SMA expression. These results were confirmed by immunofluorecence experiment in H460 cells. E-cadherin was localized on the outer cell membrane. However, when the cells were treated with 500 ${\mu}M$ cobalt chloride for 24 hr, diffuse E-cadherin staining was observed, characteristic of a migratory mesenchymal phenotype. We also found that cobalt chloride induced integrin ${\beta}3$ expression and FAK phosphorylation in human lung cancer cells using western blotting and FACS anlaysis. Our data suggest that integrin ${\beta}3$-induced FAK phosphorylation may be developed into target molecules for blocking tumor metastasis.
Kim, Kyung-Cho;Kang, Suk-Chull;Goo, Charles;Kim, Jin-Ho;Park, Jae-Seok;Joo, Geum-Jong;Park, Chi-Seung
Journal of the Korean Society for Nondestructive Testing
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v.24
no.4
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pp.325-330
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2004
Several kinds of low voltage cables have been used in nuclear power plants for the supply of electric power, supervision, and the propagation of control signals. These low voltage tables must be inspected for safe and stable operation of nuclear power plants. In particular, the degradation diagnosis to estimate the integrity of low voltage rabies has recently been emphasized according to the long use of nuclear power plants. In order to evaluate their degradation, the surrounding temperature, hardness of insulation material, elongation at breaking point (EAB), etc. have been used. However, the measurement of temperature or hardness is not useful because of the absence of quantitative criteria; the inspection of a sample requires turning off of the power plant power; and, the electrical inspection method is not sufficiently sensitive from the initial through the middle stage of degradation. In this research, based on the theory that the ultrasonic velocity changes with relation to the degradation of the material, we measured the ultrasonic velocity as low voltage cables were degraded. To this end, an ultrasonic degradation diagnosis device was developed and used to measure the ultrasonic velocity with the clothing on the cable, and it was confirmed that the ultrasonic velocity changes according to the degradation of low voltage cables. The low voltage cables used in nuclear power plants were degraded at an accelerated rate, and EAB was measured in a tensile test conducted after the measurement of ultrasonic velocity. With the increasing degradation degree, the ultrasonic velocity decreased, whose potential as a useful parameter for the quantitative degradation evaluation was thus confirmed.
Potassium Sorbate (PS) is a potassium salt version of sorbic acid, which has antimicrobial and fungistatic features in foods. Therefore, PS is used as a food preservative against fungi and mold. PS has been found to be non-toxic even when taken in large quantities given its trait to be broken down in the body into water and carbon dioxide. Gap Junctional Intercellular Communication (GJIC) is essential in the maintenance of tissue homeostasis during development and differentiation. This study was made of the effects of PS on GJIC in WB-F344 rat liver epithelial (WB) cells. We found dramatic decrease of cell viability in time- and dose-dependent manners when WB cells were treated with PS. The effect of PS on GJIC is strong inhibition, and it took place in parallel with a hyperphosphorylation of connexin 43 expression. The finding that PS interferes with gap junction functionality should be considered with respect to the mechanism of PS-induced hepatotoxicity.
Keratin contains regulatory molecules that can enhance neuronal cell activity. We fabricated keratin/ PLGA films using 0, 10, 20, and 50 wt% of keratin using solvent casting method. We measured the contact angle of each film and cell proliferation was assayed by counting the cells attached on the film. Adhered cell morphology was confirmed by scanning electron microscope. RT-PCR was conducted to evaluate the gene expression of NF, NSE, and S-100, the Schwann cell markers. The keratin content of 20 and 50 wt% provided higher wettability than PLGA. The 20 wt% keratin was better in cell adhesion and proliferation of SCs than other keratin/PLGA films. The phenotypic stability of SC was maintained with the keratin content of 10 and 20 wt%.
This study was conducted to investigate of Mori Folium Water Extract (MF) on anti-inflammation activity. MF Water extracts after 24 houres cultivation were examined to ascertain the cell viability of mouse macrophage RAW 264.7 cells. The influence of the Water extracts in RAW 264.7 macrophage cells treated with LPS was investigated. nitric oxide (NO) production, nterleukin$(IL)-1{\alpha}$ IL-6 and IL-10 increased generation of cytokines. mouse macrophage RAW 264.7 cells cell viability changes were no decreas after MTT assay of MF Water extract. The MF water extracts inhibited NO generation caused by LPS in the macrophages over $25{\mu}g/mL$. The MF water extracts increased in the control group the $IL-1{\alpha}$ and IL-6 activation generated by LPS in the macrophages over $50{\mu}g/mL$. Accordingly, it was found that different MF water extract concentrations significantly influenced certain anti-inflammation activities in RAW 264.7 macrophage cells. The results of this study are expected to be highly applicable to health - friendly functional materials. Further studies are needed to confirm the signaling pathways associated with anti-inflammation of macrophages through continuous studies.
The ultimate goal of the present study is to establish the acoustical performance standards of classroom for the elderly who are incomplete hearing people. As a pilot survey, the present study was conducted to investigate the listening environment and the actual condition of speech perception performance of education facilities for elderly, Acoustic performances of two education facilities for elderly in Cheongju were measured and questionnaire survey was done to elderly people. Also, speech intelligibility tests were undertaken by Consonant Vowel Consonant (CVC) and Phonetically Balanced Words (PBW) methods. The questionnaire survey showed that the elderly were satisfied with the listening environment of the educational facilities in general. Also, it was found that acoustical performances satisfy with the acoustic criteria of general classrooms in Korea. However, the results of the speech intelligibility test showed that the scores of elderly were significantly lower than twenties with normal hearing. It was also revealed that the scores are reduced as the age increases. Thus, it was concluded that the acoustical performance standards of educational facilities for the normal hearing were not suitable for educational facilities for the elderly.
HK shiitake mushroom mycelium (HKSMM), containing 14% β-glucan, is a health functional food ingredient individually approved by the Korea Ministry of Food and Drug Safety for liver health. The anti-inflammatory effect of a 50% aqueous ethanol extract of HKSMM (designated HKSMM50) was studied in RAW 264.7 macrophage cells treated with lipopolysaccharide (LPS). An active hexose correlated compound (AHCC) was used as a positive control. LPS-activated RAW 264.7 cells were treated with HKSMM50 and AHCC (0, 20, 100, 500 ㎍/ml) and cultured for 24 hr. Inflammation-related elements in the supernatant were measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits, and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) proteins in the cells was analyzed by Western blotting. The HKSMM50 lowered iNOS and COX-2 protein expressions, and nuclear factor-kappa B (NF-κB), nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) contents in a concentration-dependent manner as compared to LPS treatment. Similarly, the HKSMM50 lowered the content of pro-inflammatory cytokines interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-4 (IL-4) and interleukin-6 (IL-6) contents and increased the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT). The efficacy of the AHCC treatment was similar to that of the HKSSM50 treatments. These results indicate that HKSMM50 showed an anti-inflammatory effect in LPS-treated RAW 264.7 cells by down-regulation of NF-κB signaling and suggest that HKSMM could be used as a health functional food ingredient to help improve immune function.
The expression of interleukin-1α (IL-1α) is elevated in monocytic cells, such as monocytes and macro-phages, within atherosclerotic arteries, yet the cellular molecules involved in cytokine upregulation remain unclear. Because peptidoglycan (PG), a major component of gram-positive bacterial cell walls, is detected within the inflammatory cell-rich regions of atheromatous plaques, it was investigated if PG contributes to IL-1α expression in monocytes/macrophages. Exposure of THP-1 monocytic cells to PG resulted in elevated levels of IL-1α gene transcripts and increased secretion of IL-1α protein. The transcription and secretion of IL-1α were abrogated by OxPAPC, an inhibitor of TLR2/4, but not by polymyxin B that inhibits lipopolysaccharide-induced TLR4 activation. To understand the molecular mechanisms of the inflammatory responses due to bacterial pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) in diseased arteries, we attempted to determine the cellular factors involved in the PG-induced upregulation of IL-1α expression. Pharmacological inhibition of cell signaling pathways with LY294002 (a PI3K inhibitor), Akti IV (an inhibitor of Akt activation), rapamycin (an mTOR inhibitor), U0126 (a MEK inhibitor), SB202190 (a p38 MAPK inhibitor), SP6001250 (a JNK inhibitor), and DPI (a NOX inhibitor) also significantly attenuated the PG-mediated expression of IL-1α. These results suggest that PG induces the monocytic or macrophagic expression of IL-1α, thereby contributing to vascular inflammation, via multiple signaling molecules, including TLR2, PI3K/Akt/mTOR, and MAPKs.
Peroxidasin (PXDN), a multidomain heme peroxidase containing extracellular matrix (ECM) motifs, as well as a catalytic domain, catalyzes the sulfilimine crosslink of collagen IV (Col IV) to reinforce Col IV scaffolds. We previously reported that PXDN is required for endothelial cell (EC) survival and growth signaling through sulfilimine crosslink-dependent matrix assembly. In this study, we examined whether peroxidase activity is required for PXDN function in ECs. First, we constructed a mutant PXDN by point mutation of two highly conserved amino acids, Q823 and D826, which are present in the active site of the peroxidase domain. After isolation of HEK293 clones highly expressing the mutant protein, conditioned medium (CM) was obtained after incubating the cells in serum-free medium for 24 hours and then analyzed by Western blot analysis under nonreducing conditions. The results revealed that the mutant PXDN formed a trimer and that it was cleaved by proprotein convertase-like wild-type (WT) PXDN. However, peroxidase activity was not detected in the CM containing the mutant PXDN, in contrast to that of WT PXDN. In addition, the sulfilimine crosslink ability of the mutant PXDN was lost. Moreover, the CM containing the mutant PXDN failed to promote the growth of PXDN-depleted ECs, unlike the CM containing WT PXDN. These results suggest that the peroxidase activity of PXDN affects EC growth by forming a sulfilimine crosslink.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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