• Development and Reproduction
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• 제9권2호
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• pp.123-134
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• 2005

Germ cell development during oogenesis, ovarian maturation and first sexual maturity in female Ruditapes philippinarum were investigated by cytological and histological observations. R. philippinarum is dioecious. During vitellogenesis, the Golgi complex, glycogen particles, and mitochondria were involved in the formation of lipid droplets and lipid granules in the cytoplasm of the early vitellogenic oocyte. In the late vitellogenic oocyte, cortical granules, the endoplasmic reticulum, and mitochondria were involved in the formation of proteid yolk granules in the cytoplasm. At this time, exogenous lipid granular substance and glycogen particles in the germinal epithelium passed into the oocyte through the microvilli of the vitelline envelope. The spawning period was once a year between early June and early October, and the main spawning occurred between July and August when seawater temperature was approximately $20^{\circ}C$. The reproductive cycle of this species can be categorized into five successive stages: early active stage(January to March), late active stage(Februaryto May), ripe stage(April to August), partially spawned stage(May to October), and spent/inactive stage (August to February). Percentages of female clams at first sexual maturity of $15.1{\sim}20.0mm$ in shell length were 52.6%(50% of the rate of group maturity was 17.83mm in length), and 100% for the clams >25.1mm.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.87-87
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• 2003

난자성숙 중 MPF활성은 MI 과 MII에서 최대로, MII로의 성숙 직후 난자를 핵이식에 이용하는 것은 핵과 세포질 사이의 reprogramming에의 효율을 높일 수 있을 것이다. 일반적으로 돼지의 IVF나 핵이식은 체외성숙후 44h에 이뤄지고 있다. 이는 aging을 낳을 수 있고 aging은 또한 발달능을 떨어뜨릴 수 있다. 따라서, 본 실험은 돼지의 체외성숙시간에 따른 체외성숙율과 단위발생후 체외발달율을 비교하여 최적의 체외성숙시간을 찾고자 실시하였다. 돼지 난포란을 10% pFF, 0.1mg/ml cysteine, 10IU/ml PMSG, 10IU/ml hCG, 10ng/ml EGF가 첨가된 TCM-199배양액에서 22, 30, 44시간 동안 배양하여 성숙을 유도하였다. 체외성숙이 야기된 난자는 난구세포를 제거한 후 전기자극(2.0kv/cm, $30 \mu s$) 후 5분 동안 TCM-199에서 세정하고 다시 4시간 동안 6-DMAP에서 배양된 후 4mg/ml BSA가 첨가된 NCSU-23에 넣어 $39^{\circ}C$, 5% $CO_2$배양기에서 각각 6-7일 동안 배양을 실시하였다. 체외성숙 22시간 성숙난자는 M I 44.3%(35/79)와 A I -T I 36.7%(29/79)로 81%가 M II로의 성숙에는 아직 미치지 못했다. 30시간 성숙난자는 46.3%(56/121)가 M II로 성숙하였고, M I과 A I -T I 은 각각 25.6%(31/121), 27 3%(33/121)이었다. 44시간 성숙난자는 78%(71/91)가 M II로 성숙하였고, M I 과 A I -T I 은 각각 12.1%(31/121), 7 7%(33/121)이었다. 단위발생율은 22시간에 난할율은 35.4%(75/137)이었고, 배반포 발달은 없었다. 30시간에 난할율은 51.8%(145/280)이었고, 배반포 발달율은 5.5%(8/145)이었다. 44시간에 난할율은 80.0%(244/306)이었고, 배반포 발달율은 14.3%(35/144)이었다. 본 연구결과 핵 및 세포질의 완전한 성숙은 44h에 이루어지고, 이에 따른 배발달율도 뒤따름을 알 수 있었다. 난자가 핵성숙의 완성에도 불구하고 완전한 활성을 위한 발달능은 갖지 못함을 알 수 있었으며, 질 좋은 배반포 생산을 위해 핵과 세포질 성숙의 synchronous가 중요하다 사료된다. 체외성숙을 위한 배양기술의 진전과 더불어 체외성숙 시간에 따른 세포질적인 기전에 대한 연구가 필요하다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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• pp.32-32
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• 2003

소 난자의 체외성숙 과정에서 세포질 내 단백질의 생산과 축적의 변화는 핵 및 세포질 성숙과 밀접한 관계가 있다는 보고가 있지만, 난자의 성숙과 관련된 특정 단백질의 종류에 대한 보고는 없었다. 따라서 본 연구는 한우 난자의 체외성숙과 관련된 단백질의 생산 및 축적의 변화와 그 종류에 대해서 검토하였다. 체외성숙 시간(4.5, 9, 13.5, 18 및 24시간)에 따른 배양액 내의 단백질 합성의 변화는 2D gel electrophoresis를 이용하였고, 단백질 spot에 대해서는 peptide mass fingerprinting(PMF) 방법을 이용하였다. 또한 단백질 측정 시간에 신선 체외성숙 배양액으로 교환 후 난포란의 핵성숙과 배발달율을 검토하였다. 그 결과 한우 난포란의 체외성숙 시간에 따라 배양액에서 단백질의 양 및 질적인 변화를 확인하였다. 그리고 총 296개 단백질 spot들을 확인하였고, 그 중 30개 spot에서 유의적인 변화가 인정되었다. 또한 유의적인 변화를 보인 spot에 대한 PMF 분석을 통하여 Apolipoprotein A-1 precursor, Alpha enolase, Aldose reductase, 43kDa collectin precursor, Heat shock 27kDa protein, Plasminogen activator inhibitor-1 precursor, Thrombospondin 1 및 Transitional endoplasmic reticulum ATPase가 동정되었다 그리고 총 단백질 합성 경향은 0∼4.5 시간에는 감소하였고, 13.5∼18시간에 증가 한 후 다시 감소하는 경향을 나타내었으며, 단백질의 종류도 시간대별로 현저한 변화가 있었다. 한편 단백질을 측정하는 시기에 신선 체외성숙 배양액으로 교환한 후 난포란의 핵성숙 및 배발달율을 검토한 결과 18시간 체외성숙군에서 9시간째의 교환이 유의적으로 높은 핵성숙을 나타내었으나, 배발달율에서는 유의성이 인정되지 않았다. 그러나 24시간 체외성숙군에서 18시간째의 배양액 교환은 8세포기 및 배반포 발달율이 유의적(P<0.05)으로 높았다. 연구 결과로부터 소 난자의 체외성숙 시간에 따른 단백질 합성 경향의 차이를 확인하였고, 유의적인 변화를 나타낸 8가지의 단백질을 분리할 수 있었으며, 향후 이들 작용기전에 대한 연구가 필요하다고 사료된다.

• The Korean Journal of Zoology
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• 제38권4호
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• pp.457-464
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• 1995

Hela cells, a transformed human epithelial cell line, attach to various substrata but subsequent spreading is specific to collagen or gelatin. The spreading is initiated by the activation of phospholipase $A_2$ (PLA$_2$) which produces arachidonic acid (AA) as a consequence of cell surface collagen receptor clustering. This study examines the mechanism of PLA$_2$activation and which phospholipids are hydrolyzed by PIA$_2$ to release AA in response to Hela cell adhesion to a gelatin substratum. The levels of phosphatidyicholine decreases, among various phospholipids, during attachment and spreading of Hela cells. Lysophosphatidyicholine Is the only lysophospholipids formed during ileLa cell adhesion indicating that clustered collagen receptors activate PLA$_2$to hydrolyze posphatidylcholine to AA and lysophosphatidylcholine. Among various molecular entitles which are known to regulate PLA$_2$ activation, we have previously shown that PLA2 activation is not mediated by either changes in $Ca_2$+ levels, alkalinization of cytoplasmic p11, or activation of protein hinase C. It is also likely that PIA2 activation is not mediated by either pertussis or cholera toxinsensitive G proteins as those toxins do not affect both AA release and cell spreading.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제36권4호
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• pp.249-254
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• 2009

Objective: The aim of this study was to compare the fertilization and cleavage rates of human in vitro matured oocytes after fertilized by conventional in vitro fertilization (IVF) or intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Methods: A total of 135 GV stage oocytes were obtained from 59 women who received ovarian stimulation and IVF during Jan 2007 to Oct 2008. Ovarian hyperstimulation was performed using hMG or recombinant FSH with GnRH antagonist and then ovulation triggered by recombinant hCG. The immature oocytes obtained from stimulation cycles were cultured in IVM medium up to 48 hrs; commercial medium supplemented with rFSH 75 mIU/mL, rhCG 0.5 IU/mL and rEGF 10 ng/mL. The in vitro matured oocytes were fertilized by conventional IVF (41 GV oocytes) or ICSI method (94 GV oocytes). Results: Maturation rate were 51.2% and 59.6% in conventional IVF group and ICSI group, respectively. There was no significant difference in fertilization rates between two groups; 71.4% and 80.4%, respectively. The cleavage rate was also similar in two groups. Conclusion: The presented data suggest that conventional IVF has comparable fertilization and cleavage potential compared with ICSI as the insemination method of immature human oocytes obtained from stimulated cycle.

• Applied Microscopy
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• 제31권3호
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• pp.257-266
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• 2001

To investigate the process of spermoigenesis and glycogen effect during the spermatogenesis of Rana catesbeiana, the morphological characteristics of the testes were examined by light and transmission electron microscopy. Spermiogenesis of R. catesbeiana was divided into three stages on the basis of the features of the nucleus and the cytoplasm organelles. Except for the primary spermatogonia, the phases from the spermatocytogenesis to the spermatids before spermiation phase were surrounded by spermatocyst. Especially , the glycogen particles were not observed until in the stage of spermatocytogenesis, but from the early spermatids to the maturation phase were observed in the nucleus, acrosome and cytoplasm of the spermatids. The present result suggests that the glycogen may play an important role in the sperm maturation, and as a source of the energy in the wave-movement of sperm tail.

• Development and Reproduction
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• 제6권2호
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• pp.77-82
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• 2002

In ascidians, a primitive chordate, maternal cytoplasmic factors and inductive interactions are involved in the specification of cell fates in early embryos. The larval structure of ascidians is relatively simple, and the major mesodermal tissues of the tadpole larva are notochord, muscle, and mesenchyme. Formation of muscle cells is a cell-autonomous process, and localized maternal macho-l mRNA specify muscle fate in the posterior marginal zone of the early embryo. In contrast, inductive influence from endoderm precursors plays important roles in the specification of notochord and mesenchyme fates. FGF-Ras-MAPK signaling is involved In the induction of both tissues. The difference in responsiveness of the posterior mesenchyme and anterior notochord precursors to FGF signaling is caused by the presence or absence of intrinsic factors that inherited from the posterior-vegetal egg cytoplasm, respectively. In these inductions, directed signal polarizes the induced cells and promotes asymmetric cell divisions to produce two daughter cells with distinct fates.

• Applied Microscopy
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• 제30권1호
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• pp.89-100
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• 2000

We observed the salivary ducts of two species of snails, Achatina fulica and Incilaria fruhstoferi with an electron microscope, and obtained the following results. The intralobular and interlobular ducts of Achatina fulica assume the forms of round or ellipsoidal doughnuts. The boundaries between the endothelial cells are not clear. It is also found that the cytoplasm of the endothelial cells consists of the membrane infolded in interdigital form, and there are well -developed microvilli at the apical portion of the cytoplasm. On the other hand, the intralobular and interlobular ducts of Incilaria fruhtoferi consist of the irregular simple columnar epithelia. The high electron dense cytoplasm is filled with the irregular round granules. The microvilli at the apical portion of the cytoplasm are not so well-developed as those in Achatina fulica. In the salivary duct of Achatina fulica, the lumen has narrow and long tubular structure. The boundaries between the endothelial cells are not clear. The cytoplasm is full of many vacuoles and electron lucent granules. At the apical portion of the cytoplasm, lots of short and thin microvilli are found. The salivary duct of Incilaria fruhstorferi is wider ($65\times250{\mu}m$ in diameter) than that of Achatina fulica, and consists of endothelial cells of the same structures. At the apical portion of those endothelial cells, a lot of junction apparatus such as desmosomes are observed. The vessels in the salivary ducts of Achatina fulica and Incilaria fruhstoferi are observed mainly in the connective tissues between the salivary glands. The endothelial cell of the vessel has the irregular structure and looks dark due to the high electron density. These cells protrude their filopodia and phagocytosize foreign bodies.

• Proceedings of the Korea Multimedia Society Conference
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• 한국멀티미디어학회 2001년도 춘계학술발표논문집
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• pp.91-94
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• 2001

유방 질만 분석을 위한 병리진단에서는 암종세포의 세관형성 정도와 핵의 다형성과 유사분말정도를 기준으로 하여 나누는 방법이 용이하고 재현성이 높다. 그 중에서도 세포핵의 크기와 다형성, 핵과 세포질의 비율은 양성종양과 악성종양을 분류하는데 있어서 중요한 요소중의 하나이다. 그러므로 본 논문에서는 유방 질단 영상에서 세포핵을 추출하여, 핵의 형태학적 특징값인 핵의 연적 둘레, 가로·세로(장·단축)의 길이를 구하고 핵과 세포질의 비율을 계산한 후, 추출한 형태학적 특성 칸들이 양성종양과 악성종양으로 분류하는데 있어서 유의한 특성 값인지 비교·분석하였다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제34권2호
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• pp.180-183
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• 2001

Oncocytic carcinoid는 매우 드문 종양으로 단지 몇 례만이 문헌상 보고되고 있다. 본 저자들은 좌폐 상엽에 발생한 oncocytic carcinoid 1례를 치험하였는데 환자는 56세된 여자환로 특이한 증상은 없었다. 흉부 전산화 단층촬영상 좌폐상엽에 3$\times$3.5 cm 크기의 동종의 종괴를 보이고 있었다. 수술전 검사후 외과적절제술을 시행하였는데 육안적소견상 4$\times$3cm 크기의 경계가 명확한 황갈색의 종괴였으며, 병리조직학적 검사상 괴립성 호산성 세포질이 풍부한 양상을 보였으며 면역조직학적 검사에서는 cytokeratin에 양성반응을 보였으며 EMA와 chromograin에 국소적인 양성반응을 보여, 폐에 발생한 oncocytic carcinoid로 진단하였다. 수술후 환자의 상태는 양호하였으며, 현재 외래추적관찰중이다.