본 연구는 양식산 뱀장어 Anguilla japonica의 인위적인 성성숙 처리시기와 번식률과의 상호 관련성을 확인하기 위해 5월(봄)부터 익년 1월(겨울)까지 각 계절별로 수행되었다. 실험어의 인공 성성숙 유도를 위해 암컷($400{\sim}600\;g$) 뱀장어에 salmon pituitary extraction (SPE, 20 mg/fish/week)를 매주 복강에 주사하여 인위적인 성성숙을 유도하였다. 호르몬 처리 $8{\sim}13$주 이후 대부분의 개체들은 난황형성이 완료되었고, $17{\alpha}$, $20{\beta}-dihydroxyprogesteron$ (DHP, $2\;{\mu}g/g$ body weight)를 주사하여 배란을 유도하였다. 수컷 뱀장어($200{\sim}350\;g$)는 human chronic gonadotropin (HCG, 1 IU/g body weight/week)을 매주 복강에 주사하여 정자형성 및 배정을 유도하였고, 이후 상기의 개체들에 대해 자연산란에 의한 수정 및 인공수정을 병행하였다. 배란율, 부상률, 수정률 및 부화율을 포함한 계절별 번식률에 있어서 봄과 여름($5{\sim}7$월)에 인공성성숙을 유도한 실험구가 다른 계절에 비해 높았다. 산란수와 부화 유생수 및 부화유생의 생존일수는 번식률과 유사한 경향을 나타내었다. 본 연구결과, 양식산 뱀장어에 있어서 호르몬 처리에 의한 인공성성숙유도의 시기는 자연계에서 주산란시기인 봄과 여름철이 적합함을 나타내고 있다. 따라서, 양식산 뱀장어의 적절한 인공성성숙시기는 배란율, 부상률, 수정률 및 부화율을 포함한 번식률에 의해 결정할 수 있다.
Vitellogenin 합성 메카니즘을 밝히기 위한 연구의 일환으로써, 뱀장어의 간세포배양계를 이용하여 Vg합성에 대한 $E_2$ 및 뇌하수체호르몬들의 영향에 대해 조사하였다. 일반적으로 어류를 비롯한 난생 척추동물들의 Vg은 $E_2$의 자극에 의해 간장에서 합성분비되어 지나 뱀장어 Vg은 $E_2$으로는 충분한 합성은 이루어지지 않았다. 그러나 $E_2$와 GH 및 PRL을 함께 첨가하면 Vg합성이 활발하게 유도되어 지는 것이 관찰되었다. $E_2$ 만으로 Vg이 합성되어지지 않는다면 세포내에 Vg합성 및 $E_2$ 의 활성을 억제하는 내인성 요소들이 있을 것으로 생각되어 세포를 8일간 호르몬 첨가없이 preculture하여 시행하였으나, $E_2$만으로 Vg합성은 유도되어 지지 않고 GH 및 PRL의 도움이 필요했다. 또한 $E_2$ 만으로 10일간 배양하여 장기간 $E_2$ 로 노출시켜 Vg합성에 대한 영향을 조사한 바, 약 10일간의 $E_2$ 노출에 의해 Vg합성은 전기영동상의 확인에 의해 양적으로 다소 증가하는 것이 관찰되었으나 $E_{2}+GH$ 및 $E_{2}+PRL$의 첨가에 비해 현저한 차이를 나타내어 뱀장어의 Vg합성 유도에는 뇌하수체 호르몬들이 직접 관련되는 것으로 나타났다. 또한 $E_{2}+GH+PRL$을 함께 첨가하여 6일간 배양하여 Vg이 왕성하게 합성되어 질때에도 계속해서 GH 및 PRL들이 필요한가를 조사하였는데, 3일간 관찰한 결과 Vg의 합성 정도는 GH 및 PRL등의 첨가유무에 커다란 차이를 나타내지 않았다.는 초기균수 $3.4{\times}10^3\;CFU/g$ 및 $3.4{\times}10^4\;CFU/g$에서 각각 $2.8{\times}10^4\;CFU/g$와$9.8{\times}10^5\;CFU/g$로 $1\~1.5-log-unit$가 증가하였다.평가는 0.005였다.5IU/ml의 배지에서는 대조구의 배란율과 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 $E_2$를 제외한 스테로이드와 HCG는 동자개의 난모세포 성숙과 배란을 in vitro에서 유도할 수 있으며, $17\alpha\;20\alpha\;OHP$와 HCG는 다른 스테로이드에 비해 높은 율의 난모세포 성숙과 배란을 유도하였다.체로 잘 일치하였다. 또한 진해만의 저서동물 군집의 전반적인 계절별 공간분포는 다양도 분석 결과에서도 분명하게 나타나고 있으며, 주로 퇴적물 내의 유기물 함량에 의해 영향을 받고 있음을 알 수 있었다., Chlorella sp., yeast를 rotifer에 먹이로 투여했을 때 $S\;\pi-I$에서 lysine이 가장 높았고, PSB, Chlorellaal sp. 순으로 분석되었다. yeast에서는 검출되지 않았다./TEX>, betaine류$(0.1\~0.9\%)$의 순이었다. 연어 엑스분중의 질소분포 특징은 모든 시료에서 공통적으로 anserine과 creatine이 중요한 함질소 성분으로서 엑스분 질소에 대한 양 성분질소의 비율은 anserine이 평균 $38\%$, creatine이 평균 $31\%$로서 이 두 성분만으로 엑스분질소의 $60.9\~76.5\%$에 달하였다. 분석된 성분에 의한
본 연구는 소에 있어서 다량의 수정란을 생산하여, 고능력의 유전인자를 조기에 확산할 수 있도록, 한우 공란우의 반복 과배란을 유도하여 안정적이고 효율적인 수정란 생산을 목적으로 실시하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 1. 한우 경산우 및 미경산우를 4회 반복적으로 과배란 처리하였을 때, 수정란 채란이 가능한 공란우는 $85.7\%,\;90.5\%,\;62.5\%,\; 100\%$였으며, 3회 처리시 다소 낮아, 약간의 유의차가 인정되었다(P<0.05). 2. 한우 경산우 및 미경산우를 4회 반복적으로 과배란 처리하였을 때, 수정란 회수는 각각 9.2개, 9.9개, 7.0개, 10.7개였으며, 이식 가능 수정란은 3.7개, 3.4개, 3.4개, 5.7개였다. 반복과배란 처리에 의한 이식 가능 수정란의 회수 율은 유의차가 인정되지 않았다. 3. 한우 공란우의 산차에 따른 수정란의 회수는 미경산우 6.0개였으며, $1\~4$산까지는 각각 8.7개, 11.4개, 9.9개, 7.6개였으며, 이식 가능 수정 란은 2.5개, 3.0개, 5.3개, 3.0개, 3.4개로 나타났으며, 미경산 및 1산차에서 약간 낮은 수준이었다(P<0.05). 이상의 결과로 한우 공란우는 경산우 및 미경산 우를 4회 연속 과배란 처리하여 수정란을 채취하여도 적정량의 수정란을 생산할 수 있었으며, 산차에 의한 수정란회수율에 있어서도 적정량의 수정란을 회수할 수 있으므로, 고능력의 한우 공란우를 알맞은 번식 및 사양관리를 통하여 유전능력을 최대한 이용할 수 있어, 수정란 이식 기술의 산업화를 안정적으로 시행할 수 있을 것으로 기대된다.
목 적: 동결-융해 배아이식은 보조생식술에서 환자들에게 보다 많은 임신의 기회를 제공해줄 수 있는 방법으로 이용되고 있다. 본 연구에서는 예후가 좋지 않은 환자들에서 동결-융해 배아이식의 효용성을 알아보고자 하였다. 연구방법: 나이가 많은 고령 환자군 (38~44세)과 신선주기 배아이식에서 임신 실패군을 연구대상으로 하였다. 과배란 유도를 통해 채취한 난자를 일반적인 체외수정 또는 세포질내 정자주입술을 시행하여 수정을 유도하고, 잉여의 전핵 또는 난할 시기의 배아를 완만동결법으로 동결하였다. 동결보관 배아는 급속융해법으로 융해하여 호르몬요법을 시행한 환자의 자궁에 이식하였다. 신선 배아이식과 동결-융해 배아이식 과정에서의 배아 상태, 임신율, 착상률 등을 통계적인 방법으로 분석하였다. 결 과: 나이가 많은 고령군에서 신선 배아이식을 시행한 환자들과 동결-융해 배아이식을 시행한 환자들의 평균 연령은 $40.0{\pm}1.8$세 (n=206)와 $39.9{\pm}1.9$세 (n=69)로 통계적으로 유의한 차이가 없었으나, 임상적인 임신율과 착상률은 동결-융해 배아이식에서 29.0%와 11.2%로 신선 배아이식의 16.5%와 7.0%에 비해 통계적으로 유의하게 높게 나타났다. (p<0.05). 첫 번째 신선 배아이식에서 임신 실패군의 연속되는 신선 배아이식 환자군 ($31.2{\pm}2.3$, n=40)과 동결-융해 배아이식 환자군 ($31.9{\pm}3.1$, n=119)에서의 평균 연령은 차이가 없었으며, 임상적 임신율 (42.5% vs 40.3%)과 착상률 (22.6% vs 18.8%)도 유사하였다. 결 론: 본 연구에서는 동결-융해 배아이식이 고령 환자들에서 효과적으로 임신율과 착상률을 높일 수 있음을 보여주고 있다. 이러한 결과는 과배란 유도에 따른 자궁의 착상 환경 변화가 고령 환자들에서 임신율과 착상률을 저하시키는 것과 관련이 있을 것으로 생각된다.
Therapy for anovulation represents one of the more gratifying and successful type of infertility management. Despite the introduction of bromocriptine, human menopausal gonadotropin (HMG), and gonadotropin releasing hormone (GnRH), clomiphene citrate remains the mainstay of ovulation induction therapy. There is wide variability in reported rates of ovulation induction (57-91%) and conception (25-43%) following clomiphene therapy. Factors contributing to this variability among different reports are the differences in dosage and duration of therapy, different criteria utilized in selecting patients for clomiphene therapy and different luteal phase parameters of presumptive ovulation. A review of recent experience with clomiphene citrate in the Department of Obstetrics and Gynecology in Seoul National University from January, 1983 to May, 1985 yields the following conclusions: 1. Ovulation rate per total patients treated was, 69.0% 2. Pregnancy rate per total patients treated was 31.7%, and that per total patients ovulated was 45.9%. 3. Ovulation rate at the dosage level up to 150 mg/day (50.3-53.8%) was somewhat higher than that at 200 mg/day or more (33.3-34.6%), and pregnancy rate per total patients treated was comparable at each dosage level. 4. Ovulation rate per total patients ovulated at each dosage level, where ovulation and conception occurred, showed a decreasing tendency as the dosage increased, but pregnancy rate per total patients conceived was comparable except at 200 mg/day. 5. Cumulative pregnancy rate per total patients conceived in each ovulatory cycle was 68.9% in 3 cycles, 88.9% in 4 cycles, and 100% in 6 cycles.
Exponential rise rate(ERR) of serum estradiol concentrations during active follicular phase was calculated for 49 ovulation induction cycles by human menopausal gonadotropin to know the ovulation induction outcome according to ERR classified into 3 groups with low, moderate and high ERR values(Group I${\leqq}$0.3, 0.3${\leqq}$0.6,Group III>0.6). The results were summarised as follows : 1. No significant difference in the dosage of human menopausal gonadotropin was identified in each group. 2. The mean serum estradiol concentration at the day of human chorionic gonadotropin injection in Group II and Group ill was significantly higher than that in Group I . 3. The mean diameter of leading follicles at the day of human chorionic gonadotropin injection showed no significant difference in each group. 4. No significant difference in the ovulation rate was observed in relation to ERR. How ever, 20% and 20.8% of pregnancy rate in Group I and Group II were achieved while no pregnancy was occurred in Group III. 5. The ovarian hyperstimulation frequency was significantly higher in Group ill that in Group I and Group II. In conclusion, the study suggests that exponential rise rate of serum estradiol is a useful tool in HMG ovulation induction by preventing ovarian hyperstimulation without reducing pregnancy success rate.
본 연구는 배란후 48시간째 회수된 난소로부터 황체세포를 체외배양 후 progesterone 분비에 대한 LH, IGF-1 및 TGF$\beta$첨가효과에 대해 검토하였다. 축산기술연구소에서 사육중인 돼지(체중 145$\pm$kg) 12두로부터 발정을 유도시켜 배란후 약 48시간째 도축하여 난소를 회수하였다. 회수된 난소로부터 황체를 분리하여 세절한 후 0.25% collagenase용액(0.025mg DNase, 50mM EDTA, 50mM Dithiothreitol)으로 37$^{\circ}C$의 진탕수조에서 30분간 배양하여 황체세포를 분리 회수하였다. 회수된 황체세포는 D-MEM 용액(GIBCO, 10% FCS와 antibiotics 첨가)으로 2회 세정하여 1$\times$$10^{6}$live cell/$m\ell$이 되도록 희석한 후 24 well culture plate(Coming, New Tork 14831)에 분주하여 $CO_2$ 배양기($CO_2$: 5%)에서 12시간 간격으로 배양액을 회수하였으며 48시간까지 배양하였다. 배양액 1$m\ell$당 LH, IGF-I 및 TGF$\beta$1을 단독 혹은 공배양하여 회수된 배양액내의 progesterone 농도를 RIA법으로 분석하였다. 돼지황체세포는 배양후 24시간째에 높은 농도의 progesterone이 측정되었으며 LH를 첨가한 대조구에 비해 유의적으로 높은 progesterone이 측정되었다. 또한 IGF-1 과 TGF$\beta$1을 첨가한 군에서도 높은 농도의 progesterone이 측정되었다 그러나 TGF$\beta$ 혹은 IGF-I 단독으로는 대조구의 결과와 큰 차이가 없었다 따라서 돼지 황체세포에서의 progesterone 분비는 TGF$\beta$ 및 IGF-I 그리고 LH의 황체세포의 progesterone 분비기능을 촉진하는 것으로 나타났다.
The intrafo1licular echoes of cumulus oophoruses within ovarian follicles were assessed with the use of ultrasound in 86 women taking part in an in vitro fertilization(IVF) or gamete intrafallopian transfer(GIFT) program, stimulated with pure follicle-stimulating hormone(FSH)/human menopausal gonadotropin(hMG)/human chorionic gonadotropin (hCG). When intrafo1licular echoes were clearly separated from the follicular wall or relatively dispersed within the follicle, they were considered to be a dissociated cumulus, and when they were only slightly prominent from the follicular wall, they were suspected to be a nondissociated cumulus. A cumulus was seen in 62.1% of the follicles larger than 10 mm diameter and 75.1% of them were dissociated. The larger the follicles in size, the more the cumuluses in number and dissociation. The number of follicles and intrafollicular echoes per woman was not different whether or not she would be pregnant, but the number of dissociated cumuluses was significantly more in pregnant women. The number of observed dissociated cumuluses correlated significantly with the number of recovered mature oocytes. When an intrafollicular echo is seen, it can be taken as evidence of a sign of maturity of that particular follicle and oocyte. Ultrasonographic monitoring of intrafollicular echoes and follicular size is very helpful to predict follicular maturation in ovulation stimulation cycles.
Polycystic ovarian syndrome (PCOS) patients have a characteristic of high leuteinizing hormone (LH) to follicle -stimulating hormone (FSH) ratio. Usually, human menopausal gonadotropin (hMG) is used to induce ovulation in clomiphene citrate-resistant PCOS patients. However, HMG contains two components, namely, LH and FSH, with 50%, respectively. Therefore, FSH is theoretically recommended to stimulate follicular maturation. From the pituitary, LH is secreted by pulsatile pattern. So, we have been using intermittent subcutaneous injection of pure FSH for ovulation induction in 10 PCOS patients from March, 1990 to August, 1992. We obtained good results by intermittent subcutaneous injection of pure FSH. Ovulation is 100% per patient, and 88.2% per cycle. Pregnancy rate is 80% per patient, and 23.5% per cycle. Ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) is 50% per patient, 41.2% per all cycles, and 46.7% per all ovulated cycles. In comparison with HMG, pregnancy rate per cycle is relatively low. But, ovulation rate and pregnacy rate per person is higher than HMG. Because of the strict check of ovaries by the vaginal ultrasonography, OHSS rate is relatively high.
This study aims to investigate how ovulation induction of sevenband grouper, Epinephelus septemfasciatus varies when treated with different hormonal substances such as ovaprim, pimozide, LHRHa, and HCG. As for LHRHa, we injected it in different concentrations: $50{\mu}g/kg$, $100{\mu}g/kg$, $150{\mu}g/kg$, and $200{\mu}g/kg$. All hormonal substances including LHRHa were injected into back muscles. As a result, ovulation occurred in all sample groups. The sample group injected with HCG released the largest amount of eggs, and the dimeter of eggs and oil globules were also significantly bigger than those of others. Fertilization rate, embryonic survival rate, and hatching rate were the highest in a LHRHa ($100{\mu}g/kg$) +pimozide ($1,000{\mu}g/kg$) group and buoyant rate in a LHRHa group. Ovulation rate was 100% when LHRHa was injected in different concentrations. The largest amount of eggs was released in $200{\mu}g/kg$. The diameter of eggs and oil globules were the biggest in $200{\mu}g/kg$ and the smallest in $50{\mu}g/kg$. Fertilization rate showed no significant difference through all different levels of concentration: 94.6-95.3%. Buoyant rate was the highest in $100{\mu}g/kg$ and embryonic survival rate and hatching rate in $150{\mu}g/kg$. Based on these experimental results, we concluded that LHRHa in $100{\mu}g/kg$ is the most efficient for the ovulation induction of sevenband grouper.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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