• Title/Summary/Keyword: 분자생물학적 동정

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Taxonomic Review on Hydrangea macrophylla (Thunb.) Ser. and H. serrata f. acuminata (Siebold & Zucc.) E.H.Wilson (산수국과 수국의 분류학적 재검토)

  • Kang, Shin-Ho;Chung, Kyong-Sook
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2019.10a
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    • pp.22-22
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    • 2019
  • 수국속(Hydrangea L.)은 APG IV분류체계에 따르면 국화군(Asterids), 층층나무목(Cornales), 수국과(Hydrangeaceae)에 속하는 식물로서 동아시아, 북아메리카 동부 지역을 중심으로 분포하며 전 세계에 23여종이 알려져 있다. 한국산 수국속은 Nakai가 H. hortensia var. acuminata의 분포를 기록함으로써 시작되었다. 이후 Nakai는 산수국을 H. acuminata로 재처리, 다시 H. serrata var. acuminata로 변경하였다. 한편 산수국은 분류학적 위치에 대한 이견이 있다. Wilson은 수국과 산수국을 가까운 유연관계를 가지는 독립된 분류군으로 분류하였지만, Makino는 산수국을 수국의 아종인 H. marcrophylla subsp. serrta로 기재하는 등 산수국과 수국의 동정과 계급설정에 혼란이 있는 가운데, 최근 천연물 hydrangenol을 활용한 건강기능식품 개발에서 사용가능 재료의 한계를 설정하기 위한 산수국과 수국에 대한 종 설정 연구도 요구되고 있다. 따라서 본 연구에서는 nrDNA ITS, trnL-F, trnC-ycf6의 3개 구간의 DNA sequence와 NCBI (National Center for Biotechnology Information)를 참고한 분자생물학적 분석결과와 외부형태학적 재검토 결과를 통하여 H. marcrophylla를 종(Species)으로서의 분류학적 위치 지지하며 또한 수국과 산수국을 가까운 유연관계를 가지는 독립된 분류군으로 분류한 의견을 지지하는 결과를 도출하였다. 향후 hydrangenol 활용의 기초정보로 활용되기를 기대한다.

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Identification of Fungi Occurred on Silicon of Washbasin (세면대 실리콘에 발생한 곰팡이의 동정)

  • Hong, Seung-Beom;Kim, Dae-Ho
    • The Korean Journal of Mycology
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    • v.42 no.1
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    • pp.69-73
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    • 2014
  • Black molds were occurred on silicon of washbasin in a bathroom in apartment. Blocks of silicon where the fungi grew, were placed on MEA, DG18, DRBC, PDA+PS media, and 18 strains of fungi were isolated. They were identified as Phoma herbarum, Peyronellaea calorpreferens, Cladosporim halotolerans based on morphological and molecular methods. Ph. herbarum and Pe. calorpreferens were isolated with high frequency, but C. halotolerans was isolated with low frequency. The fungal strains were deposited in Korean Agricultural Culture Collection (KACC), and they shall be used for further related researches.

Molecular Analysis and Enzymatic Characterization of Cathepsin B from Olive Flounder (Paralichthys olivaceus) (넙치 카텝신 B의 분자생물학적 분석 및 효소학적 특성 연구)

  • Jo, Hee-Sung;Kim, Na-Young;Lee, Hyung-Ho;Chung, Joon-Ki
    • Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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    • v.26 no.3
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    • pp.543-552
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    • 2014
  • Papain family중 하나인 cysteine protease는 근골격계 질환 치료를 위한target molecule로 인식 되어왔으며 Cathepsin B 는 단백질 분해의 초기과정에 관여하는 cysteine proteases 중 하나이다. 본 연구는 넙치의 cathepsin B 유전자의 발현 양상과 넙치 cathepsin B(PoCtB)의 클로닝, 발현 및 효소특성을 분석하였다. cDNA Library Screening을 이용하여 넙치의 cDNA를 클로닝하였다. 넙치의 동정된 cathepsin B 유전자는 993bp의 open reading frame과 330개의 아미노산으로 이루어져있다. Cathepsin B의 propeptide region 내에 GNFD motif와 occluding loop 가 존재함으로써 이것이 명백하게 cathepsin B group이라는 것을 보여주며, 계통 유전학적 분석 결과 다른 종의 cathepsin B에 비해 초창기에 분화되어 나온 것으로 사료된다. mature enzyme인 maPoCtB은 fusion protein인 glutathione S-transferase를 포함하는 pGEX-4T-1 vector에 삽입하여 E.coli 균주인 $DH5{\alpha}$ 내에 발현시켰다. 재조합 단백질인 PoCtB을 과발현 시킨 결과 53kDa의 분자량을 가진다. 넙치 cathepsin B 활성은 Z-Arg-Arg-AMC와 같은 fluorogenic 펩타이드 기질을 이용하여 측정되었고 적정 pH는 pH.7.5 이다.

Genetic Identification on Natural Population of Triploid Crucian Carp, Carassius auraus in Korea (자연산 3배체 붕어 (Carassius auratus) 클론 집단에 대한 유전학적 동정)

  • Kim Eung Oh;LEE Jong Yoon;Nam Yoon Kwon;Noh Jae Koo;Lee Sang Yun;Kim Dong Soo
    • Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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    • v.35 no.6
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    • pp.589-594
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    • 2002
  • Natural clonal stock of triploid crucian carp, Carassius aurahs was identified and its cytogenetic, molecular genetic and morphological traits were studied. Cytogenetic analysis of the clonal crucian carp revealed that they were natural triploidy, evidenced by 1.5-fold increases of cell size, DNA content, and chromosome number. Multi-locus DNA fingerprinting using $(GATA)_4$ probe showed that they had an identical fingerprint profile, indicating the clonal propagation of the population. External morphology and morphometric characteristics of triploid individuals were much uniform compared to those of diploids. Natural triploid crucian carp was proven to be all-female in this study.

Neofusicoccum mangiferae and Thyronectria cucurbitula: Unrecorded Endophytic Fungi Isolated from the Leaves of Woody Plants in Korea (목본식물의 잎에서 분리된 국내 미기록 내생균: Neofusicoccum mangiferae and Thyronectria cucurbitula)

  • Lee, Jong-Chul;Park, Hyeok;Eom, Ahn-Heum
    • The Korean Journal of Mycology
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    • v.48 no.4
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    • pp.415-421
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    • 2020
  • We isolated endophytic fungi from the leaves of woody plants inhabiting the Ulleungdo Island and Yeosu in South Korea. The fungal strains were identified based on their morphological characteristics in conjunction with phylogenetic analysis, which was performed using sequences of the internal transcribed spacer, large subunit rDNA, and β-tubulin DNA. We confirmed the presence of Neofusicoccum mangiferae and Thyronectria cucurbitula, two endophytic fungal species that had not been previously recorded in Korea. In this report, we describe the morphological characteristics of these fungal strains and results of the DNA-based phylogenetic analysis.

Isolation and Identification of Micromonospora sp. Showing Nematocidal Activity Against Pine Wood Nematode (소나무재선충에 대한 살선충 활성을 나타내는 Micromonospora sp.의 분리 및 동정)

  • Park, Dong-Jin;Lee, Jae-Chan;Kim, Pan-Kyung;Kim, Chang-Jin
    • The Korean Journal of Pesticide Science
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    • v.12 no.1
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    • pp.97-101
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    • 2008
  • For the isolation of Actinomycetes showing nematocidal activity against Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, about 2000 culture broth of Actinomycetes were tested and their activity were compared with that of Streptomyces avermitilis resulting a selected strain AW050027. The cultural, morphological and physiological analysis was performed for the identification of a selected strain. Phylogenetic analyses based on 165 rDNA gene sequences showed that the selected strain AW050027 belonged to the genus Micromonospora and M. corioriae $NAR01^T$ was the closest neighbors, sharing 98.9% 165 rDNA gene sequence similarity.

First report of three Filosporella species isolated from freshwater ecosystem in Korea (담수생태계로부터 분리된 Filosporella 3종의 국내 최초보고)

  • Mun, Hye Yeon;Oh, Yoosun;Goh, Jaeduk;Chung, Namil
    • The Korean Journal of Mycology
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    • v.47 no.2
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    • pp.165-172
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    • 2019
  • To investigate the diversity of aquatic fungi, we collected deposits of soil, plants, and plant litter from ponds and streams. NNIBRFG1552 was isolated from soil deposits and NNIBRFG3013 from plant deposits in Namsaengi-mot in Jeju, Korea in 2016; NNIBRFG5472 was isolated from plant litter in Bocheong-cheon, Boeun, Korea in 2018. Based on morphological characteristics and phylogenetic analysis using rDNA sequences of the internal transcribed spacer (ITS), NNIBRFG1552, NNIBRFG3013, and NNIBRFG5472 were identified as Filoporella exilis (100% similarity with KC834046), F. fistucella (99.8% with KC834047), and F. cf. annelidica (100% with KC834044), respectively. Furthermore, cultural and morphological characteristics were analyzed to confirm the molecular identification. No species of the genus Filosporella has yet been reported in Korea.

Genome Type Analysis of Human Adenoviruses Associated with Pediatric Gastroenteritis in Korea (소아장염을 유발하는 한국형 아데노바이러스들의 지놈형별)

  • Kim, Hee-Jin;Yang, Jai-Myung;Kim, Kyung-Hee
    • The Journal of Korean Society of Virology
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    • v.26 no.1
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    • pp.23-30
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    • 1996
  • 대략 36,000 base pairs (bp)의 두 가닥짜리 DNA를 지놈으로 가진 사람 아데노바이러스 (Ad)는 DNA 상동성(相同性) 및 생물학적/생화학적 성격이 특이한 49개의 혈청형이 알려져 있는데, 이들 대부분의 Ad가 영유아군 및 면역능이 저하된 성인에서 치사적 결과를 초래할 수 있다. Ad의 세포향성(向性)(tropism)은 매우 다양하여 종류에 따라 상기도 감염, 각결막염, 영유아 장염등을 유발하는데 최근 Ad의 다양한 병원성에 대한 원인을 분자생물학적 수준에서 규명하려는 노력의 일환으로 지역에 따라 주되게 출현하는 Ad형 규명이 활발히 이루어지고 있다. Ad 동정/확인은 표면을 이루고 있는 group 공통항원인 hexon 단백질을 탐지하는 효소면역 측정법 (EIA)에 의하며, Ad형별은 Ad fiber의 세포독성 중화시험에의 한다. 그러나, 세포독성 중화시험이 엄청난 노동력 및 시간을 요구하면서도 민감도/특이도가 만족스럽지 못하여 이를 개선하기 위하여 검체 또는 세포배양에서 Ad DNA를 추출하여 제한효소 절단형태를 비교하는 방법이 개발되었는데 이는 세포배양에 잘 자라지 않는 바이러스주의 형별뿐만 아니라 지역 분리주들의 지놈 변형주를 관찰하는 분자생물학적/분자역학적 연구에도 도움이 되고 있다. 국내에는 Ad와 관련된 소아장염의 빈도가 rotavirus에 의한 것 다음으로 빈번한데도 Ad40/41외에 주되게 출현하는 장내 Ad형들이 전혀 규명된 바 없고, 한국형 Ad들의 지놈형태가 전혀 보고된 바가 없다. 또한 세계적으로 Ad형별 조사지역이 늘어감에 따라 유아장염과 연관된 Ad 역시 Ad40, 41이 외의 형들이 Ad40, 41을 능가하는 것으로 보고되고 있는 지역도 있으나 국내에서는 Ad40, 41이외의 형들은 그 역학적 중요도가 전혀 알려져 있지 않다. 이로서 본 연구의 목적은 Ad주들에 특이 중화항체를 이용한 세포독성 중화시험과 Ad DNA 절단법을 적용하여 한국형 장내 Ad주들의 형별을 처음으로 시도함과 동시에 1989-1991사이 출현한 Ad들의 유전적 변형을 관찰하려는 것이었다. 두 방법 모두 사용하였을 때 주되게 출현하는 장내 Ad형들은 Ad4l, Ad2, Ad7, Ad5, 및 Ad40이었다. Ad40/41-양성 검체를 제외한 Ad hexon-EIA양성들의 77.5%를 형별 할 수 있었던 Ad DNA의 제한효소 절단방법은 형들간의 교차중화로 특이성이 낮았던 중화방법 (47.5%)보다 매우 효율적이어서 두 가지 방법을 함께 적응하였을 때는 40주중의 81.5%인 35주를 형별 할 수 있었다. 또한Ad DNA 제한 효소 절단방법은 Ad7 변이주 (Ad7b)도 탐지 할 수 있었다.

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Isolation of Myxobacteria Carrying Soraphen Biosynthetic Gene Clusters (Soraphen 생합성 유전자군을 갖는 점액세균의 분리)

  • Lee, Cha-Yul;Hyun, Hye-Sook;Cho, Kung-Yun
    • Microbiology and Biotechnology Letters
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    • v.37 no.1
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    • pp.10-16
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    • 2009
  • Polymerase chain reactin (PCR) could be a simple way to screen new microbial strains producing useful secondary metabolites if their biosynthetic genes are known and candidate strains to be screened are available. In this study, we have screened two myxobacterial strains, KYC3047 and KYC3076, carrying genes appeared to be biosynthetic genes of soraphen A, a potent antifungal substance, out of 50 cellulose degrading myxobacteria using PCR. The two strains were identified as Sorangium cellulosum based on morphological, physiological, and molecular biological characteristics. Both of the strains produced substances having strong antifungal activities as expected against Candida albicans, a causative agent of candidiasis, and Colletotrichum acutatum, a causative agent of anthracnose on pepper.

Note on Newly Isolated Yeasts from Wild Flowers in Daejeon City, Korea (대전지역 야생화에서 분리한 미기록 효모 균주들의 보고)

  • Kang, Min-Gu;Hyun, Se-Hee;Ryu, Jin-Ju;Min, Jin-Hong;Kim, Ha-Kun;Lee, Jong-Soo
    • The Korean Journal of Mycology
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    • v.40 no.3
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    • pp.174-176
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    • 2012
  • We report morphological and physiological characteristics of newly isolated six kinds of yeasts which are new in Korean mycoflora. The yeasts were isolated from wild flowers in Daejeon city, Korea and identified by molecular analysis of the amplified internal transcribed space rDNA sequence or partial 18S rDNA sequence. Species of isolates were identified as Kuraishia capsulate, Lodderomyces elongisporus, Pseudozyma antarctica, Starmerella bombicola.