Objectives : The process through which mesenchymal cells condense and differentiate into chondrocytes to form new bone is known as endochondral bone formation. Chondrogenic differentiation and hypertrophy are essential steps in bone formation and are influenced by various factors. The stem bark and root bark of Eleutherococcus sessiliflorus (ES) have been widely used to treat growth retardation and arthritis in traditional Korean Medicine. In this study, we aimed to investigate the possible role of the stem bark of ES in the stimulation of chondrogenic differentiation in clonal murine chondrogenic ATDC5 cells. Methods : In ATDC5 cells treated with ES extract, cell viability and extracellular matrix production were determined using CCK-8 assay and Alcian blue staining, respectively, and alkaline phosphatase activity was measured. We also examined mRNA and protein expression levels of genes related to chondrogenic expression in ATDC5 cells using reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot analyses. Results : ES extract increased the accumulation of Alcian blue-stained cartilage nodules and alkaline phosphatase activity in ATDC5 cells. It increased the mRNA expressions of chondrogenic markers including bone sialoprotein (BSP), cartilage collagens, Runt-related transcription factor-2 (RUNX-2), osteocalcin (OCN), β-catenin, and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), as well as the protein expressions of β-catenin, RUNX-2, BMP-2, and alkaline phosphatase (ALP). Conclusion : Taken together, these results suggest that ES extract exhibits a chondromodulating activity and therefore may be a possible agent for the treatment of bone growth disorders.
Cell migration is essential for diverse cellular processes including wound healing, immune response, development, and cancer metastasis. Pi3-kinase (PI3K) is a key regulator for actin cytoskeleton and phosphorylates phosphatidylinositol (4,5)-diphosphate (PIP2) to phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PIP3). High levels of PIP3 by PI3Ks are associated with increased levels of F-actin and pseudopod extension at the leading edge of migrating cells such as neutrophils and Dictyostelium. LY294002 is a well-known PI3K specific inhibitor. Here, we investigated the effect of LY294002 on cell migration. First, we evaluated the appropriate concentration of dimethyl sulfoxide (DMSO) for using as a solvent for LY294002. DMSO is a highly polar organic reagent and one of the most common solvent for organic and inorganic chemicals. Cell morphology and cell migration were unaffected at the concentrations less than 0.1 % DMSO. Therefore, stock solution of LY294002 was prepared so that the final concentration of DMSO was 0.1 % or less when treated. When cells were treated with LY294002, cell migration was increased in a concentration-dependent manner. The maximum speed was detected in the presence of 30 µM LY294002. These results suggest that PI3Ks play a inhibitory role in regulating cell migration in our experimental conditions.
BYOUNGSEOK KIM;SOYEON KIM;JEONGYUNG JIN;BYEOL KIM;JONG-GYU PARK
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.29
no.1
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pp.42-55
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2024
To discover unrecorded diatoms, seawater, sand, and pebbles were collected from the intertidal zone of five tidal flats from 2016 to 2023. Diatoms were isolated from the collected samples, cultured, and the ultrastructure of the cells was observed using a scanning electron microscope. 7 species of unrecorded diatoms, consisting of 3 orders, 5 families, and 7 genera, were discovered: Gomphoseptatum aestuarii, Rhoiconeis pagoensis, Seminavis exigua, Plagiolemma distortum, Staurotropis seychellensis, Biremis sigmoidea, Liriogramma sarcophagus. Among these, four genera, Rhoiconeis, Plagiolemma, Staurotropis, and Liriogramma, are reported for the first time in Korea. L. sarcophagus was separated from the central diatom Asteromphalus and transferred to Liriogramma, but its phylogenetic position has not yet been clearly established.
Proper activation and aggregation of platelets are necessary, but excessive or abnormal aggregation can lead to cardiovascular diseases such as stroke, thrombosis, and atherosclerosis. Therefore, identifying a substance that can regulate or inhibit platelet aggregation is important for preventing and treating these diseases. Several studies have shown that certain ginsenoside compounds in Panax ginseng can inhibit platelet aggregation. Among these compounds, Rk3 (G-Rk3) from Panax ginseng needs to be further explored in order to reveal the mechanisms of action during inhibition. G-Rk3 significantly increased amounts of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and led to significant phosphorylation of cAMP-dependent kinase substrates vasodilator-stimulated phosphoprotein and inositol 1,4,5-trisphosphate receptor. Furthermore, the effect of G-Rk3 extended to the inhibition of PI3K/Akt phosphorylation resulting in the reduced secretion of intracellular granules. Ultimately, G-Rk3 effectively inhibited platelet aggregation. Therefore, we suggest G-Rk3's potential as a prophylactic or therapeutic agent for cardiovascular diseases caused by faulty platelet aggregation.
This study was designed to evaluate the expression of heat shock protein in tooth and surrounding tissue during the experimental movement of rat incisors, by LSAB(labelled streptavidine biotin) immunohistochemical staining for heat shock protein. Twenty seven Sprague-Dawley rats were divided into a control group(3 rats), and 6 experimental groups(24 rats), to which 75g of force was applied from helical springs across the maxillary incisors. Rats of experimental groups were sacrificed at 0.5, 1, 4, 7, 14 and 28 days after force application, respectively. And the periodontal tissues of a control group and experimental groups were studied immunohistochemically. The results were as follows : 1. In control group, the expression of HSP47 was rare in gingiva, dentin and cementum, and mild in periodontal ligament and alveolar bone. But it was more evident than that of HSP70. 2. The expression of HSP47 or HSP70 was rare or mild in dentin, cementum and odontoblast of experimental group, regardless of the duration of force application, which was not different from that of control group. 3. In experimental group, the expression of HSP47 got to the highest degree in periodontal ligament and alveolar bone at 4 days after force application, and then decreased. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 4. The expression of HSP70 began to increase at 12 hours after force application and got to the highest degree at 4 days, in the capillary of pulp and periodontal ligament. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 5. The expression of HSP70 in alveolar bone of experimental group was rare, which was similar to that of control group.
Wetland plants have evolved specialized adaptations to survive in the low-oxygen conditions associated with prolonged flooding. The development of internal gas space by means of aerenchyma is crucial for wetland plants to transport $O_2$ from the atmosphere into the roots and rhizome. The formation of tissue with high porosity depends on the species and environmental condition, which can control the depth of root penetration and the duration of root tolerance in the flooded sediments. The oxygen in the internal gas space of plants can be delivered from the atmosphere to the root and rhizome by both passive molecular diffusion and convective throughflow. The release of $O_2$ from the roots supplies oxygen demand for root respiration, microbial respiration, and chemical oxidation processes and stimulates aerobic decomposition of organic matter. Another essential mechanism of wetland plants is downward water movement across the root zone induced by water uptake. Natural and constructed wetlands sediments have low hydraulic conductivity due to the relatively fine particle sizes in the litter layer and, therefore, negligible water movement. Under such condition, the water uptake by wetland plants creates a water potential difference in the rhizosphere which acts as a driving force to draw water and dissolved solutes into the sediments. A large number of anatomical, morphological and physiological studies have been conducted to investigate the specialized adaptations of wetland plants that enable them to tolerate water saturated environment and to support their biochemical activities. Despite this, there is little knowledge regarding how the combined effects of wetland plants influence the biogeochemistry of wetland sediments. A further investigation of how the Presence of plants and their growth cycle affects the biogeochemistry of sediments will be of particular importance to understand the role of wetland in the ecological environment.
Effect of a $Na^+$ gradient on $Ca^{2+}$ uptake was studied in isolated sarcolemmal vesicles of cat ileal longitudinal muscle. $Ca^{2+}$ uptake was markedly stimulated in the presence of an outwardly directed $Na^+$ gradient. External $Na^+$, monensin and A23187 abolished the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake. Monovalent cations such as $K^+$, $Li^+$, $Rb^+$, $Cs^+$ and choline could not substitute for $Na^+$ in enhancement of $Ca^{2+}$ uptake. Divalent cations such as $Ba^{2+}$, $Sr^{2+}$, $Mn^{2+}$ and $Cd^{2+}$ but not $Mg^{2+}$ inhibited the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake. Increase in external pH in the range of 6.0 to 8.0 stimulated the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake. Amiloride inhibited the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake at concentrations above 0.5 mM, whereas diltiazem or vanadate did not. The apparent Km of the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake for $Ca^{2+}$ was 18.2 ${\mu}M$ and apparent Vmax was 689.7 pmole/mg protein/5 sec. Kinetic analysis of the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake showed a noncompetitive interaction between internal $Na^+$ and external $Ca^{2+}$. The dependence of $Ca^{2+}$ uptake on internal $Na^+$ showed sigmoidal kinetics and Hill coefficient for internal $Na^+$ was 2.52. Inside positive membrane potential generated by imposing an inwardly directed $K^+$ gradient and valinomycin significantly stimulated the $Na^+-dependent$$Ca^{2+}$ uptake. These results indicate that a $Na^+-Ca^{2+}$ exchange system exists in the sarcolemmal membranes isolated from cat ileal longitudinal muscle and it might operate as an electrogenic process.
The effect of local hyperthermia of 41 to $43^{\circ}C$ for 30 minutes on radiosensitivity of normal tissue was studied utilizing jejunal crypt microcolony assay. Hyperthermia of this range enhanced the radiation effect and the effect was mainly additive without significant effect on the slopes of cell survival curves. At the isoeffect level of 20 microcolony formation, the thermal enhancement ratio was 1.02, 1.10 and 1.39 for $41^{\circ},\;42^{\circ}\;and\;43^{\circ}C$, respectively. The distribution of microcolony formation along the circumference of jejunum was not uniform, having more colonies around the mesenteric border, and this suggests the effect of uneven cooling by blood circulation.
Joo, Chan Uhng;Juhng, Woo Suk;Kim, Jae Cheol;Yi, Ho Keun
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.45
no.9
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pp.1106-1113
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2002
Purpose : Nuclear ($factor-{\kappa}BNF-{\kappa}B$) is now recognized as playing a potential role in programmed cell death and the adaptive response to various stress. Cellular hypoxia is a primary manifestation of many cardiovascular diseases. It seems that vascular endothelial growth factor (VEGF) and insulin like growth factor-I(IGF-I) have a function as a protective molecule in the heart against several stress including hypoxia. In this study, the role of $NF-{\kappa}B$ to the cellular response and regulation of protective molecules against the acute hypoxia in the heart was studied. Methods : To cause acute hypoxic stress to the heart, Sprague Dawley rats were exposed to hypoxic chamer($N_2$ 92% and $O_2$ 8%). After the hypoxic exposure, nuclear proteins, total proteins and mRNA were isolated from heart. Translocation of the transcription factors $NF-{\kappa}B$, NF-ATc, AP-1 and NKX-2.5 were evaluated by electrophoretic mobility shift assay(EMSA). The expression of IGF-I and VEGF were studied before and after the hypoxic stress by competitive-PCR, Northern hybridization and Western hybridization. To confirm the role of the $NF-{\kappa}B$ in the heart, the rats also were pretreated with diethyl-dithiocarbamic acid(DDTC) into peritoneal cavity to block $NF-{\kappa}B$ translocation into nucleus. Results : The expression of $NF-{\kappa}B$, AP-1 and NF-ATc were increased by the hypoxic stress. Increased expression of the VEGF and IGF-I were also observed by the hypoxic stress. However, the blocking of the $NF-{\kappa}B$ translocation reduced those expressions of VEGF and IGF-I. Conclusion : These results suggest that $NF-{\kappa}B$ has a protective role against the acute hypoxia through several gene expression, especially VEGF and IGF-I in heart muscle.
In order to characterize the property of $Ca^{2+}$ transport in plant cell, microsomes were prepared from the roots of tomato and microsomal $^{45}Ca^{2+}$ uptake was measured. When 1 mM vanadate, a selective inhibitor of P-type ATPases, 50 mM $NO_3^-$, a specific inhibitor of vacuolar $H^{+}-ATPase$, and both of these inhibitors were treated, the microsomal $^{45}Ca^{2+}$ uptakes were inhibited by 20, 33 and 47%, respectively. The inhibitory effects of these two inhibitors were investigated by using a protonophore, gramicidin. When the chemical gradient of $H^{+}$ was relieved by gramicidin, the uptake was decreased by 30%, implying the presence of $Ca^{2+}/H^+$ antiporter in the microsomal membrane. In the $^{45}Ca^{2+}$ uptake experiment, the effect of gramicidin was independent of vanadate-induced inhibition. However, when the activity of vacuolar $H^{+}-ATPase$ was inhibited by $NO_3^-$, the effect of gramicidin was severely decreased. Meanwhile, thapsigargin, a specific antagonist of ER/SR-type $Ca^{2+}-ATPase$, inhibited the microsomal $^{45}Ca^{2+}$ uptake and the maximum inhibitory effect was obtained at $10\;{\mu}M$. The effect of thapsigargin was blocked by $NO_3^-$ and gramicidin, but not by vanadate. These results imply that vanadate directly inhibits the activity of $Ca^{2+}-ATPase$; however, $NO_3^-$ and thapsigargin block the activity of $Ca^{2+}/H^+$ antiporter by inhibiting the vacuolar $H^{+}-ATPase$. In conclusion, the microsomal $^{45}Ca^{2+}$ uptakes are mediated by two major enzymes, $Ca^{2+}-ATPase$ and $Ca^{2+}/H^+$ antiporter in tomato root tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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