In order to optimize the conditions of callus induction and plant regeneration in seed culture of Italian ryegrass, the effects of basic medium and carbon sources on seed culturability and genotypic difference of plant regenerability were investigated. MS medium was better than N6 and B5 medium in enhancing callus growth and plant regeneration. Sucrose was superior to maltose in plant regeneration as carbon source in the medium. The genotypic difference in plant regenerability was obvious among four cultivars of Italian ryegrass tested. 'Rio' and 'Jeanne' showed to have higher regenerability with the frequency of 38% and 56%, respectively.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.12a
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pp.54-54
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2020
지구온난화에 따라 농업부문 신재생에너지의 중요성이 증대되고 있으며, 화본과 식물은 바이오에너지작물의 중요한 소재를 제공하고 있다. 화본과 식물의 기내대량증식연구의 일환으로 홍띠식물의 기내 재생 식물체의 유전적 안정성에 대한 기초자료를 제공할 목적으로 기내배양으로 재분화시킨 홍띠(Imperata cylindrica 'Rubra') 재분화 식물체 중 녹색체 재생식물체를 대상으로 ISSR 표지를 사용하여 유전적 안정성을 조사하였다. 재분화식물체는 MS (Murashige and Skoog, 1962)배지에 생장조절제를 첨가한 배지에서 배양하였다. 생장점 부위를 적출하여 캘러스를 유도하고(0.1 mg/L 2,4-D와 2 mg/L BA), 캘러스 증식(0.1 mg/L 2,4-D와 0.05 mg/L BA), 신초 재분화( 0.01 mg/L NAA와 2 mg/L BA) 후 MS배지에서 식물체를 양성하고 순화시켰다. 배양은 26±2℃, 25 µmol/m2/s, 14h/10h (day/night) 광조건 하에서 실시하였다. 재분화식물체는 홍띠 및 녹색 재분화식물체 2 종류로 나타났는데, 이는 생장점에서는 홍띠가 분화되었음에도 불구하고 생장점 주변조직에서 유래한 녹새체가 분화된 후 우세하게 자라서 녹색재생체가 우점하는 것으로 추정된다. ISSR 분석은 대조구로 모식물체 홍띠를(8개체), 재분화식물체는 녹색체 중, 1년간 노지포장에서 재배중인 녹색체(10개체)와 실험실내 화분에서 재배중인 시료를(10개체) 사용하였다. ISSR 밴드패턴을 비교한 결과, 재분화체는 실내포트 재배식물체 10.3%, 노지1년 재배식물체 8.3%로 대조구의 4.1%보다 유전적 다형성 비율이 2배 이상 높게 나타났다. 또한 재분화식물체들의 유전적 유사도를 평가하고 군집분석을 실시하였다.
The competence of callus formation and plant regeneration from root derived callus was higher in japonica cultivars than those of Tongil-type cultivars of rice. A japonica type cultivars Yeongdeogbyeo, showed the highest capacity (13%) for plant regeneration from root calli of 6 cultivars tested. The callus induced from seed and root tissues maintained higher capacity for plant regeneration during 7 passages of subculture on N$_{6}$ solid media at 2-week intervals. The maximum frequency (2 x 10$^{5}$ mL) of round cells and their cell colonies showed about 24 days after suspension culture of root-derived callus in N$_{6}$ medium with lmg/L 2,4-D, 300mg/L casein hydrolysate, 10mM L-proline, 20g/L sucrose and 30g/L sorbitol. The frequency of somatic embryo formation in suspension cultures of root-derived callus increased with prolonged advance of subculture time from 30 to 90 days, but their regenerative capacities decreased.
Protected Flora are natural heritage that involve a wide variety of valuable natural values and cultural values. Over time, "Cultural Properties Preservation Law" has been changing the definition and the criteria of Protected Flora. In addition to the academic value and the rarity of the plant, historical, ethnic and landscape values have become increasingly important. For that reason the declaration and management processes of the Protected Flora need to be improved. However, the current statute has focused on the morphological characteristics of the plants which have a limit to encompass various values of the plant. It also does not correspond to the definition of Protected Flora and its declaration criteria stated on the "Cultural Properties Preservation Law." For this reason, the main purpose of this study is to develop new types of Protected Flora so that various Protected Flora can be discovered in the future.
Protoplasts were isolated from hypocotyl tissues of 5-day-old Brassica oleracea var capitata Green Challenger seedlings. Several media were used for protoplast culture and shoot regeneration. The shoot-regeneration rapacity of protoplast derived callus depended on the initial culture medium. Protoplasts were cultured in liquid medium (B5 medium supplemented with CaCl2, 2H2O 600mg/L, g1ucose 20g/L, D-mannito1 70g/L, NAA lmg/L, BA lmg/L, 2.4-D 0.25 mg/L)at 27$^{\circ}C$ under the dark After 5 to 10 days, cultlues were diluted with medium with a reduced osmotic stabilizer and then transferred to illuminated conditions. The culture medium was changed with the fresh medium at 7- to 10-day-intervals until the formation of microcallus. Hypocotyl protoplast-derived callus proliferated when transferred to MS medium supplemented with NAA lmg/L, BA 1mg/L and GA$_3$ 0.02mg/L. Upon transfer to MS basal medium without growth regulators, roots were produced. In an attempt to increase the regeneration frequency, 10g/L polyvinylpyrrolidone was added to the regeneration medium, but the shoot regeneration was mot improved. The regenerated whole plants were acclimated in a sterized soilless mixture(vermiculite 2;perlite 2;peat moss1) in a culture room.
The in vitro regeneration was established, and the genetic stability among the mother plants (control) and the micropropagated green plants was evaluated using ISSR markers in Imperata cylindrica 'Rubra', Poaceae which containing important bioenergy plants. Green shoots were multiply induced from growing point culture via callus on MS medium supplemented with 0.01 mg/L NAA and 2 mg/L BA, and the shoots were proliferated on the MS medium with rooting. Rooted plantlets were transplanted to the pot with 100% survival rate. Using ISSR markers, somaclonal variation was analyzed in eight mother plants (control), ten green-regenerant cultivated at culture room (ReR) and ten green-regenerant cultivated at field condition (ReF). All ISSRs produced a total of 97 bands, and the scorable bands varied from one to seven with an average of 4.4 bands per primer. The polymorphism rate of ReRs and ReFs was 4.1% and 3.1% respectively, showing higher rate than that of control (0%). The genetic similarity matrix (GSM) among all accessions ranged from 0.919 to 1.0 with a mean of 0.972. According to the clustering analysis, ReFs and mother plants were divided into two independent groups. The results indicate that no clear genetic diversity was detected among regenerated plants, and ISSR markers were useful tool for identification of somaclonal variation of regenerants.
This study was conducted to determine the inheritance of the ability of callus formation and plant regeneration in seed cultures of rice. The culturabilities of three Japonica rices,'Chucheongbyeo', 'Nagdongbyeo', and 'Daeribbyeo 1', were higher than those of Tongil type cultivars, 'Milyang 23' and 'Samgangbyeo 'The frequency for callus growth in F₂ populations of the three crosses, 'Milyang 23/Chucheongbyeo', 'Milyang 23/Daeribbyeo 1', and' Samgangbyeo/Nagdongbyeo', revealed a nearly normal distribution. The broad-sense heritability estimated from the ability of callus formation in the crosses were ranged from 83.8% to 90.1%. The frequency distribution of plant regenerability in F₂ population of 'Milyang 23/Daeribbyeo 1' showed a continuous variation. But the segregation mode of plant regenerability from seed-derived callus in the F₂ progenies of 'Milyang 23/Chucheongbyeo' and 'Samgangbyeo/Nagdongbyeo' appeared to fit the expected 3 : 1 ratio for the high and low regenerability. These results suggest that the high plant regenerability of 'Chucheongbyeo' and 'Nagdongbyeo' was regulated by a single dominant gene.
Kim, Kyung-Hee;Kim, Yong-Goo;Heo, Sung-Hyun;Bae, Eun-Ji;Lee, Kwang-Soo;Park, Nam-Chang;Lee, Byung-Hyun
Asian Journal of Turfgrass Science
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v.25
no.2
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pp.184-189
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2011
To optimize tissue culture conditions for genetic transformation of Zoysia matrella (L.) Merr., we investigated the effects of different plant growth regulators and medium supplements on plant regeneration using stolon explants excised from mature plant grown in a green house. Plant regeneration frequency was 33.3% when stolon tissues with a node were cultured on the regeneration medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D and 1 mg/L of kinetin. Comparing the basal media tested, MS medium showed higher plant regeneration performance than N6 or SH medium. Addition of 5 mg/L $AgNO_3$ with 10 mg/L cysteine improved frequency of plant regeneration up to 40%. Among different carbon sources, 3% sucrose was found to show the best for regeneration frequency. This rapid and efficient plant regeneration system would be useful for using genetic transformation experiments of manilagrass without intervening callus-mediated regeneration.
These experiments were attempted to introduce rolC gene in the Petunia hybrida cv. Titan white by Agrobacterium mediated. The maximum frequency of shoot regeneration was obtained by 60% on MS medium containing 1.0 mg/L BA, 0.1 mg/L NAA, 200 mg/L kanamycin, 500 mg/L carbenicillin, 30 g/L sucrose, and 8 g/L agar. Kanamycin-resistant calli were selected from petunia leaf discs by cocultivation with Agrobacterium suspension cultures on MS medium. The addition of AgNO$_3$ and KMnO$_4$ in the medium increased the shoot regeneration by 31.3% from leaf disc as compared with non-treated leaf disc. Among clones exhibiting kanamycin resistance, only 3 clones were confirmed by southern hybridization analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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