Kim, Kyusoon;Jung, Chung Ryul;Yang, Chang Yeol;Kwon, Gimyeon;Kim, Yonggyun
Korean journal of applied entomology
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v.56
no.1
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pp.61-67
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2017
Two major sex pheromone components (Z-8-dodecenyl acetate and E-8-dodecenyl acetate) are known in the peach fruit moth, Grapholita molesta. From a putative biosynthetic pathway of these sex pheromone components, delta 10 desaturase ($10{\Delta}$ DES) has been proposed to play a crucial role in synthesizing a species-specific stereoisomer of the double bond. However, its molecular identity was not known. This study determined a putative desaturase (Gm-comp1575) as a $10{\Delta}$ DES candidate from G. molesta transcriptome constructed from the sex pheromone gland. Its open reading frame encodes 370 amino acid sequence with a predicted molecular weight at 43.2 kDa and isoelectric point at 8.77. It was predicted to have four transmembrane domains and six glycosylation sites at N-terminal or cytosolic domains. A phylogenetic analysis with its predicted amino acid sequence indicated that Gm-comp1575 is closely related with known $10{\Delta}$ DES genes of other insects. Gm-comp1575 transcript was detected in female adults at sex pheromone gland and other abdominal tissues. RNA interference of Gm-comp1575 significantly reduced attractiveness of virgin females in apple orchard compared to control females. These results suggest that Gm-comp1575 is associated with sex pheromone biosynthesis of G. molesta.
The hydrolysis characteristics of each fatty acid composing the fish oil by means of the lipase from Candida cylindracea was investigated. The saturated fatty acids, C14:0, C16:0 and C18:0, and the unsaturated fatty acids with one double bond, C16:1, C18:1(n-7), C18:(n-9), C20:1 and C22:1 were more easily hydrolyzed than the $\omega$-3 polyunsaturated fatty acids. when the number of carbon of the $\omega$-3 fatty acids was same but that of double bond was different, the hydrolysis of the $\omega$-3 fatty acids having lower number of double bond was more rapidly carried out. When the degree of polyunsaturation was same but the number of carbon was different, the lipase acted more rapidly upon the $\omega$-3 fatty acids with lower number of carbon. Docosahexaenoic acid(DHA) was most highly concentrated in the glyceride mixture after 120hr hydrolysis among the various $\omega$-3 polyunsaturated fatty acids. The weight percentage of DHA to the $\omega$-3 fatty acids in the fish oil was 31.87% but that in the glyceride mixture after 120hr hydrolysis was 51.89%.
For the molecular genetic study of cold tolerance mechanism in plants, a cDNA encoding fatty acid desaturase (fad3), converting linoleic acid (18:2, $\omega$-6) to linolenic acid (18:3, $\omega$-3), was isolated from $\lambda$ZAPII Arabidopsis thaliana cDNA expression library by plaque hybridization using fad3 cDNA probe derived from Brassica napus. A 1.8 kb-EcoRI fragment from a lambda clone showing a strong positive hybridization signal was subcloned into pGEM7 and analyzed for its nucleotide sequence. From deduced amino acid sequences, the fad3 gene was revealed to have an open reading frame(ORF) consisting of 386 amino acids with a molecular mass of 44,075 Da. The fad3 gene was compared to chloroplast $\omega$-3 fatty acid desaturase (fad7) and endoplasmic reticulum Δ12 fatty acid desaturase (fad2) to show 70% and 58% amino acid sequence homology, respectively, Especially, amino acids of internal (82 to 151) and carboxy terminal (276 to 333) regions were highly conserved, implying their requisite role for enzymatic functioning of fatty acid desaturases. IPTG-induced fad3 cDNA expression in E. coli cells was suggested to be toxic to bacterial growth.
본 논문은 피부미백에 관한 실험적 연구로서, 봉선화(Impatiens balsamina Linne)의 성분 중에서 하이드록시-나프타-퀴논(hydroxynaphthoquinone)이 멜라닌 생성억제 효능, 색소침착 저해 효과 등의 미백 활성이 있는 것으로 밝혀졌다. 피부흑화(melanogenesis)는 멜라닌 색소생성세포(melanocyte)에서 자외선 등의 자극에 대한 방어기작으로 멜라닌 생성 활동이 증가되고 이로 말미암아 만들어진 다량의 멜라닌이 각질형성세포(keratinocyte)로 전이되어 피부 표피층에 축척된 결과이다. 비록 멜라닌이 피부에 보호작용을 하나 피부의 과색소 침착은 기미, 주근깨, 피부염증 후의 피부흑화, 노인성 색소반점 등을 일으키며 이로 인해 피부미용 상의 불편뿐만 아니라 정신적으로 부정적인 영향을 미쳐 사회활동에 불편을 초래하기도 한다. 멜라닌 생성 과정은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화 반응을 거쳐 만들어 지며, 이것이 피부 내에 이상 침착하여 기미, 검버섯 등이 생기는 것이라고 알려져 있다. 이와 같은 색소침착, 기미, 반점 등의 완화, 예방 및 치료에는 멜라닌 생성을 억제하는 물질, 예를 들면 하이드로퀴논(hydroquinone), 알부틴, 비타민 C 및 그 유도체 등이 개발되어 사용되고 있으나 이 중, 하이드로퀴논은 일단 효과가 인정되고 있지만 감작성이 있기 때문에 일반적으로 사용이 제한되고 있다. 아스콜빈산은 쉽게 산화되어, 이를 배합한 제품에는 변색, 변취가 되는 문제를 야기하고, 식물추출물 유래의 물질들은 식물의 산지에 따라 효능의 차이가 심하여 제품의 균질성이 유지되기 어렵다. 이러한 이유로 많은 멜라닌 생성을 억제하는 물질을 개발하기 위한 연구들이 계속 진행하고 있다. 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논 유도체는 다음과 같은 구조를 나타낸다. 상기 구조에서 R은 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬로서, 바람직하게는 C1 내지 C10의 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬이고, 보다 바람직하게는 C1 내지 C5의 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬이다. 실험에 활용된 화합물은 다음과 같은 반응식으로 얻어졌다. 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논과 포타슘카보네이트(K2CO3)를 아세토니트릴에 용해한 후, 저온수조로 냉각하고 알킬할라이드를 적당한 당량비로 천천히 적하하여 히드록시기와 에테르(ether) 반응을 통하여 얻어질 수 있다. 상기 반응식에서 R은 C1~10의 포화 또는 불포화된 알킬기로서 직쇄형 또는 분지쇄형 모두 가능하다. 상기 화합물인 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논(2-hydroxynaphthoquinone)은 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 하이드로퀴논과 대등한 멜라닌 생성 억제효과를 보였다. 하이드로퀴논은 저농도에서 강력한 멜라닌 생성 억제효과를 보이지만 상기 화합물들은 보다 낮은 농도에서도 세포독성을 나타내지 않으며 하이드로퀴논보다 높은 멜라닌 생성 억제 효과를 보였다.
Insects are known to live at wide range of temperature, but can not survive when they are exposed to over $40^{\circ}C$ or below supercooling point. The larvae of Helicoverpa assulta have been reared at high ($35^{\circ}C$), low (3 to $10^{\circ}C$), and room temperature ($25^{\circ}C$; control). To identify stress-related genes, the transcriptomes of fat body have been analyzed. Genes such as cuticular proteins, fatty acyl ${\Delta}9$ desaturase and glycerol 3 phosphate dehydrogenase were up-regulated whereas chitin synthase, catalase, and UDP-glycosyltransferase were down-regulated at low temperature. Superoxide dismutase, metallothionein 2, phosphoenolpyruvate carboxykinase and trehalose transporter have been up-regulated at high temperature. In addition, expressions of heat shock protein and glutathione peroxidase were increased at high temperature, but decreased at low temperature. These temperature-specific expressed genes can be available as markers for climate change of insect pests.
The purpose of the study was to suggest the optimal lipid enrichment conditions used digestive enzyme activity of rotifer changing due to water temperature and salinity. The high population growth appeared at the experiment temperature more than 28 degrees highly on the culture temperature(maximum 32 degrees, 1,453 individual/mL). The fecundity was low at high temperature, and the egg ratio was high at low temperature. Population growth of 10 and 15 ppt appeared in most highly, but the fecundity and the egg ratio were high most significantly appeared in natural seawater(32 psu). The digestive enzyme activity by the culture environment mainly showed high activity in natural seawater(amylase exclusion, 15 psu). However, the TAP activity by the water temperature showed highly at the more high temperature, but the amylase and the lipase appeared at low temperature. We carried out the lipid enrichment at 20 degrees and 26 degrees in a condition of the natural seawater. Total protein, the total essential amino acids differed not significantly. The methionine content that was essential amino acids, a total lipid content, unsaturated index of fatty acids, DHA and the DHA/EPA ratio were high significantly each in $20^{\circ}C$ enrichment trial. Therefore, we could suggest the $20^{\circ}C$ and natural seawater for the optimal lipid enrichment condition in aquaculture, because methionine contents, several indexes by the lipid, TG-lipase activity, fecundity and egg ratio are high.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.23
no.1
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pp.149-157
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2010
목적 : 월견초는 다량의 불포화 지방산인 리놀렌산과 감마 리놀렌산을 함유하고 있으며, 천식성 기침이나 아토피피부염에 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 월견초의 전초와 종자 추출물의 피부 멜라닌 합성에 대한 억제 효과를 조사하였다. 방법 : B16F10 멜라닌세포주를 이용하여 멜라닌, tyrosinase 활성 및 세포생존율을 측정하였다. 또한 멜라닌 합성- 관련효소인 tyrosinase, TRP-1, TRP-2의 단백질발현과 $\alpha$-MSH를 처리하여 색소침착을 유도 한 뒤 단백질 발현을 조사하였다. 결과 : 월견자는 B16F10 세포의 멜라닌 합성을 $5\;{\mu}g/ml$와 $10\;{\mu}g/ml$ 농도에서 각각 대조군의 81.3%, 68.3%로 억제하였고 tyrosinase의 활성도 이와 유사하게 억제하였다. 멜라닌 합성-관련효소들의 단백질발현을 관찰한 결과 월견초와 월견자는 tyrosinase 발현을 억제하였으며 TRP-1과 TRP-2의 발현에는 영향을 주지 않았다. 특히 $\alpha$-MSH에 의한 과색소 유도 시 tyrosinase 발현이 현저하게 감소되었으며, 월견자의 멜라닌 합성 억제 효과가 월견초 보다 높게 나타났다. 결론 : 이상의 연구 결과 월견자는 멜라닌세포의 tyrosinase 단백질 발현과 tyrosinase 활성을 억제하여 멜라닌 생성을 감소시키는 것으로 사료된다.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.18
no.4
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pp.435-443
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1989
The regulation of the synthesis of alcohol-oxidase(E. C. 1. 1. 3. 13) was investigated in the methanol-utilizing yeasts during growth on different carbon sources. For this experiment, Pichia pastoris CBS 2612 and Pichia pastoris CBM 10 were cultured in mineral salt medium by changing its carbon sources. The production of alcohol-oxidase was varied by the carbon sources. For example, alcohol-oxidase was undetectable in all strains submitted to the test in the medium with glucose, but its production was rapidely increased when the carbon source was changed from glucose to methanol after 48hrs of incubation. Moreover, this enzyme was not synthesized during growth on the primary aliphatic alcohols alone(ethanol, propanol, butanol or pentanol) or on the mixed substrates(0.5% methanol+0.5% primary aliphatic alcohols). When cells were grown on the various carbon sources(glucose, xylose, lactose, glycerol, galactose, saccharose, sorbose, lactic acid or acetic acid), The alcohol-oxidase activity was detected a very little amounts. These carbon sources together with methnol yieled far better synthesis of alcohol-oxidase than in case of carbon sources alone. Especially, the alcohol-oxidase activity of the cells grown on sorbose, lactose or lactic acid together with methanol was far better or similar than that of cells grown on methanol alone. The apparent Km values for the methanol of Pichia pastoris CBS 2612 and Pichia pastoris CBM 10 enzymes were 1.92 and 210 mM, respectively. It is also active towards alcohols of shorter alkyl-chain length than $C_7$, insaturated alcohols(allylalcohol, crotyl-alcohol) and secondary alcohols (iso-amylacohol, iso-butylalcohol). The affinity of alcohol-oxidase for this alcohols decreased with the increasing length of the alkyl-chain.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.2
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pp.257-262
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2002
Effects of dietary fatty acids and vitamin E on antioxidant system were studied in rat liver and serum. Sources of dietary fat (10 wt%) were safflower oil (SO) poor in $\omega$3 fatty acid and mixed oil (MO) with computer-adjusted fatty acid ratios (AA/DHA=1.4, $\omega$6/$\omega$3=6.3, P/M/S=1.0/l.5/1) with (ME) and without (MO) vitamin E (500 mg/kg diet). Rats were fed the three kinds of diet from 3~4 wks prior to the conception. At the age of 3 and 9 wks of the second generation rat, antioxidant vitamins and glutathione peroxidase (GSH-Px), superoxide dismutase (SOD) activities were measured in the liver and serum. The concentrations of $\beta$-carotene were lower in ME than in MO and SO in the liver at the age of 3 wks. It seemed that vitamin E has an inhibitory action on the uptake of $\beta$-carotene or acts as a preferred antioxidant to $\beta$-carotene. The concentrations of lycopene were lower in SO than in MO in the liver at the age of 3 wks. The concentrations of cryptoxanthin showed no significant changes within groups. The activities of GSH-Px tended to increase in ME compared to MO and the ratios of SOD/GSH-Px tended to decrease in ME compared to MO in the liver at the age of 3 weeks. The activities of antioxidant enzyme at the age of 3 weeks and 9 weeks were similar. This suggested that the activity level of antioxidant enzymes reached to the adult level at the age of 3 weeks which is the end point of lactation period.
Diacylglycerol(DAG) was produced by enzymatic esterification of glyceryl mono-oleate(GMO) and conjugated linoleic acid(CLA) in a stirred-batch type reactor. The reaction was catalyzed by lipozyme RMIM(an immobilized lipase from Rizomucor miehei). DAG was isolated by a short-path distillation process and decolorized. DAG oil was composed of 87.3% DAG, 11.4% triacylglycerol(TAG), and 1.5% monoacylglycerol(MAG)(all w/w). Major fatty acids in DAG oil were oleic acid(54%), CLA(31.1%), and linoleic acid(7%). DAG oil iodine,and acid values were 108.8, 2.57, and 1, respectively. The DAG oil solid fat index(SFI) and thermograms were obtained using differential scanning calorimetry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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