A filamentous fungus, strain FM04 producing amylase was isolated from rotten yam peels and potatoes. The favorable conditions of cultivation factors such as, temperature, pH, and agitation speed of strain FM04 were 28∼30$^{\circ}C$, 5.0∼6.0, and 100 rpm, respectively. Starch was the best carbon source in the amylase production. Therefore, food wastes containing lots of starch were employed as the carbon source of the cultivation for the economical amylase production. 5.2 U/ml of amylase was obtained In the cultivation using 1 % (w/v) of food wastes. The amylase showed the highest activity at enzyme reaction conditions of 60$^{\circ}C$ and pH 4.5 and showed 90% of residual activity after the reaction at 50$^{\circ}C$ for 2 days. In the enzymatic hydrolysis reaction using 20% (w/v) of food wastes and 2.5 U/ml of amylase, 72.6 g/l of reducing sugar was obtained at the reaction condition of 50$^{\circ}C$, pH 4.5 for 2 days.
This study was carried out to obtain the basic data on artificial culture of Lampteromyces japonicus. Favorable media for mycerial growth were glucose peptone medium, malt yeast extract, yeast malt peptone, potato dextrose medium. The optimum conditions for the mycelial growth were $30^{\circ}C$ and pH 6.0. Dextrose as a carbon source was favorable to mycelial growth. The optimal dextrose concentration was 1.2%. As nitrogen sources, yeast extract, $(NH_4)_2HPO_4$ and 0.2% for glutamine. The mineral salts of $Al_2(SO_4)_3{\cdot}14H_2O$ were effective and the optimal concentration was 0.1 M.
Among the eight strains, Pleurotus sajor-caju JAFM 1017 was selected as most potent producer of cellulolytic enzymes. The avicelase and CMCase activity reached maximum levels after 10 days, and ${\beta}-glucosidase$ activity reached a maximum level after 19 days. Among the various carbon sources, cellulose powder was most effective for the production of avicelase and ${\beta}-glucosidase$, and Na-CMC (sodium carboxymethyl cellulose) was good for the production of CMCase. The optimum concentration of cellulose powder was 1.0% (w/v), and glucose (1.0%) completely depressed the production of enzymes. Nitrates were effective for the production of enzymes, but nitrites did not support growth. The production of cellulolytic enzymes increased as the concentration of urea increased. The appropriate concentration of urea was 0.054% (w/v).
Cellulolytic mocrooganisms were isolated from the cellulose-cultural properties. Among them, Aspergillus clavatus with the highest cellulase activity was identified by the morphological characteristics and it's enzyme activities were compared on the various cultural conditions. It was found that the induction of carboxymethylcellulase(CMCase), avicelase and salicinase in CMC liquid media showed the highest enzyme acitivity on five day's cultivation at $30^{\circ}C$ and thereafter their activities were gradually decreased with time. After crude extracellular enzymes precipitated with the 70% saturated ammonium sulfate solution were dialyzed with 20 mM acetate buffer pH 6.0, each crude enzyme was examined. The optimal activities of CMCase and avicelase were both found to be at $50^{\circ}C$ and pH 6.0. Their thermal stability was appeared at the $50^{\circ}C$. CMCase and avicelase had the maxima activities with 1.5% and 2.2% substrate concentration, respectively. The concentration of 5 mM $Mg^{++}$ or $Ca^{++}$ was found to have a maximum cellulase activity and its activity was inhibited with more than 5 mM $Cu^{++}$ and $Zn^{++}$ concentration. Cellulase activity was also inhibited sensitively by the inhibitors such as 2-mercaptoethanol, iodine and sodium azide.
Park, Yong-Woo;Lim, Sun-Teak;Kang, Kyu-Young;Yun, Han-Dae
Applied Biological Chemistry
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v.38
no.4
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pp.313-319
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1995
The involvement of the cell-wall degrading enzymes in Rhizobium has long been an unsolved question about the infection process in the formation of root nodule. To assess the contribution of the cellulase to the nodulation of rhzobia, here we report the production of cellulase from R. meliloti TAL1372 which degrade carboxymethylcellulose (CMC) model substrate with CMC-plate method. We constructed a genomic library by cloning Sau3A-digested genomic DNA from R. meliloti TAL1372 into the BamHI site of the cosmid vector pLAFR3. Out of more than one thousand transductants of E. coli, one clone (pRC8-71) had CM-cellulase activity and contained pLAFR3 cosmid with 30 kb insert of R. meliloti DNA The product of CM-cellulase gene was analyzed by native PAGE. About 45 kD protein was considered to be a product of the gene. Tn5 mutagenesis reveals that the structural gene located in a ca. 3 kb KpnI fragment. The cellulase-minus mutants of R. meliloti TAL1372 were obtained by Tn5 mutagenesis of pRC8-71 and marker exchange techniques. Analyses of the nodulation ability of these Tn5 mutants showed that the CM-cellulase gene of R. meliloti TAL1372 may be involved in early nodulation development on alfalfa (Medicago satiua).
This study was conducted to find out the behavior of anaerobic microorganisms and anaerobic decomposition products of rice straw in the strict anaerobic condition. The number of methanogenic bacteria were more isolated than cellulolytic bacteria from the digester decaying rice straw during the entire incubation time. The activity of anaerobic microorganisms, such as methanogens and cellulolytics, were high the early incubation time in the treatment of rice straw with urea, but without urea was low at that time and increased moderately after 10 days incubation. Volatile fatty acid as intermediate anaerobic decomposition products had a longer retention time and higher accumulation rate in the treatment of rice straw without urea than with urea, and predominant fatty acid was propionic acid. Gas generation rate as final products were very intimate relationship with the activity of methanogenic bacteria. Average Eh value was -250mV during the incubation time and $CH_4$ : $CO_2$ percent ratio was about 60~65 : 35~40 in this Eh value. Decomposition rate of rice straw calculated from $CH_4$ and $CO_2$ gas wars 45.6% for 50 days in the treatment of rice straw with urea, and 36.8% without urea.
Talaromyces luteus 2004, a thermophilic mutant of T. luteus 6112 was obtained by mutagenesis with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine. T. luteus 2004 produced thermophilic carboxymethylcellulase (CMCase), and other polysaccharide enzymes: avicellase, xylanase, and ${\beta}-glucosidase$. Induction of CMCase production was shown at the highest level in 3% carboxymethylcellulose (CMC) minimal broth, indicating that CMC could work as an inducer. However, glucose and D-cellobiose showed catabolite repression for CMCase production which was under the control of CMC utilization. Optimal conditions for CMCase activity were at $70^{\circ}C$ and pH 4.0, suggesting that CMCase of T. luteus 2004 was a thermophilic enzyme.
Lee, Chan-Jung;Lee, Jong-Tae;Kim, Yeong-Tae;Jhune, Chang-Sung;Cheong, Jong-Chun;Park, Wan
Research in Plant Disease
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v.18
no.3
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pp.240-244
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2012
Burkholderia gladioli pv. alliicola CH1 showed typical soft rot symptoms at higher than $20^{\circ}C$ but very weak soft rot symptoms at temperature under $10^{\circ}C$. Among the nine agro-chemicals, oxolinic acid WP, streptomycin + copper hydroxide WP and streptomycin WP were found to be effective for the inhibition of the pathogen in vitro. The results of scanning electron microscopic investigation showed that onion bulbs was macerated by infection of B. gladioli pv. alliicola CH1. B. gladioli pv. alliicola CH1 was able to produce polygalacturonase but did not produce pectin lyase and carboxymethylcellulase. In analysis of the polygalacturonase activity of the isolated pectin-degradation enzymes from B. gladioli pv. alliicola CH1 total protein, three activity bands 45 kDa, 35 kDa, and 29 kDa were detected by the direct (or in-gel) activity staining on SDS-PAGE.
A bacterium having CMCase activity was isolated form soil and identifed as a Pseudomonas sp YD-15. The optimum conditions for the production of CMCase were avicel 1.2%, yeast extract 0.5%, $KNO_3$ 0.06%, $K_2HPO_4$ 0.2%, $MgSO_4$$7H_2O$ 0.15%, pH 8.0, $30^{\circ}C$ and 60 hours cultivation. The CMCase was purified 15.2 folds with 14ft yield through ammonium sulfate precipitation, DEAE-sepharose column chromatography and sephadex G-100 gel filtration chromatography. The optimum pH and temperature for the enzyme activity were 6.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable between pH 5.0 and 8.0, below $50^{\circ}C$. The molecular weight was calculated about 100,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. $K_m$ value for CMC used as a substrate was 40 mg/ml.
An alkalophilic bacterium, the strain AC-711 as a potent producer of alkaline cellulase, was selected among many isolates from soil environments. Morphological, physiological and chemical characteristics of the strain AC-711 suggested that it belongs to the genus Pseudomonas according to the Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, however the G+C mol% (54.43) of its chromosomal DNA is lower than the normal values of the genus. The major cell wall fatty acids were determined as 15:0 and 17:0 anteiso. The production of alkaline CMCase by the strain was maximal when grown on the mediun containing 1% carboxymethyl cellulose, 0.1% $KH_2PO_4$, 0.02% $CoCl_2$, 0.02% Tween 80, 0.5% $Na_2CO_3$, 0.8% yeast extract, pH 10.3 at $30^{\circ}C$ for 3 days, and the most of enzyme was excreted into culture mediun.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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