An wild boar species which has been known as an extinct species on Jeju Island, was recently observed in the surrounding areas of Mount Halla. Based on the molecular techniques, this study examines whether they are crossbred with domesticated pig breeds. Intraspecific genetic relationships with other wild boar populations and molecular sexing were examined as well. Total of four molecular markers on mitochondrial DNA(control region and ND2) and nuclear DNA(MC1R and KIT) were applied to test crossbreeding between with domesticated pig breeds, such as Landrace, Large White, Berkshire, Hampshire, and Duroc. All individuals of wild boar population had identical mtDNA control region(CR) sequences. In addition, the sequences were the same as those of some native pig breeds which are distributed in Northeast China, but different from those previously reported from the Korean Peninsula up to date. These results suggest that this population may have originated from a genetic lineage had been not previously studied and genetically related to Chinese native pig breeds. Molecular sexing results show that there are twice as many females as male. Thus the population is under expansion and its size will dynamically increase if not controlled.
Thistle is a perennial plant that is widely used for medicinal purposes. Information on the genetic diversity of thistle populations are great important for their conservation and germ plasmic utilization. Although thistle is an important medicinal plant species registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish them from other similar species from different countries. In this study, we developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from the nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) regions of genomic sequences to identify distinct Korean-specific thistle species via an amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR and high resolution melting (HRM) curve analyses. We performed molecular authentication of four different kinds of thistle species from different regions using DNA sequences in the ITS intergenic region. We also developed a quantitative PCR assay using species-specific ITS primers, which allowed us to estimate the ratio of Korean-specific thistle species using varying ratios of mixed genomic DNA templates from the two species. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific thistle species from different countries.
Lee, Shin-Woo;Lee, Soo Jin;Han, Eun-Hee;Shin, Yong-Wook;Kim, Yun-Hee
Journal of Plant Biotechnology
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v.48
no.1
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pp.26-33
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2021
Angelica is a widely used medicinal and perennial plant. Information on the genetic diversity of Angelica populations is essential for their conservation and germ plasmic utilization. Although Angelica is an important medicinal plant species registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish it from other similar species from different countries. This developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer regions genomic sequences to identify distinct Korean-specific Angelica species via amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR curve analyses. We performed molecular authentication of different kinds of Korean-specific Angelica species such as A. gigas Nakai and A. gigas Jiri using DNA sequences in the ITS intergenic region. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific Angelica species from different countr.
Lee, Soo Jin;Shin, Yong-Wook;Kim, Yun-Hee;Lee, Shin-Woo
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.2
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pp.135-141
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2017
Cudrania tricuspidata Bureau is a widely used medicinal perennial woody plant. For conservation and germplasm utilization of the plant, it is imperative to obtaining information regarding the genetic diversity of the plant populations. Although C. tricuspidata is an important medicinal plant registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish Korean-specific ecotypes from other ecotypes of different countries. In this study, we developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from chloroplast genomic sequences to identify distinct Korean-specific ecotypes of C. tricuspidata via the amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR analyses. Molecular authentication of twelve C. tricuspidata ecotypes from different regions was performed, using DNA sequences in the trnL-F chloroplast intergenic region. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific C. tricuspidata ecotypes from different regions.
A quantitative description of the principle of least motion is suggested. The reaction path function of electronic variables, its norm and the reaction path average energy, which are unique for a given reaction path on a potential energy surface of a reacting system, are defined and their characteristics are discussed. It is postulated that the norm of the function and the average energy can be used as a criterion for identification of the preferred path of a unimolecular isomerization reaction. For a molecule with a certain symmetry, the preferred path, with which Woodward-Hoffmann rule agrees, is immediately identified without laborious computation.
This study was performed to develop the molecular marker for sex determination of hare (Lepus coreanus) distributed in Korea which focused on sexual dimorphism between X and Y chromosomal homologous genes, zinc finger-X (ZFX) and -Y (ZFY). The intron 7 regions of ZFX and ZFY genes exhibited differential amplification patterns between male and female hares. The lengths of intron 7 region of ZFX and ZFY genes were 538 and 233-bp, respectively. Especially, the ZFX intron 7 contained a repetitive sequence identified as member of RNA-mediated transposable elements which was similar to CSINE2 commonly found in the rabbit genome. However, it was not present in intron 7 of ZFY gene. The molecular sex typing by polymerase chain reaction (PCR) was also carried out to determine the sex of hare based on difference in lengths between the intron 7 regions of ZFX and ZFY genes. All DNA samples tested had common band amplified from ZFX. However, the male hare DNAs had two distinct bands which amplified from ZFX and ZFY genes, respectively. The results from ZFX-ZFY PCR sex typing were identical to those from phenotypic investigation and from amplification patterns using male-specific sex determining region Y (SRY) gene as well. Finally, this study suggested that the sexual dimorphism between intron 7 regions of ZFX and ZFY could be useful genetic marker to determine sex of hare.
This study was conducted to develop an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for the determination of cooked goat meat. Muscle proteins were extracted from goat meat by heating at $98^{\circ}C$ for 15 min. Major thermostable(TS) protein, whose size and pI are 36 and 38 kDa and 4.5 respectively, were purified by DEAE-Sephadex A-50 and Sephadex G-75 column chromatography. The TS protein was immunized into rabbits in order to produce goat specific antibodies. Competitive indirect ELISA(ciELISA) was established by using the anti-TS antibody. The antibody showed high reactivity toward the TS antigen and the boiled goat meat extract but it did not show any reactivities toward extracts of boiled chicken, pork, lamb, and beef. Thus, this ciELISA developed in this study could be applicable to identify goat species from cooked meat.
An unidentified moth was captured in sex pheromone traps of the oriental fruit moth, Grapholita molesta, especially at spring season in apple orchards and their vicinity. Though the captured males were similar in appearance to G. molesta males, they were easily distinguished by a matted difference in body size. Their occurrence pattern was also similar to that of overwintering G. molesta population from April to May, at which more males were captured in the pheromone traps installed in the vicinity of apple orchards than within apple orchards. After May, they were no longer captured in the pheromone traps. To investigate any larval damage due to this unidentified moth, molecular markers needed to be developed. Four PCR-RFLP markers originated from cytochrome b region of mitochondrial DNA could distinguish this unidentified moth from G. molesta.
The spontaneous color mutant, albino individuals of genus Misgurnus, are rarely discovered in Korea and there are difficult to identify morphological species due to lack melanin pigmentation. In this study, we developed a genetic identification method for the species of albino Misgurnus individuals based on phylogenetic analysis by using recombination activating gene 1 (rag1) and cytochrome b (cytb) region of mitochondrial DNA. As a result of molecular phylogenetic analysis, three clades were identified as Misgurnus mizolepis, M. anguillicaudatus and M. mohoity. The homology of the cytb sequences of M. mohoity was best match to that of M. mohoity sequences in GenBank database. As a result of species identification of 25 albino Misgurnus individuals based on the phylogenetic tree, the red-eye type was identified as 16 M. anguillicaudatus and one M. mizolepis. The remaining three individuals were identified as one M. mizolepis ♀${\times}$M. anguillicaudatus ♂, and two M. mohoity ♀${\times}$M. anguillicaudatus ♂, respectively. In addition, the five black-eye type individuals were identified as one M. anguillicaudatus, three M. mizolepis and one M. mohoity. Therefore, this genetic identification method will be an useful techniques for species or hybrid identification in genus Misgurnus.
이식 전 수정란의 성판정은 많은 축산인의 소망이었다. 많은 방법이 제기되었지만, 세포유전학적 분석방법은 ET의 상용화에 거의 무의미할 정도로 한계가 많았고, 이후 개발된 응성 특이적 항원이나 X-염색체에서 발현되는 효소의 활동을 통한 성판정 방법은 흥미롭기는 하나 산업적 적용에 제약이 많았다. 80년대 중반 Y-염색체 특이적인 DNA 탐침자의 개발과 PCR을 통한 DNA증폭기술의 개발은 수정란 성판정을 획기적으로 개선시켰다. DNA기술을 통한 수정란의 성판정은 분자생물학을 현장으로 진출시킨 첫 경우이기도 했다. 90년대에 세포유전학적 분석에서 FISH가 소개되었으며, 염색체 특이적 library는 다른 기초적이고 응용세포유전학적 연구에 유용한 도구가 되었다. 최근에는 사람에서는 착상전 수정란의 성판별 및 유전진단을 위해 실시되고 있는 형광직접접합법(fluorescent in situ hybridization, FISH)은 효소적 유전자 증폭(polymerase chain reaction; PCR)에 비해 높은 민감도와 정확성을 보이고 있으나 hybridization 및 washing 과정에 매우 긴 시간이 소요되고, 절차도 까다로워 현장에서의 적용이 용이치 않았다. 그러나 direct labelled probe의 이용, heat programmable instrument의 개발, denaturing chemical의 사용배제 등을 통해 소요시간 및 절차의 대폭적인 간소화를 이루어 현장의 적용 가능성을 한층 높이고 있다. 현재 사람의 세포유전학 및 종양학에서는 FISH의 다양한 기술이 많이 이용하고 있으나 소에서는 탐침자(probe)가 개발되어 있지 않아 그 이용이 미미하다. 본 연구는 FISH를 이용하기 위한 탐침자의 개발을 궁극적인 목표로 삼았으며, 이를 위해 접근이 용이한 방식을 개발하여 기존의 방식과는 다른 소 배아세포의 성을 판별 할 수 있는 접근방법을 소개 하고자한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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