• 제목/요약/키워드: 배양조건

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양막 유래 줄기세포의 간세포로의 분화 유도 (In Vitro Differentiation of Human Amniotic Membrane-derived Stem Cells into Hepatocyte-like Cells)

  • 국민지;박수연;강현미;김해권
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제10권1호
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    • pp.63-73
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    • 2006
  • 간질환 환자의 대부분은 간 조직 손상으로 인해 간세포의 재생 능력이 감소한다. 간세포 이식은 이러한 간질환을 치료하는데 있어 혁신적인 방법으로 대두되고 있으나, 여전히 많은 의문과 문제점이 제기되고 있다. 사람의 양막으로부터 얻은 줄기 세포를 이용하여 간세포 분화를 위한 최적의 조건을 알아 보고자 하였다. 세포내 알부민에 대한 면역 화학적 방법, 세포내 글리코겐의 특이 염색법, 세포의 형태적 변화 연구 방법 등을 이용하여 여러가지 배양 조건을 조사한 결과, 배양 접시를 fibronectin으로 coating하고 배양액내에 insulin/transferrin/selenium(ITS)을 첨가하는 것이 양막 줄기세포의 간세포로의 분화에 효과적이었다. 또한 배양액내에 fibroblast growth factor(FGF)-1과 FGF-2를 함께 첨가하는 것이 둘 중 하나만 첨가하거나 첨가하지 않는 것보다 효과적이었다. 한편 분화 배양은 한가지 배양액을 사용한 지속적인 배양법(continuous culture method)보다 배양 조건을 달리하여 두 단계로 배양하는 2단계 배양법(two-step culture method)가 훨씬 효과적이었다. 마지막으로, 기본 배양액에 FGF-2와 FGF-4를 첨가한 조건과 FGF-4와 $TGF-{\alpha}$를 첨가한 조건이 다른 조건 보다 알부민 분비를 많이 하는 것으로 보아 FGF-4가 간세포 분화 과정에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨지며 FGF-2 및 $TGF-{\alpha}$ 첨가는 더욱 효과적인 배양 조건으로 관찰되었다. 따라서, 양막에서 유래한 성체 줄기 세포는 적절한 배양 조건이 주어질 때, 간세포로 분화가 가능하며, 분화 과정에서 FGF-4가 주도적인 역할을 하며 FGF-2와 $TGF-{\alpha}$는 상승 효과를 갖는 것으로 사료된다.

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배양 조건에 따른 Spirulina piatensis의 성장 및 phycocyanin 함량 변화 (Content of Phycocyanins and Growth of Spirulina platensis with Culture Conditions)

  • 주동식;정충국;이창호;조순영
    • 한국수산과학회지
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    • 제33권5호
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    • pp.475-481
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    • 2000
  • 미세조류 S. platensis의 성장 및 색소 축적에 대한 배양 조건의 영향을 실험한 결과, 배양 온도 및 빛 강도는 각각 $35^{\circ}C,\;3500 lux$가 가장 적절한 배양 조건이었으며, 온도가 다소 낮은 $30^{\circ}C$ 조건에서는 빛 강도가 3500 lux보다 다소 높은 조건도 고려해볼만 하였다. 빛 강도 및 온도 조건에서의 phycocyanin 색소 함량은 조류의 성장 정도와 직접적인 상관을 나타내었으며, chlorophyll-a 함량과는 특별한 상관성을 가지지 않았다. 배지 중의 $NaHCO_3$ 첨가 농도는 $1.0{\%}$가 조류의 성장 및 색소 축적에 가장 좋은 조건임을 알 수 있었고, 그 이상의 농도에서는 오히려 phycocyanin 색소 생산능이 저하됨을 알 수 있었다. 탄소원인 $Na_2CO_3$$0.2{\~}0.3{\%}$ 농도 수준에서 가장 높은 조류의 성장과 phycocyanin을 축적하는 것으로 나타났으며, 첨가 농도가 높아져도 phycocyanin 색소 생산능은 증가되지 않았다. 한편, 질소원으로 첨가되는 $NaCO_3$농도도 $0.2{\~}0.3{\%}$ 범위에서 첨가하는 것이 균체의 성장이나 색소 생산에 바람직한 조건으로 확인되었으며, 과도한 첨가는 성장과 phycocyanin 색소 생산능이 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 전체적으로 chlorophyll-a는 phycocyanin 색소 함량이 증가하면 증가하는 상관을 가졌으나 그 함량은 미미하였다.

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중형저서동물의 실험실 내 장기 배양을 위한 먹이 및 광원의 최적 조건 연구 (Studies on the Optimal Conditions of Feeding and Light Supply for the Long-Term Cultivation of Meiofauna in the Laboratory)

  • 신아영;김동성;강태욱;오제혁
    • 한국해양학회지:바다
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    • 제25권2호
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    • pp.26-41
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    • 2020
  • 본 연구는 중형저서동물의 생리·생태적 연구를 위한 생물을 배양하기 위해 다양한 환경 조건을 설정하여 중형저서동물이 실험실 내에서 가장 이상적으로 배양되는 조건을 파악하고자 하였다. 배양에 사용된 퇴적물과 해수는 서해안 만리포 조간대에서 채집하였다. 채집된 중형저서동물은 항온·항습 기능이 있는 챔버 내에 환경 조건을 조절할 수 있는 수조를 제작하여, 수조 내에 채집된 해수와 퇴적물과 함께 배양 실험을 수행하였다. 실험 1은 시료 채집 지역과 유사한 환경을 조성하여 실험을 수행하였다. 실험 2는 실험 1과 같은 조건에 먹이생물 공급 유무의 차이를 확인하였다. 실험 3에서는 빛과 먹이생물 공급의 유무의 차이에 따른 중형저서동물군집의 변화를 확인하였다. 배양 실험 결과, 중형저서동물 군집은 먹이공급을 하지 않은 수조에 비하여 먹이 공급을 한 수조, 빛이 없는 조건보다 12시간 주기의 빛이 있는 조건에서 서식밀도와 출현분류군수가 상대적으로 높게 나타났다. 또한 실험실 내에서 배양된 중형저서동물의 서식밀도는 자연 상태에 비하여 상대적으로 높은 값을 나타냈다.

Mycelial Growth Enhancement in Liquid Cultivation of Hericium erinaceus

  • 김민석;서정식;홍억기
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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    • pp.236-239
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    • 2003
  • 생물반응기를 이용한 회분배양에서 균체량 생산에 있어서 조건은 200 rpm, 1 vvm 으로 선정하였으며, 이때 균체량은 11 g/L이었고, polysaccharide는 0.6 g/L이었다. 또한 pH를 초기 pH인 5.5로 고정하여 배양한 결과 pigment들로 인한 균사체의 활성이 떨어지는 것으로 나타났다 균체량을 증가시키기 위한 최적의 회분배양 조건에서는 초기 200 rpm으로 배양을 시작하여 300 rpm으로 증가시키고 glucose 5 g/L를 간헐적으로 첨가함으로써 균체량은 24.2 g/L, polysaccharide는 2.2 g/L로 나타났다. 또한 erinacine A의 분석은 HPLC를 사용하였으며 배양 4.5일째 균사체로부터 추출하여 mobile phase를 Methanol/water (9:1)로 flow rate은 0.7 ml/min으로 실험한 결과 erinacine A는 0.4 mg/g cell 로 측정되었다.

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Lipoxygenase Inhibitor를 생산하는 미생물의 분리 및 배양 (Isolation and Cultivation of Microorganism Producing Lipoxygenase Inhibitor)

  • 황지숙;정영기이태호
    • KSBB Journal
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    • 제8권4호
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    • pp.375-381
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    • 1993
  • 토양으로부터 세포외로 lipoxygenase inhibitor를 생산하는 균주를 screemng하여 우수한 저해능을 가지는 곰팡이 1균주 (L242H)를 분리하였고, 분리한 균주 L242H로부터 lipogenase inhibitor 생산조건을 검토하였다. 분리한 균주의 배양학적. 형태학적 특성을 조사해 본 결과 Penicillium속으로 동정되었다. Penicillium L242H의 플라스크 배양에 의한 lipoxygenase inhibitor 최적배양조건은 3.0% glucose, 0.4 % ammonium sulfate, 0.1 % potassium p phosphate (dibasic), 초기 pH 7.0이었고, 500ml용 shake flask에 배지 100ml를 넣어 8일간 배양했을 때 lipoxygenase inhibitor가 최대로 생산되었다.

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중온성 우모 분해균 Bacillus sp. SE-103의 분리 및 배양 조건 최적화 (Optimization of Conditions for Isolating and Cultivating Bacillus sp. Se-103 with a Mesophilic Feather-Degrading Activity)

  • 장형수;최일
    • 한국가금학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.343-350
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    • 2009
  • 본 연구는 박테리아에 의한 우모분의 이용 가능성을 조사 하기 위해 우모 keratin 분해 활성이 높은 균주를 분리한 후 keratinolytic protease 활성이 가장 우수한 효소 생산을 위한 최적 배양 조건을 조사하였다. SE-103 균주로 형태학적 생화학적 특성을 조사한 결과Bacillus sp.로 확인되어 Bacillus sp. SE-103으로 명명하였다. 최적 배지 조성은 glucose 3.0%, urea 0.4%, $NaNO_3$ 0.2%, KCl 0.15%였으며, 배양 조건은 초기 pH 6.0, 배양 온도 $35^{\circ}C$, 24시간 진탕 배양하였을 때, 효소 생산이 가장 우수하게 나타났다.

Bacillus subtilis에서 분비되는 Colletotrichum gloeosporioides 생장 저해물질 생산에 미치는 배양조건의 영향 (Effect of Culture Parameters on the Production of Growth Inhibitory Substance of Colletotrichum gloeosporioides from Bacillus subtilis)

  • 조수진;차병진;신광수
    • 한국균학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.138-141
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    • 2004
  • 고추 탄저병균 Colletotrichum gloeosporioides의 생장을 저해하는 물질을 생산하는 세균인 Bacillus subtilis의 각종 배양조건을 달리하여 최적 생산 조건을 조사하였다. 병원균 생장 저해물질 생산을 위한 배지의 초기 산도는 pH 7.0이 최적이였으며, 탄소원으로는 glucose를 첨가했을 경우 다른 탄소원에 비해 2배 이상 높은 활성을 보였다. 질소원으로는 유기 질소원일 경우 비교적 높은 병원균 생장저해활성을 보였으나, 무기 질소원인 ammonium sulfate에서 가장 높은 활성을 보였다. 여러 가지 배지를 사용하여 조사한 결과, LB(Luria Bertani) 배지의 배양액에서 가장 높은 활성이 나타났다.

Metarhizium anisopliae ARS 978의 대량 배양을 위한 배지 조건 (Selection of optimum medium for mass production of Metarhizium anisopliae ARS 978)

  • 문기혁;윤정원;윤철식;김승욱
    • 농약과학회지
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    • 제2권2호
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    • pp.90-96
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    • 1998
  • 곤충 병원균을 미생물 살충제로서 이용하기 위한 대량배양 기술을 확립코자 미생물 살충제로 잠재성이 있는 Metarhizium anisopliae var. majus ARS 978의 대량배양을 위해 액체배양 조건을 확립하였다. 최적배양을 위한 온도와 pH는 각각 $28^{\circ}C$와 pH 7.0 이었다. M. anisopliae ARS 978의 균체량, 효소들의 활성 및 포자의 생성에 1.0 %(v/v) molasses, 1.0%(w/v) 주박, 0.3 %(w/v) $CaCO_{3}$가 가장 적합한 최적배지 조건이었다.

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고호염성 Haloarcular sp. EH-1으로 부터 amylase 생산 (Amylase Production from Haloarcular sp. EH-1)

  • 정명주
    • 생명과학회지
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    • 제12권5호
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    • pp.570-576
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    • 2002
  • 천일염에서 분리된 고호염성균인 Hainrcular sp. EH-1 으로부터 amylase 생성을 위한 배양조건을 검토하여 최적조건을 설정하였다. 그 결과는 다음과 같다. 아밀라아제 생산을 위한 배양 조건은 4$0^{\circ}C$, pH 7.5이었으며, 최적 생육배지를 soluble starch 1.5%, yeast extract 1.0%, MgSO$_4$7$H_2O$ 2.0%, KCI 0.1%, NaCl 25%로 조성하여 500 $m\ell$ 삼각 플라스크에 100 $m\ell$ 씩 분주하여 110 rpm/min으로 진탕 배양시켰다. 생육과 효소활성은 9일 배양 후 최대치를 나타내어서, 균의 생육정도와 효소생산 사이에서 증식연관형을 나타내었다.

동치미에서 분리한 Lactobacillus sp. FF-3가 생산하는 bacteriocin의 최적 생산조건 (The Optimal Producing Conditions of Bacteriocin Produced by Lactobacillus sp. FF-3 Isolated from Korean Dongchimi)

  • 박진철;차재영;권오창;조영수
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제10권4호
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    • pp.554-559
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    • 2003
  • 동치미로부터 분리된 Latobacillus sp. FF-3의 Bacteriocin 생산에 대한 최적 배양조건과 배양 특성을 조사하였다. Bacteriocin 생산을 위한 최적 생산조건은 MRS(proteose peptone 1%, beef extract 1%, yeast extract 0.5%, glucose 2%, polysorbate 80 0.1%, ammonium citrate 0.2%, sodium acetate 0.5%, magnesium sulfate 0.01%, manganese sulfate 0.005%, dipotassium phosphate 0.2%) 배지를 기본으로 하여 21시간 배양한 결과, 배양온도는 30∼37$^{\circ}C$, 초기 pH는 7.0 으로 확인되었다. 최적 생산배지조성으로 탄소원은 glucose 3%, 질소원은 tryptone 4%, 무기염류는 manganese sulfate 0.005%가 bacteriocin 생성에 최적 조성으로 나타났으며, 최적 배지상에서 항균활성은 최대 484 BUf/mL로 나타났다.