The circadian clock is a self-sustaining 24-hour timekeeper that allows organisms to anticipate daily-changing environmental time cues. Circadian clock genes are regulated by a transcriptional-translational feedback loop. In Arabidopsis, LATE ELONGATED HYPOCOTYL (LHY) and CIRCADIAN CLOCK-ASSOCIATED 1 (CCA1) transcripts are highly expressed in the morning. Translated LHY and CCA1 proteins repress the expression of the TIMING OF CAB EXPRESSION 1 (TOC1) transcripts, which peaks in the evening. The TOC1 protein elevates the expression of the LHY and CCA1 transcripts, forming a negative feedback loop that is believed to constitute the oscillatory mechanism of the clock. In mammals, the transcription factor protein CLOCK, which is a central component of the circadian clock, was reported to have an intrinsic histone acetyltransferase (HAT) activity, suggesting that histone acetylation is important for core clock mechanisms. However, little is known about the components necessary for the histone acetylation of the Arabidopsis clock-related genes. Here, I report that DET1 (De-Etiolated1) functions as a negative regulator of a key component of the Arabidopsis circadian clock gene LHY in constant dark phases (DD) and is required for the down-regulation of LHY expression through the acetylation of histone 3 (H3Ac). However, the HATs directly responsible for the acetylation of H3 within LHY chromatin need to be identified, and a link connecting the HATs and DET1 protein is still absent.
Sulforaphane (SFN) is an isothiocyanate, isolated from glucoraphanin in broccoli and other cruciferaous vegetables. Recent studies have revealed that SFN induces anti-proliferation and apoptosis by cell cycle arrest in various cancer cells. In this study, we investigated the effect of SFN induced apoptosis in chondrosarcoma HTB-94 cells. SFN caused suppression of proliferation and apoptosis in a dose-dependent manner as determined by cell phenotype, MTT assay and FACS analysis in HTB-94 cells. Treatment of SFN led to caspase-3 activation and p53 accumulation as determined by Western blot analysis. Also, SFN significantly induced DNA fragmentation and nuclear degradation though activation of caspase-3, as detected by DNA electrophoresis and immunostaining, respectively. Our results indicate that SFN-induced apoptosis was regulated by p53 and caspase-3 dependent pathways. Furthermore, SFN may act as a potent anti-proliferation agent, and as a promising candidate for molecular-targeting chemotherapy against human chondrosarcoma cells.
Park, Byung-Ju;Oh, Hae-Ri;Kang, Ho-Young;Jang, Kyung-Lib
Journal of Life Science
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v.21
no.6
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pp.819-828
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2011
To inspect norovirus contamination of groundwater in south eastern areas of Korea, a systematic survey of groundwater in Busan, Ulsan, and Gyeongsangnam-do was performed for two years from 2009 to 2010. For this purpose, we first optimized the nested reverse transcription-PCR condition by designing two sets of primers for the detection of norovirus genogroups, GI and GII. Of 145 samples, 21 (25.9%) and 15 (23.4%) were norovirus positive in the dry season (April to June) and wet season (July to August), respectively. The detection frequencies of norovirus in Busan, Ulsan, and Gyeongsangnam-do were 15%, 7%, and 32%, respectively, reflecting a geographical difference in their distribution. The GI and GII isolates were 5 and 31, respectively, indicating the prevalence of GII in the tested areas. According to phylogenetic analysis of their nucleotide sequences, all of the GI isolates were identified to genotype GI.5 whilst the GII isolates were divided into two genotypes, GII.3 and GII.4. Neither physical-chemical parameters such as pH, temperature, oxidation-reduction potential, and dissolved oxygen, nor microbial indicators of water quality such as total bacteria, total coliforms, and Escherichia coli were statistically correlated with contamination of norovirus in the groundwater. Interestingly, however, the presence of norovirus was closely correlated with low turbidity (<0.50 NTU). The present study suggests that periodical monitoring of norovirus in groundwater is necessary to prevent epidemic waterborne diseases and to secure better sanitary conditions for public health.
In this paper, to elucidate the further mechanisms of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG)-induced growth arrest, we investigated the effect of MNNG on cell cycle and proliferation in U937 cells, a p53-null human myeloid leukemia cell line. It was found that MNNG causes an arrest at the G2/M phase of the cell cycle and induces apoptosis, which is closely correlated to inhibition of cyclin B1 and cyelin-dependent kinase (Cdk) 2-associated kinase activities. MNNG treatment in. creased protein and mRNA levels of the Cdk inhibitor p21(WAF1/CIP1), and activated the reporter construct of a p21 promoter. By using p21 promoter deletion constructs, the MNNG-responsive element was mapped to a region between 113 and 61 relative to the transcription start site. These data indicate that in U937 cells MNNG can circumvent the loss of wild-type p53 function and induce critical downstream regulatory events leading to transcriptional activation of p21. Present results indicate that the p53-independent up-regulation of p21 by MNNG is likely responsible for the inhibition of cyclin/Cdk complex kinase activity rather than the down-regulation of cyclins and Cdks expression. These novel phenomena have not been previously described and provide important new insights into the possible biological effects of MNNG.
Kim, Dae-Jung;Kim, Yi-Cheong;Son, Maeng-Hyun;Lee, Jung-Uie;Son, Sang-Gyu;Han, Chang-Hee
Journal of Life Science
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v.19
no.12
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pp.1851-1854
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2009
This study correlated changes in the plasma levels of estradiol-$17{\beta}$ (E2) with changes in the gonadosomatic index (GSI) and ovarian development during the annual reproductive cycle of the pike eel Muraenesox cinereus, collected at the Tongyung coast region. Ovarian maturity was classified based on histological observations; the perinucleolus stage (November to February), the oil droplet stage (March to April), the early vitellogenic stage (April to May) and the late vitellogenic stage (June to October). Seasonal changes in the GSI were correlated with water temperature and reflected the degree of ovarian maturity. Plasma E2 levels were correlated with changes in the GSI, which increased from April to a peak in July, and the levels remained comparatively high until October. These data indicated that changes in the GSI and plasma E2 levels are correlated with the annual ovarian activity of the pike eel. In this study, however, female pike eels were not collected during the spawning stage. Therefore, spawning of this species seemed to be closely related to its migration toward the deep sea of offshore.
Sulforaphane, an isothiocyanate derived from hydrolysis of glucoraphanin in broccoli and other cruciferous vegetables, was shown to induce phase II detoxification enzymes and inhibit chemically induced mammary tumors in rodents. Recently, sulforaphane is known to induce cell cycle arrest and apoptosis in human cancer cells, however its molecular mechanisms are poorly understood. In the present study, we demonstrated that sulforaphane acted to inhibit proliferation and induce morphological changes of human cervical carcinoma HeLa cells. Treatment of HeLa cells with $10{\mu}M\;or\;15{\mu}M$ sulforaphane resulted in significant G2/M cell cycle arrest as determined by flow cytometry. Moreover, $20{\mu}M$ sulforaphane significantly induced the population of sub-G1 cells (9.83 fold of control). This anti-proliferative effect of sulforaphane was accompanied by a marked inhibition of cyclin A and cyclin-dependent kinase (Cdk)4 protein and concomitant induction of Cdc2, Cdk inhibitor p16 and p21. However, sulforaphane did not affect the levels of cyelooxygenases and telomere-regulatory gene products. Although further studies are needed, the present work suggests that sulforaphane may be a potential chemoprevetive/ chemotherapeutic agent for the treatment of human cancer cells.
This study focuses on investigating roles of microorganisms in decontamination of reed rhizosphere in Sunchon Bay, Korea, which is considered one of the marsh and mud environment severely affected by human activities such as agriculture and fisheries. In general, the bay is known to play the role of the buffering zone to reduce the sudden impact or change by environmental stresses. In our initial efforts to elucidate the microbial functions in decontamination process in reed rhizosphere, pure bacteria capable of degrading aromatic hydrocarbons were isolated from reed (Phragmites communis) rhizosphere of Sunchon bay by enrichment culture using either benzene, toluene, ethylbenzene, or xylene (BTEX) as a sole source of carbon and energy. Measurement of the rates of BTEX degradation and cell growth during the incubation in BTEX media under several temperature conditions demonstrated maximized degradation of BTEX at $37^{\circ}C$ in both strains. Both strains were also resistant to all the heavy metals and antibiotics tested in this study, as well as they grew well at $42^{\circ}C$. Identification of the isolates based on 16S rRNA gene sequences, and a variety of phenotypic and morphologic properties revealed that the two strains capable of BTEX catabolism were among Microbacterium sp., and Rhodococcus sp. with over $95{\%}$ confidence, designated Microbacterium sp. EMB-1 and Rhodococcus sp. EMB-2, respectively This result suggested that in the rhizosphere of reed, one of major salt marsh plants they might play an important roles in decontamination process of reed rhizosphere contaminated with petroleum such as BTEX.
The effect of various water-activity depressors, such as pol yo Is, sugars, and polymers, on the conversion yields of the enzymatic synthesis of maltosyl-$\beta$-cyclodextrin from $\beta$-cyc1odextrin and maltose through reverse reaction of pullulanase was investigated. PEG 6000 of concentration of 10% (w/w) was found to be the most acceptable water-activity depressor resulting for increment of conversion yield from 43.0% to 55.9%, corresponding maltosyl-$\beta$-cyc1odextrin concentration of 3.02 g/100 ml H20. Water activity was changed from initial 0.966 to 0.914 upon addition of 20% (w/w) of PEG 6000. The conversion yields were inversely proportional to the water activities, and the increased conversion yield was caused by water activity depression which inhibited the hydrolysis reaction of maltosyl-$\beta$-CD to maltose and $\beta$-cyc1odextrin. The changes of enthalpy ($\Delta$H), entropy ($\Delta$S), and Gibbs free energy ($\Delta$G) were calculated to be 36.788 kJ/mole, 0.067 kJ/mole K. and 14.433 kJ/mole, respectively. The synthesis of maltosyl-$\beta$-CD could be increased substantially by the intermittent feeding of $\beta$-cyclodextrin. PEG 6000 could be separated effectively from reaction mixture using ultrafiltration membrane for reutilization.
Cancers are the largest cause of mortality and morbidity all over the world. Cordycepin, an adenosine analog, is a major functional component of the Cordyceps species, which has been widely used in traditional Oriental medicine. Over the last decade, this compound has been reported to possess many pharmacological properties, such as an ability to enhance immune function, as well as anti-inflammatory, antioxidant and anti-cancer effects. Recently, numerous studies have reported interesting properties of cordycepin as a chemopreventive agent as well. There is an accumulating body of experimental evidences suggesting that cordycepin impedes cancer progression by promoting apoptosis, inducing cell cycle arrest, modulating intracellular signaling pathways, and inhibiting invasion and metastasis of cancer cells. In many cancer cell lines, cordycepin inhibits growth and cell cycle progression by inducing arrest of the G2/M phase, resulting from the inhibition of retinoblastoma protein phosphorylation and induction of cyclin-dependent kinase inhibitors. To induce apoptosis, cordycepin activates the extrinsic and intrinsic pathways, which promotes reactive oxygen species generation and the downstream activation of kinase cascades. Cordycepin also can activate alternative pathways to cell death such autophagy. In addition, cordycepin can inhibit the pro-metastatic processes of cancer cell detachment, migration, and invasion through a variety of mechanisms, including the nuclear factor-kappa B and activated protein-1 signaling pathways. In this review, we summarized the variety of action mechanisms by which cordycepin may mediate chemopreventive effects on cancer and discussed the potential of this natural product as a promising therapeutic inhibitor of cancer development.
Lee, Hye Hyeon;Hwang, Won Deok;Jeong, Jin-Woo;Park, Cheol;Han, Min Ho;Hong, Su Hyun;Jeong, Yong Kee;Choi, Yung Hyun
Journal of Life Science
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v.24
no.1
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pp.92-97
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2014
Cordycepin, an active component originally isolated from the traditional medicine Cordyceps militaris, is a derivative of the nucleoside adenosine, which has been shown to possess a number of pharmacological properties, including antioxidant and anti-inflammatory activities, immunological stimulation, and antitumor effects. This study was conducted on cultured human prostate carcinoma LNCap cells to elucidate the possible mechanisms by which cordycepin exerts its anticancer activity, which, until now, has remained poorly understood. Cordycepin treatment of LNCap cells resulted in dose-dependent inhibition of cell growth and the induction of apoptotic cell death as detected by an MTT assay, cleavage of poly ADP-ribose polymerase, and annexin V-FITC staining. Flow cytometric analysis revealed that cordycepin resulted in G2/M arrest in cell cycle progression and downregulation of cyclin B1 and cyclin A expression in a concentration-dependent manner. Moreover, the incubation of cells with cordycepin caused a striking induction in the expression of the cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitor p21Waf1/Cip1 without affecting the expression of the tumor suppressor p53. It also resulted in a significant increase in the binding of CDK2 and CDC2 to p21. These findings suggest that cordycepin-induced G2/M arrest and apoptosis in human prostate carcinoma cells is mediated through p53-independent upregulation of the CDK inhibitor p21.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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