The purpose of this research was to establish the culture condition for dissociated submandibu -lar gland (SG) cells. After trypsin digestion of SG from 3-4 weeks old mice, dissociated cells were cultured in 1OO/o fetal bovine serum-Dulbecco's modified Eagle's medium (FBS-DME) or 0.5-2% low protein serum replacement-DME (LPSR-DME) on plastic surface to form monolayer. The effects of FBS, LPSR and hormones on the growth and function of cultured SG cells were examined. SG cells dissociated by enzyme were successfully cultured and were characterized as epithelial-like cells by light and electron microscope. The maximal DNA synthesis of cultured SG cells was achieved by DME containing 5-10% FBS. The same results were obtained when the effects of LPSR on cell proliferation were examined up to a LPSR concentration of 2%. SG cells cultured in 20/o LPSR-DME expressed a population doubling time of 42.5 hrs and a saturation density of 1.2 $\times$10 5cell/cm$^2$. Dihydrotestosterone (DHT) in medium did not influence on the DNA synthesis of the cultured SG cells, but stimulated protein synthesis of the SG cells. Thyroxine (T4) stimulated protein synthesis of the SCI cells markedly in a dose-dependent fashion. EGF secretion by the cultured SG cells increased significandy by DHT and or T4 trearment. This finding indicated that secretion of EGF by the SG cells was under the control of the hormones such as androgen and thyroid hormones. It seems to be that the culture condition described here can be used as a useful tool for further research on the SCI cells.
Four species of water fleas (Daphnia magna, Daphnia pulex, Daphnia galeata, and Moina macrocopa) were examined for the clarification of their reproduction with culture conditions. The reproduction tests of water flea by the culture conditions were carried out. For the comparison of the reproduction rate, five media (manure-soil medium, DIN medium, M4 medium, EPA medium, fertilizer medium) were applied to determine the best medium. Daphnia magna, Daphnia pulex, and Moina macrocopa were appeared the best reproduction in the manure-soil medium at $20^{\circ}C.$ The lifespan and young reproduction were better in manure-soil medium than the others. But Daphnia galeata was lived for 34 days in the fertilizer medium at $20^{\circ}C.$ The culture of Daphnia galeata was difficult to rear than the other species. In the current study, the microcystin of Microcystis sp. did not particularly affect on the survival of water fleas. But the lifespan was short and the reproduction rate was low. Therefore water flea have a preference for Scenedesmus sp. than Microcystis sp. On the condition of the feeding Scenedesmus sp., all examined water fleas appeared to have the longest lifespan and the most young water fleas produced at any medium and temperature as compared with the feeding the Microcystis sp. For the culture temperature, the lifespan was longer on $20^{\circ}C$ than $15^{\circ}C$.
Immature embryogenesis is a useful process in wheat tissue culture, including transgenic technology, because of its high regeneration efficiency compared to that in other tissues. However, it is a very labor-intensive and time-restrictive method, because the preparation of immature embryos is limited to the optimal time after flowering. In this experiment, 'Speed Breeding', a breeding technique that accelerates breeding generation advancement by extending the photoperiod, was applied to the wheat variety 'Bobwhite'. A controlled growth room was constructed by adjusting the photoperiod (22-hour light/2-hour dark) using LED lights at temperature of 22℃. After vernalization of the Bobwhite seeds at 4℃ for 4 weeks, the seedlings were grown in a controlled growth room and a greenhouse to compare the heading date. In both conditions, calli were induced from immature embryos on the 11th day after flowering. After 4 weeks, the calli were transferred to a regeneration medium. Regeneration efficiencies under greenhouse conditions and Speed Breeding conditions were determined as 45.05% and 43.18%, respectively. Antioxidant enzyme activity and reference gene expression analysis were performed to confirm the presence of stress due to an extremely long-day photoperiod. As a result, the antioxidant enzyme activity was not distinguished from that of the greenhouse condition. The reference gene expression analysis revealed that the PsaA and CDC genes were highly expressed under the Speed Breeding condition. However, expression of PsbA was similar expression in both conditions. These results will provide useful information for the application of immature embryogenesis to the wheat transformation system.
The optimal culture condition of Bacillus sp. P16 was investigated for production of an extracellular endo-splitting chitosanase. The best carbon and nitrogen sources for the chitosanase production were chitosan and tryptone, respectively. The best condition for the maximum activity was at $37^{\circ}C$ in a medium containing 0.5% powdered chitosan, 1% tryptone, and 1% NaCl(at initial pH 7.0) in a rotary shaker(200 rpm). In a jar fermenter, the culture duration shortened to $6{\sim}12$ hr for maximum activity and the enzyme activity increased about 100% compared with that of flask culture.
White rot fungi, Phanerochaete sp. EJ-31L, was evaluated for its ability to decolorize Remazol Black B, an azo dye that is a widespread pollutant in the wastewater of textile industry. It was observed that extent of decolorization by Phanerochaete sp. EJ-31L was dependent on the concentrations of co-carbon and nitrogen source. Effects of agitation and aeration were studied, and agitated culture at aeration condition resulted in greater extent of decolorization than static culture. Remazol Black B was readily decolorized up to 95% within 64 hr by Phanerochaete sp. EJ-31L.
This study was conducted to determine the influence of cultural conditions such as temperature, time, water content, koji-thickness and agitation on the production of saccharifying amylase by Rhizopus sp. ZB9 isolated from Korean Nuruk during the preparation of rice koji, which is used in brewing Korean rice wines, Takju and Yakju. Rice kojies were made under different cultural conditions, and the saccharifying activities of each koji were tested. The temperature range suitable for the production of saccharifying amylase was $28{\sim}36^{\circ}C$. Based on the saccharifying activity and color, 60 hours of cultivation at $28^{\circ}C$ was believed to produce the optimum results. The water contents of steamed rice suitable for the production of saccharifying amylase were 35~40%. An increase in koji-thickness induced no adverse effects on the production of saccharifying amylase, but agitation-work during cultivation had a harmful effect.
The metabolites released from cultures of rhizosphere bacteria can inhibit plant growth. Bacillus subtilis IJ-31 inhibited plant growth by the production of hydrocinnamic acid (HCA). The production of HCA by plant-growth inhibiting rhizobacterium B. subtilis IJ-31 was optimized. $90.5\;{\mu}g/ml$ of HCA was obtained under the condition of 1% rice bran as carbon source, 0.5% tryptone as nitrogen source, 0.1% $ZnCl_2$ as metal source at $37^{\circ}C$ for 60 h (pH 7.0). The optimal condition for the HCA production by B. subtilis IJ-31 in the jar fermenter was established using response surface methodology (RSM) of statistical analysis system(SAS) program. The production of HCA by B. subtilis IJ-31 in the jar fermenter culture reached $102.99\;{\mu}g/ml$ when 2.24% soil extracts was added and agitation speed was 290 rpm under the same condition. And the experimental value of HCA production is $102.5\;{\mu}g/ml$ in the same culture condition. The production of HCA by B. subtilis IJ-31 is higher as 12% than that from the flask culture.
Effect of culture conditions on the fermentation of wheat flour solution by mixed lactic acid bacteria of Lactobacillus brevis, L. fermentum and L. plantarum was investigated. The optimum temperature for the fermentation of wheat flour solution was $35^{\circ}C$ because pH decreased the lowest value and TTA (total titrable acidity) increased the highest value at this temperature. In aerobic condition, fermentor was purged with air at 1.0 vvm and was purged with nitrogen gas at 1.0 vvm in anaerobic condition. The decrease of pH and the increase of TTA in aerobic condition were higher than those in anaerobic condition. In aerobic condition, the optimum condition of oxygen supply was found to be oxygen transfer rate coefficient of $60\;hr^{-1}$ which corresponded to agitation speed of 250 rpm in a 5 L fermentor. Repeated fed-batch cultures were performed using pH-stat in order to increase the productivity of fermented wheat flour. With increasing the repeated fraction of culture volume, mean cycle time increased but maximum operation time decreased. However, the volume of produced broth per culture volume per time and total volume of produced broth per culture volume were maximum at the repeated fraction of culture volume of 20%. In a repeated fed-batch fermentation of wheat flour solution using mixed lactic acid bacteria, the culture condition was optimum at temerature of $35^{\circ}C$, aeration rate of 1.0 vvm, oxygen transfer rate coefficient of $60\;hr^{-1}$, and repeated fraction of culture volume of 20%.
This study was conducted to identify the influences of light-to-nutrients ratio on the zooplankton and phytoplankton community. Various experiment conditions such as HL (high-light and without zooplankton), HLZ (high-light and with zooplankton), LL (low-light and without zooplankton), and LLZ (low-light and with zooplankton) were adjusted. Changes in biomass of phytoplankton species with the incubation time showed a similar tendency in the continuous cultures, but the change of species composition in the continuous cultures was detected. Cyanophyeeae (Phormidium sp.) seems to be affected by the existence of zooplankton. Also, the predominant species were Chlorophyceae (Staurastrum spp., S. dorsidentiferum, Coelastrum cambricam, Chlorella sp., Krichnerialla sp.) in a high-light environment and Bacillariophyceae (Melosyra granulata, Synedra acus, Fragilaria crotonensis) in a high-light environment. The estimated mean POC concentration (after twenty days) in a high-light environment was two times higher than that for a low-light environment. P : C ratio of seston component in a low-light environment was higher than that for a high-light environment. Changes in biomass of zooplankton species during the incubation time were higher than that for a high-light environment.
Porcine zygotes medium(PZM) 은 5%의 산소조건에서 체내생산 된 돼지초기수정란의 배 발달을 증가시킨다고 보고되었다 (Yoshioka 등, Biol. Reprod., 66:112-119, 2002). 본 실험에서는 NCSU23, PZM3 및 PZM4 의 배양액과 5% 및 20%의 산소조건이 돼지 체외수정란의 배 반포기까지 체외발달에 미치는 영향에 관하여 조사하였다. (중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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