• Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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• 2016.05a
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• pp.193-194
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• 2016

세포사멸(apoptosis)이란 유전자에 의해 제어되는 세포의 능동적인 죽음을 의미하며 진핵세포만이 가지는 기작으로 세포자살을 일컫는 말이다. 단백질 정보 DB인 UNIPROT으로부터 진핵 생물 종의 세포사멸 단백질(apoptotic protein)을 수집하여 아미노산 서열에 대한 서열비교분석(alignment)을 진행하였다. 그 결과에 따라 다양한 종에 걸쳐 그 서열이 유사하게 유지되는 세포사멸 단백질을 중심단백질로 선정하였다. 비교단백체 분석을 통해서 생물 계통도에서 보여지는 생명종과 이들 단백질과의 연계성을 비교 분석함으로써 단순한 진핵세포에서 점진적으로 확대되는 종까지의 세포사멸 과정을 추론하였다.

• Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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• 2017.05a
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• pp.299-300
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• 2017

세포사멸(Apoptosis)은 유전자에 의해 일어나는 세포의 능동적인 죽음을 의미한다. 본 연구에서는 식물의 세포사멸과 동물의 세포사멸을 진화적 관점에서 접근함으로써 세포사멸이라는 기작을 분석하고자하였다. 먼저 인간에서는 세포사멸에 관여하는 단백질이지만 식물과 효모에서는 다른 기능을 하는 단백질 정보를 확인하였다. 확인한 단백질 정보를 바탕으로 다른 생물종과의 유전체 비교분석을 통해 해당 단백질과 세포사멸기작에 대한 정보를 확인 할 수 있었다.

• Journal of Acupuncture Research
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• v.20 no.3
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• pp.63-74
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• 2003

목적 : 한의학에서 관절염이나 진통치료에 사용되어 왔던 봉독약침액이 인간 골육종 세포주인 MG-63 세포에서 항종양효과가 있는지 연구하고자 한다. 특히 본 실험에서는 이러한 봉독의 종양발생 억제작용이 세포사멸과 관련이 있는지, 그리고 프로스타글란딘 합성 효소인 cyclooxygenase(COX)-2의 억제와 관련이 있는지를 연구하고자 한다. 방법 : 인간 골육종 세포주에서 세포사멸의 변화를 관찰하기 위해서 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium brimide(MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), DNA fragmentation assay 및 reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) 방법을 이용하였다. 결과 : 세포독성 검사에서 봉독은 MG-63 세포에서 농도-의존적으로 세포독성을 나타내었다. 이러한 봉독의 세포독성이 세포사멸로 인한 것인지를 여러 가지 형태로 검사한 결과 봉독에 의한 세포독성은 TUNEL 검사와 DAPI 염색시 세포사멸의 특징적인 소견들을 나타내었고, flow cytometric 분석에서도 세포사멸을 의미하는 세포주기의 변화들을 나타내었다. 봉독이 COX-2의 발현에 미치는 영향을 RT-PCR로 실험한 결과 봉독은 COX-2 mRNA의 발현을 선택적으로 억제하였다. 결론 : 본 실험의 결과 봉독은 COX-2 mRNA의 발현을 억제함으로써 골육종 세포에서 세포사멸을 유발하고 그 결과 항종양효과를 나타내는 것으로 보여진다.

• Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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• v.40 no.12
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• pp.1654-1661
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• 2011

We investigated the effect of Angelica keiskei ethanol (AKE) extract on cell death in MDA-MB-231 human breast cancer cells. MDA-MB-231 cells were cultured in the presence 125, 150 and 175 ${\mu}g$/mL concentrations of AKE for 24 hours. MTT assays demonstrated that mitochondrial dehydrogenase activities decreased in a dose-dependent manner in MDA-MB-231 cells (p<0.05). In contrast, the proportion of dual staining with Hoechst 33342/ethidium bromide(EtBr) for cell death increased in a dose-dependent manner in MDA-MB-231 cells (p<0.05). In particular, the levels of cell death caused by apoptotic program showed marked increases in the 150 and 175 ${\mu}g$/mL AKE groups, as revealed by flow cytometry. An apoptotic suppressor gene, Bcl-2, significantly decreased at the transcript level (p<0.05). The expression levels of proapoptotic genes, both Bax and caspase 3 significantly increased (p<0.05). Furthermore, the ratio of Bcl-2/Bax mRNA which is considered to be an important indicator of apoptosis, significantly decreased in a dose-dependent manner (p<0.05). These results taken together indicate that, the AKE extract used in this study induces cell death in MDA-MB-231 human breast cancer cells.

• Journal of Life Science
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• v.12 no.4
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• pp.452-459
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• 2002

Neutrophil apoptosis is a constitutive process that can be enhanced or delayed by various stimuli. In this study, effect of brefeldin A (BFA), which affects biological process of secretion, on constitutive and delayed apoptosis of neutrophils was investigated. Neutrophil apoptosis was determined after culturing for 20 hr in vitro by morphological changes, annexin V staining and DNA electrophoresis. BFA increased the constitutive apoptotic rate of neutrophils in dose-dependent manner. The delay of apoptosis induced by granulocyte macrophage-colony stimulating factor and lipopolysaccharide was also blocked by 10 $\mu$M of BFA. However, this effect of BFA was less marked when neutrophils were treated with dexamethasone, interleukin-8, or dibutyryl-cAMP. Moreover, the delay of neutrophil apoptosis induced by rottlerin, a specific inhibitor of protein kinase C-$\delta$ was significantly abrogated by BFA. Although BFA-induced apoptosis was not blocked by the caspase-3 inhibitor, zDEVD-fmk, expression levels of myeloid cell leukemia-1 (Mcl-1) were down-regulated by BFA. These results suggest that derangement of vesicular protein transport may be involved in the apoptosis of neutrophils, and that the action of BFA on apoptosis is dependent on changes in the expression of Mcl-1.

• The Journal of the Acoustical Society of Korea
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• v.36 no.3
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• pp.172-178
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• 2017

Ultrasound has been widely used for biological and medical applications including induction of cell death, but a precise mechanism of induced cell death by ultrasound is controversial. In this study, an irradiation system with 40 kHz ultrasound was developed for a suitable cell death test of a representative unicellular organism, yeast, and used to study the biological effect of ultrasound on inducing cell death. Potassium Iodide (KI) dosimetry was used to devise an optimal system that successfully delivers 40 kHz ultrasound and produces reactive oxygen species in a 1.5 ml Eppendorf tube. Cell death was observed in an ultrasound transmission time-dependent fashion in this system. Thermal effect during irradiation was not observable in ultrasound induced cell death. Co-treatment of 40 kHz ultrasound and hydrogen peroxide showed a synergistic effect in inducing cell death. This finding suggests that 40 kHz ultrasound is related to reactive oxygen species formation. However, NAC (N-acetyl-L-cysteine) oxygen scavenger slightly inhibited the cell death by 40 kHz ultrasound. It was also found that 40 kHz ultrasound induced cell death was slightly inhibited by inhibitors of necrosis or apoptosis (glycyrrhizin or zVAD-fmk). This study suggests that cell death induced by 40 kHz ultrasound may not be exclusively related to reactive oxygen species formation and thermal effects in irradiated yeast cells.

• Journal of Acupuncture Research
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• v.20 no.2
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• pp.173-183
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• 2003

이 논문(論文)은 활성 산소(ROS)의 작용(作用)을 규명하고 호도약침액(胡桃藥鍼液)이 인간의 신경교종 세포인 A172에서 화학적(化學的) 저산소증(低酸素症)으로 유발된 세포 사멸에 대해 효능이 있는지를 연구(硏究)한 것이다. 화학적(化學的) 저산소증(低酸素症)은 세포내 미토콘드리아의 전자 수송을 방해하는 antimycin A를 가진 배양세포에 의해 유발(誘發)하였다. 화학적(化學的) 저산소증(低酸素症)에 노출된 세포(細胞)는 시간과 그 양에 따라서 세포 사멸의 결과(結果)가 다르게 나타난다. 화학적 저산소증에 의해서 ROS의 생산이 증가하는데 이것은 $H_2O_2$ 소거(消去) Catalase(과산화수소를 물과 산소로 분해하는 효소)에 의해 방지(防止)된다. Catalase는 화학적 저산소증에 의해 유발(誘發)된 세포 사멸을 방지하는데 비해 DMTU는 효과적이지 않다. 지질(脂質)에 녹는 산화방지제 DPPD와 물에 녹는 산화방지제 Trolox는 세포사멸을 방지하는데 효과(效果)가 없다. 호도약침액(胡桃藥鍼液)은 그 양(量)에 의존적으로 저산소증에 의해 유발된 세포 사멸을 방지하는 효과가 있다. 즉 화학적 저산소증으로 유도된 ROS의 발생을 막고, $H_2O_2$로 유도된 세포사멸을 방지하는데 이것은 화학적 저산소증과 $H_2O_2$의해 유도된 세포사멸에 대해 호도약침액(胡桃藥鍼液)이 방지효과(防止效果)가 있다는 것을 의미한다. 이러한 결과(結果)들은 $H_2O_2$가 지질 과산화와는 무관한 메카니즘으로 저산소증(低酸素症)으로 유발(誘發)된 세포사멸을 중재하고, 따라서 호도약침액(胡桃藥鍼液)은 지질막의 과산화를 방지하기 보다는 ROS를 직접적으로 소거(消去)함으로써 방지 효과가 있다는 것을 의미한다. 더구나 화학적(化學的) 저산소증(低酸素症)은 caspase와 무관한 메카니즘으로 apoptosis를 유발(誘發)한다.

• The Journal of Internal Korean Medicine
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• v.25 no.3
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• pp.451-460
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• 2004

Objective : 황금의 유방암세포주에 대한 항암효과 및 기전에 대한 연구는 아직 미흡하며, 특히 에스트로젠리셉터를 가지지않은 유방암세포주인 MDA-MB-231에 대한 효과 및 기전에 대한 연구는 아직 발표된바 없어, 이에 대한 연구가 진행되었다. Methods : 인간 유방암세포주 MDA-MB-231 MTT assay를 이용 성장방해비율을 조사하였으며. FACS analysis를 이용 cell cycle analysis를 시행하였고, Western Blot Analysis 및 Annexin V analysis를 시행하였다. Results : MDA-MB-231에 대한 황금의 IC50는 180 ug/ml 이었으며 최대 세포성장억제효과는 $500{\mu}g/ml$로 한약재중 비교적 강한 세포독성을 보여 주었다. 유세포분석 에서 황금 $500{\mu}g/ml$의 농도를 72시간 투여한 경우 세포사멸(Sub Gl) 분율이 대조군의 1.7%에 비해 21%로 높아 현저한 용량의존적인 세포사멸현상을 보여주었으며, 세포사멸을 보다 명확히 규명할 수 있는 Annexin V analysis에서도 황금 $200{\mu}g/ml$농도일때 48시간에서 17%의 뚜렷한 세포사멸효과를 나타내었다. 한편 세포사멸촉진인자인 Bax, 세포사멸실행단백질인자인 caspase 3의 활성과 PARP의 분할은 세포사멸이 세포주기정지와 더불어 세포사멸의 과정에 p53이 관여함을 알 수 있다. 앞으로의 연구는 p53발현이 다른 세포주와 각 단백질의 억제제를 통해 인과적인 관련성을 즘 더 명확히 할 필요가 있어야 할 것으로 생각되어진다. Conclusion : 유방암의 예후에 있어 호르몬치료에 부적절함으로 인해 예후가 나쁜 에스트로젠리셉터 발현이 없는 유방암에 대해서도 황금이 탁월한 항암효과를 보여주고 있으며, 임상적으로 황금단독, 다른 항암약재와의 배합, 그리고 기존의 항암화학요법이나 방사선요법과의 병용투여를 통한 초기 및 진행된 유방암의 치료에 대한 새로운 접근의 실마리를 제공할 것으로 생각된다.

• Development and Reproduction
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• v.15 no.2
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• pp.113-120
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• 2011

BCL-2 family essential proteins to play a pivotal role to perform in apoptosis signaling pathways and essential proteins for the regulation of cell death. BCL2L10 protein is a member of BCL-2 family and it regulates both anti-apoptotic and pro-apoptotic function of specific tissue or cell line. BCL2L10 of function and expression is not reported in ovary cell lines. In this study we reported that BCL2L10 were significant expression of KGN cell line. Ectopic expression of BCL2L10 induced cell death, and its cells killing effect was blocked by pan-caspase inhibitor of the Z-VAD-fmk. Ectopic expression of BCL2L10 protein led to the activation of caspase 9 and caspase 3, suggesting apoptotic cell death, and confocal microscopic analyses showed that BCL2L10 was partially localized in mitochondria. Thus, we provide a novel function of BCL2L10 in KGN cells, which was involved in the intrinsic cell death pathway.

• Journal of Life Science
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• v.24 no.12
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• pp.1378-1382
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• 2014

Phospholipase D (PLD) catalyzes the hydrolysis of phospholipid to phosphatidic acid (PA), a lipid secondary messenger. Two forms of PLD isozymes, phosphatidylcholine-specific PLD1 and PLD2, have been identified. PLD has emerged as a critical regulator of cell proliferation and survival signaling, and dysregulation of PLD occurs in a various illnesses, including cancer. PLD activity is essential for cell survival and protection from apoptosis. Overexpression of PLD isozymes or PLD-generated PA attenuates the expression of apoptotic genes and confers resistance to apoptosis. The apoptosis-related molecular mechanisms of PLD remain largely unknown. Recently, the dynamics of PLD turnover during apoptosis have been reported. The cleavage of PLD isozymes as specific substrates of caspase differentially regulates apoptosis. PLD1 is cleaved at one internal site, and PLD2 is cleaved two sites at the front of the N-terminus. The cleavage of PLD1 reduces its enzymatic activity, probably via the dissociation of two catalytic motifs, whereas the cleavage of PLD2 does not affect the catalytic motifs and its activity. Thus, PLD2 maintains antiapoptotic capacity, despite its cleavage. Therefore, the differential cleavage pattern of PLD isozymes by caspase affects its enzymatic activity and antiapoptotic function. Thus, PLD is considered a potential target for cancer therapy. We summarize recent studies regarding the functional role of PLD in apoptosis.