Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.64-64
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2003
대구 인공종묘 생산 기술 개발의 일환으로 수정란에 기생하여 폐사를 유발하는 세균 및 세균 감염 경로를 파악함으로써 수정란의 생존율과 부화율 향상을 위하여 본 실험을 실시하였다. 세균 감염 경로를 파악하기 위하여 난소와 정소 자체 세균 감염 여부를 조사하였다. 일반배지 (BHIA)와 비브리오 선택배지 (TCBS)를 사용하여 세균검사를 실시하였다. 난소의 세균 검사는 생식소 내부를 일부 절개한 후 멸균 roop를 찔러 세균을 검사하였고, 정소는 채정하기 전 복부를 절개하여 멸균 roop로서 적출하여 배지에 도말한 후 배양하였다. 수정란 내 세균 수는 수정란을 각각 20개씩 샘플하여 난 외부에 기생하는 세균을 제거하기 위하여 난소독제로 이용되고 있는 benzalkonium 0.1%로 1분간 소독한 후 멸균 생리식염수로 3회 세척하여 호모게나이즈하여 검사하였다. 호모게나이즈한 액 중 100${\mu}\ell$를 pipetting하여 일반배지(BHIA)에 도말하여 인큐베이터에서 배양하였다. 난소와 정소 내에서 세균이 검출됨에 따라 수정 시 세균 감염을 억제하기 위하여 자외선 살균해수와 일반해수를 수정액으로 사용하여 발생율을 비교 시험하였다. 수정 시간은 1분으로 동일하게 적용하였으며, 수정 용기는 멸균 처리된 일회용 100$m\ell$ 플라스틱 용기를 사용하였다. 수정 후 과다한 정자를 제거하기 위한 세란은 1$\ell$ 멸균 비이커에서 5회 30분 가량 실시하여 정자를 제거하였고 멸균 봉으로 저어주면서 수정란의 점착력을 제거하였다. 수정란은 100$\mu\textrm{m}$ 그물망으로 수정란 유실을 방지한 플라스틱 용기에 수용하여 유효수량 270$\ell$ FRP 수조에 수용하여 3$\ell$/min 환수하였고, 수온은 자연수온 1$^{\circ}C$로 유지하였다. 발생율은 만능투영기로 3회 측정하였다. 수정 후 세균과 기생충에 의한 수정란의 폐사를 억제하기 위하여 수정 직후, 수정 후 1일, 2일째 oxytetracycline과 iodine 처리에 따른 발생율 변화를 조사하였다. 발생율은 만능투영기로 조사하였고, 시험구별로 3회 측정하였다. 경과 일수별로 약제 처리는 약제 미처리 수정란 중 정상적인 발생이 이루어지고 있는 것을 선별하여 조사하였다. 약제 처리에 따른 배체 발생 단계는 수정 후 1일째는 상실기, 2일째는 포배기였다. 수정란 및 대구 자어에서 분리된 V. splendidus 에 의한 폐사를 예방하기 위해 in vivo에서 oxytetracycline 외 5종의 항생제를 대상으로 96well plate에서 최고 농도 250ppm부터 2 fold로 단계 희석하여 $25^{\circ}C$에서 48시간 배양하여 MIC를 조사하였다. 세균 감염경로 파악을 위하여 난소, 정소 및 정자에서 세균을 분리한 결과 일반배지 및 비브리오 선택배지에서 모두 균이 검출되었고, 균 동정 결과 터봇 자어에서 검출된 것으로 보고된(Gatesoupe et al., 1999) V. splendidus로 나타났다. 수정액과 정자 및 미수정란의 세균 분리 결과 일반배지에서 3$\times$10/ml ~ 7$\times$10/ml로 균이 검출되었다. 수정액을 일반해수와 자외선 살균 해수를 사용하여 발생율을 비교한 결과 수정 후 3일째 발생율은 자외선 살균해수 72.3%, 일반해수 52.7%였으며, 수정 후 7일째 40.9%와 25.1%로 자외선 살균해수가 유의적으로 높게 나타났다. 수정 후 경과 일수별로 oxytetracycline과 Iodine을 처리한 결과 수정 직후 처리한 시험구는 7일째 19.8%와 18.9%로 대조구 23.1%와 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났다. 수정 후 1일째 처리한 시험구는 54.5%와 56.8%, 수정후 2일째 처리구는 47.9%와 50.6%로 두 시험구 모두 대조구와 수정 직후 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다. 수정란 및 대구 자어에서 분리된 V. splendidus 에 의한 폐사를 예방하기 위해 in vivo에서 항생제 종류별 MIC 조사 결과 oxytetracycline이 0.48ppm으로 가장 효과가 높은 것으로 나타났다.
Lee, Su-Jung;Youn, I Na;Kim, Jin-Do;Lee, Jung Sick;Kim, Eunheui
Journal of fish pathology
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v.27
no.1
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pp.17-24
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2014
To study the possible use of probiotics in fish farming, The in vitro and in vivo antibacterial effects of Pseudomonas aeruginosa MB I-3 (MB I-3) against the fish pathogenic bacterium Listonella anguillarum were evaluated. The inhibitory effects of MB I-3 against vibrios were investigated by the double layer method and the co-culture. The results showed that MB I-3 inhibited the growth of pathogenic vibrios including Listonella anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio cholerae, Vibrio fluvialis, Vibrio furnissii, Vibrio harveyi, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus. Extracellular substances obtained from the cultural supernatant of MB I-3 by ethyl acetate extraction showed inhibitory effects on L. anguillarum. The antibacterial substance of MB I-3 was evaluated to destroy the cell membrane of L. anguillarum in electron micrographs. The probiotic effects of MB I-3 was tested by exposing olive flounder (Paralichthys olivaceus) fry to L. anguillarum with or without MB I-3. The cumulative mortality of olive flounder fry infected with L. anguillarum was 24% in the group with MB I-3, while it was 46% in the control group without MB I-3. These results indicate that MB I-3 has potential applications as a probiotic for the control of fish pathogenic vibrios in fish rearing system.
Ha, ea-Man;Jeon, Doo-Young;Im, Hyun-Chul;Yoon, Yeon-Hee;Shin, Mi-Yeong;Yoon, Ki-Bok;Kim, Jung-Beom
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.32
no.2
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pp.163-169
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2017
The purpose of this study was to estimate the antimicrobial activity of Maesil (Japanese apricot, Prunus mume) extract against Vibrio vulnificus. The strains tested in the study were 28 V. vulnificus isolates originated from fish, seawater, mud flat and seawater in fish restaurant. The vvhA gene was detected using real-time PCR and biochemical identification expressed above good identification in 28 isolates of V. vulnificus. All of V. vulnificus used in this study was susceptible to tetracycline and chloramphenicol antibiotics. These two antibiotics were considered to be useful for the treatment of patients. Maesil extracts 2.5% and 5% showed antimicrobial activity against V. cholerae NCCP 13589 and V. parahemolyticus NCCP 11143. V. vulnificus isolate and V. vulnificus NCCP 11135 showed growth inhibition at 1.25%, 2.5% and 5% of Maesil extract, respectively. Compared with V. cholerae and V. parahemolyticus, the antibacterial activity of Maesil extract against V. vulnificus was high. The minimum bactericidal concentration of Maesil extract for V. vulnificus was 1.6%. These results revealed that Maesil extract was found to be very useful for inhibiting the growth of V. vulnificus and can be expected to prevent food poisoning caused by V. vulnificus.
Kim, Ha-Kyu;Lee, Hak-Tae;Kim, Jong-Ho;Lee, Sang-Sun
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.23
no.4
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pp.285-290
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2008
This study was carried out to examine microbiological contamination of ready-to-eat foods (kimbab, sushi, salad, sandwich, sashimi) and to prove hazard of ready-to-eat foods by microbiological analysis. Collection of 440 samples of ready- to-eat foods were obtained from department stores, discount stores, super-markets in Seoul, Gyeonggi, Chungcheong, Gyeongsang, Honam areas. Sushi showed the highest detection rate of micro organism with value of20.4%, and then detection rates of kimbab, sashimi and salad were 13.0%, 12.5% and 6.9%, respectively. S. aureus was the most detected microorganism with value of 6.6%, and then Coliform and L. monocytogenes were detected 2.7% and 2.3%.
Three strains of pathogenic bacteria isolated from diseased red sea bream at a culture farm in Gyoung sangnam-Do during the midwinter of 1987 were studied taxonomically. Based on their biological and biochemical characteristics, they were identified as Vibrio sp.. They exhibited very similarities to group II (Kusuda et al.,1979) except that the former can grow at lower temperature.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.25
no.3
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pp.30-34
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2023
White leg shrimps which were cultured in a private aquaculture farm showed abnormal swimming behavior and appetite reduction in July 2023. Then, gradual mortality was observed in the aquaculture farm. During the diagnosis, bacterial strain KNUAFVaSHP08147 was isolated from the hepatopancreas of the dead shrimps. Based on the sequence of 16S rRNA gene, KNUAFVa-SHP08147 was proved to be Vibrio alginolyticus, showing 99.71 % nucleotide identity with that of V. alginolyticus MG54 and GS MYPK1. According to the result of the growth of KNUAFVa-SHP08147, the treatment a commercial disinfectant, VirkonTMS was not proved to be effective to prohibit the growth of Vibrio.
In this study, microbial investigation is accomplished for 554 Jeot-kal samples(102 of Jeot-kal, 448 of Seasoned Jeot-kal and 4 of Sik-khe, respectively) that corresponds with Coliform-bacteria, Escherichia coli, Aerobic live bacteria as hygienic indicator microorganisms, and Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus as Food-borne pathogenic microorganisms, Based on the methods in Korea Food Code, reliable data are obtained as follows; in 31.9% rate of the samples, Coliform bacteria are verified in the extent of $0{\sim}20,000$ CFU/g as 2.3 logCFU/g. Especially, Seasoned Jeot-kal(37.7%,2.3 logCFU/g) are detected to 6 and 2 folds higher than those of Jeot-kal, 5.9% and 1.4 logCFU/g. Likewise, Escherichia coli is detected from 9 samples only in Seasoned Jeot-kal, that includes seasoned squid, seasoned octopus, seasoned roe of pollack, seasoned large-eyed herring and seasoned hairtail. Aerobic live bacteria are also detected in the range of $0{\sim}8.9{\times}10^8CFU/g$. Against salinity, E. coli are detected in samples only less than 10% salinity. Concomitantly, aerobic live bacteria count is decreased to $5.5{\sim}3.6$ log CFU/g upon the salinity is increased up to 25%. However, S. aureus and V. parahaemolyticus are not detected in 554 samples, presumptively referring Jeot-kal products are somehow free from such food-borne pathogens. As the results above, we deliberately consider that the sanitary control in Jeot-kal, which be necessarily fermented- as well as non-microbially inactivated should be ensured in near future and also suggest an effectual microbial standard corresponding to the Negativity in E. coli for Jeot-kal products.
Vibrio septicemia,, resulting in high mortality, has been caused by Vibrio vulnificus. Ingestion of marine products or contact with sea water contaminated with Vibrio vulnificus can cause septicemia. Vibrio vulnificus has been detected world wide and west sea area of Korea, Kum river estuary in particular, showed high detection rate. Higher detection rate of Vibrio vulnificus were reported in the bottom deposit with low depth of water, low salinity, and high COD. Man with the liver disease can easily come down with Vibrio septicemia and the main source is the sliced raw fish dish. The preventive measure for this disease is to wash raw fish material thoroughly with tap water and handle in sanitary conditions. Washing with sea water is strictly prohibited . It may be necessary to forbid the small-scale businessmen from selling the sliced ray fish dish in the vicinity of seashore. Man with the liver disease of diabetes should not swim or consume the raw fish dish in the contaminated area during summer.
Vibrio parahaemolyticus was investigated for analysis of distribution and antibiotic susceptibility at the markets, Seoul in 2004. The average isolation rate was 26.8%(306/1,143) and the highest rate with 64.9% was obtained in August. The isolation rates from December to April was 0.0%. It is more effective to inoculate into the enrichment medium, alkaline pepton water by swabbing a sample with a cotton ball rather than pouring mixed sample. The isolation rates were from 24.4% to 37.1% in domestic samples and from 9.8% to 26.8% in imported ones. All of the isolates were resistent to ampicillin and ticarcillin and most of them were sensitive to chloramphenicol, tetracycline, nalidixic acid, amoxicillin, ceftriaxone, streptomycin, kanamycin, trimethoprim/sulfamethoxazol, ampicillin/sulbactam, ciprofloxacin.
북만 해수의 물리 화학적 및 미생물학적 특성과 북만에서 양식되고 있는 굴에 대한 세균학적 수질을 조사하여 수출용 패류생산지정 해역수질에 합당한가를 파악함과 동시에 지표세균의 조성, 병원성 세균 등을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다.사 기간중 불반 해수의 수온은 6.8 -23.$0^{\circ}C$, 투명도는 2.7-5.9m, COD 1.55-2.12 mg/1, DO 6.3-10.1 mg/1, 용존질소 1.63-20.87 $\mu\textrm{g}$-at/1, 인산염 0.16-1.66 $\mu\textrm{g}$-at/1, Chlorophyll. a는 1.04-6.78 mg/ ㎥범위였으며 염분농도는 31.57-34.47$\textperthousand$였다. 북만 해수의 세균학적 수질은 통영항, 인평포, 법송포 및 북신만 안쪽의 일부 해역을 제외하고는 수출용 패류의 생산해역의 수질기준에 합당하였다. 대장균군의 최확수는 양식을 하지 않는 조사지점 1과 2를 제외하고 해수 100ml 당 < 3.0-4,600의 범위였으며 230을 초과하는 시료의 비율은 10.7%였고, 분변계 대장균의 최확수는 <3.0-1,100의 범위였으며 43을 초과하는 시료의 비율은 9.5%로 한계치 10%를 약간 상회하였다. 대장균군의 분류겨로가 Escherichia coli가 약 52%나 되어 오염원의 주류가 분변오염임을 알 수 있었다. 살모넬라, 시겔라, 콜레라균 등 수인성 병원세균은 검출되지 않았다. 병원성 비브리오균은 여름철인 6-8월 사이에는 시료의 9-22%에서 양성으로 나타났다. 굴 내에 생균수는 2.0 x $10^{2}$-1.6 x $10^{3}$범위였고 대장균군의 최확수는 <18 - 16,000, 중앙치는 176, 분변계 대장균은 <18-2,400, 중앙치는 었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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