A single phase composter was constructed by modifying the conventional mixer of sawdust for the cultivation of oyster mushroom Pleurotus ostreatus. The machine was designed on the basis of 3-phase-1 system which was controlled in prewetting, pasteurization and fermentation processes. In composting 200 kg of straw and cotton waste in the machine, it took 20 minutes in prewetting step and also to hours at $65^{\circ}C$ in pasteurization process. Postfermentation by aerothermophiles was completed by treating the compost at $45^{\circ}C-50^{\circ}C$ for 48 hours which was shorten 24 hours from the conventional method. In the postfermentation at high temperature, forced aeration and/or vigorous mixing process(es) played a great role in the improvement of spawn quality. The growth of mycelium of oyster mushroom was excellent in the culture combinated with 3 parts of surface inoculation and 7 parts of mechanical mixing.
The study investigated the biochemical methane potential (BMP) assay of cellulose supplementing with mixed methanogens and cellulolytic bacteria to improve anaerobic digestion for methane production. For the BMP assay, 7 different microbial supplementation groups were consisted of the cultures of mixed methanogens (M), Fibrobacter succinogenes (FS), Ruminococcus flavefaciensn (RF), R. albus (RA), RA+FS and M+RA+FS including control. The cultures were added in the batch reactors with the increasing dose levels of 1% (0.5 mL), 3% (1.5 mL) and 5% (2.5 mL). Incubation for the BMP assay was carried out for 40 days at $38^{\circ}C$ and anaerobic digestate obtained from an anaerobic digester with pig slurry as inoculum was used. In results, 5% FS increased total biogas and methane production up to 10.4~22.7% and 17.4~27.5%, respectively, compared to other groups (p<0.05). Total solid (TS) digestion efficiency showed a similar trend to the total biogas and methane productions. Generally the TS digestion efficiency of the FS group was higher than that of other groups showing at the highest value of 64.2% in the 5% FS group. Volatile solid (VS) digestion efficiencies of 68.4 and 71.0% in the 5% FS and the 5% RF were higher than other groups. After incubation, pH values in all treatment groups were over 6.4 indicating that methanogensis was not inhibited during the incubation. In conclusion, the results indicated that the hydrolysis stage for methane production in anaerobic batch reactors was the late-limiting stage compared with the methanogenesis stage, and especially, as the supplementation levels of F. succinogenes supplementation increased, the methane production was increased in the BMP assay compared with other microbial culture addition.
The proteins in whey are separated and used as food additives. The remains (mainly lactose) are spray-dried to produce sweet whey powder, which is widely used as an additive for animal feed. Sweet whey powder is also used as a carbon source for the production of valuable products such as polysaccharides. Glucose, fructose, galactose, and sucrose as asupplemental carbon source were evaluated for the production of PS-7 from Azotobacter indicus var. myxogenes L3 grown on whey based MSM media. Productions of PS-7 with 2% (w/v) fructose and sucrose were 2.05 and 2.31g/L, respectively. The highest production of PS-7 was 2.82g/L when 2% (w/v) glucose was used as the carbon source. Galactose showed low production of PS-7 among the carbon sources tested. The effects of various carbon sources addition to whey based MSM medium showed that glucose could be the best candidate for the enhancement of PS-7 production using whey based MSM medium. To evaluate the effect of glucose addition to whey based media on PS-7 production, fermentations with whey and glucose mixture (whey 1, 2, 3%; whey 1% + glucose 1%, whey 1% + glucose 2% and glucose 2%, w/v) were carried out. Significant enhancement of PS-7 production with addition of 1% (w/v) and 2% (w/v) glucose in 1% (w/v) whey media was observed. The PS-7 concentration of 2% glucose added whey lactose based medium was higher than that of 1% glucose addition, however, the product yield $Y_{p/s}$ was higher in 1% glucose added whey lactose based MSM medium. Therefore, the optimal condition for the PS-7 production from the Azotobacter indicus var.myxogenes L3, was 1% glucose addition to 1% whey lactose MSM medium.
The enzymatic degradation of xylans is the most versatile way to obtain the high value-added functional compounds or the fermentable sugars for renewable energy. The endo-${\beta}$-xylanases are the major enzymes which hydrolyze the internal ${\beta}$-1,4-linkages of xylan backbones to produce the mixtures of xylooligosaccharides including xylobiose and xylotriose. Among them, glucuronoxylanase GH30 can exclusively hydrolyze the internal ${\beta}$-1,4-linkages of xylans decorated with methylglucuronic acid branches. In the present study, two xylanolytic enzyme (PaXN_10 and PaGuXN_30) genes were cloned from Paenibacillus amylolyticus KCTC 3005, and expressed in Escherichia coli, respectively. PaXN_10 (38.7 kDa) belongs to the endo-${\beta}$-xylanases GH10 family, while PaGuXN_30 (58.5 kDa) is a member of glucuronoxylanase GH30. They share the same optimal reaction conditions at $50^{\circ}C$ and pH 7.0. Enzymatic characterization proposed that P. amylolyticus can utilize the hardwood glucuronoarabinoxylans via the cooperative actions of xylanases GH10 and GH30. The extracellular PaGuXN_30 is secreted into the medium and hydrolyzes glucuronoarabinoxylans to release a series of aldouronic acid mixtures with a methylglucuronic acid branch. The resultant products being transported into the microbial cell are successively degraded into the smaller xylooligosaccharides by the intracellular PaXN_10, which will be utilized for the cellular metabolism.
Galactose joined to glucose by a $\beta(1\rightarrow4)$ glycosidic bond makes lactose and this disaccharide is rich in milk. It is known that lacotse is hydrolyzed to each monomeric sugar by either lactase in human or $\beta-galactosidase$ in bacteria. Ingestion of milk by lactase-deficient persons causes a temporary diarrhea and subsequent chronic diarrhea results in colitis with chronic inflammation. We isolated a $\beta-galactosidase$ producing psycrotolerant strain AS-20 from near cattle shed and investigated the growth at various temperature conditions. Whereas Escherichia coli strains did not grow at $10^{\circ}C$, the AS-20 strain could grow well at this low temperature and showed optimal growth at $30^{\circ}C$. The isolated strain was identified as 97% Hafnia alvei by biochemical properties. This strain could ferment glucose, lacotse, maltose, mannitol, xylose, ONPG, rhamanose and L-arabinose, and decarboxylate lysin and ornithine. To confirm the identity of isolated strain we amplified 16S rDNA by PCR and searched similarity of the 1426 bp DNA sequcence with Genbank database. The strain AS-20 showed 99% similarity with Hafnia alvei. The activity of $\beta-galactosidase$ was 1.5 times higher when the cell was grown at 10 or $20^{\circ}C$ than at $30^{\circ}C$. The highest enzyme activity of AS-20 was also much higher than that of E. coli, which was grown at $30^{\circ}C$.
Nowadays many people use antibiotics to protect processed foods from many pathogenic bacteria. The abuse of antibiotics, however, can run the risk of creating resistant forms of bacterium. Our study focus is on making new substances that can not only replace antibiotics but also be friendly to the environment. In our experiments, we used fermented citrus fruit, soil microbes and coenzyme Q10 as probiotics and prebiotics. Chickens in the experimental group were fed these substances via oral route while those in the control group were not. After specific time periods, blood and feces samples were collected to test for Salmonella spp.. It is interesting that fermented citrus fruit was the most effective in suppressing this bacterium. Furthermore, dissection of the experiment group chickens shows that their livers did not change to a yellow color, in contrast to the control group. The results confirmed our proposal that the chickens fed with these materials can be protected from infection by Salmonella and other pathogens. These probiotics and prebiotics are highly practical because they are natural substances that can be easily recycled in the environment. It can also be used as an animal feed ingredient because of its safety.
As one of the mucous components of Cheonggukjang, traditional fermented soybean paste, $\gamma$-PGA is a natural substance with diverse functions. In this paper, an in-vivo experiment has been performed using NC/Nga mice in order to find out the efficacy of $\gamma$-PGA in human atopic dermatitis. The NC/Nga mice with BMAC-induced atopic dermatitis were administered $\gamma$-PGA (PGA-HM) with 300 kDa and low-molecular $\gamma$-PGA (PGA-LM), respectively. As a result, a significant decrease in clinical skin severity score was detected in the group that was administered PGA-LM. In terms of serum IgE levels, a significant decline was observed in PGA-LM, compared to the control group. The serum IgG1 levels also decreased more in PGA-LM than in the control group. However, no significant difference was observed in both groups. To witness the induction of $CD4^+CD25^+foxp3^+$ Treg cells, mRNA was sampled from the back of PGA-HM- and PGA-LM-administered NC/Nga mice with atopic dermatitis. In terms of the production amount of foxp3 mRNA, which was measured in real-time PCR, the group that was administered PGA-LM was twice as high as the control group. According to a biopsy on the skin on the backs of the mice, the experimental group was also far lower than the control group in terms of epidermis thickness, mast cell infiltration and the number of $CCR3^+$ cells. Therefore, it has been confirmed that the atopic dermatitis symptoms decreased more in the PGA-LM-administered NC/Nga mice than the PGA-HM-administered group by facilitating $CD4^+CD25^+foxp3^+$ Treg cells and suppressing the activity of eosinophils and production of IgE and pro-inflammatory cytokines.
D-Tagatose production from D-galactose was investigated using 35 type strains of American Culture Type Collection (ATCC) and Korean Collection for Type Cultures (KCTC) which have potential to produce D-tagatose. Enterobacter agglomerans ATCC 27987 was selected as a D-tagatose producing strain due to its short fermentation time and high production of D-tagatose. Optimization of the culture conditions for D-tagatose production by E. agglomerans ATCC 27987 was performed. Among various carbon sources, D-galactose was the most effective carbon source for D-tagatose production. As the D-galactose concentration was increased, cell growth and D-tagatose production increased. Effect of nitrogen sources on D-tagatose production was studied. Of inorganic nitrogen sources, ammonium sulfate was effective one for D-tagatose production and yeast extract was the most suitable organic nitrogen nutrient. The concentrations of inorganic compounds such as KH$_2$PO$_4$, K$_2$HPO$_4$, and MgSO$_4$$.$7H$_2$O were also optimized for D-tagatose production. The optimal medium was determined to contain D-galactose of 20 g/l, yeast extract of 5.0 g/l, (NH$_4$)$_2$SO$_4$ of 2.0 g/l, KH$_2$PO$_4$ of 5.0 g/l, K$_2$HPO of 5.0 g/l, and MgSO$_4$$.$7H$_2$O of 5 mg/l. The optimal environmental conditions in a 250-$m\ell$ flask were found to be pH of 6.0, temperature of 30$^{\circ}C$, and agitation speed of 150 rpm. D-tagatose of 0.41 g/l could be obtained in 24 h from 20 g/l D-galactose at the optimal culture condition without induction and cell concentration.
The study analyzed the effects of salt concentration [high salt (HS) and low salt (LS)] and sodium nitrite ($NaNO_2$), which are typically utilized in Korean processing facilities, on fatty acid composition, free amino acids, microbial counts and sensory characteristics of processed dry-cured ham. Four different treatments were considered: three hams (11.30 kg) salted with 92 g/kg salt (w/w) (HS), three hams (10.65 kg) treated with HS and 100 ppm $NaNO_2$ (HS+$NaNO_2$), three hams (11.42 kg) salted with 62 g/kg salt (w/w) (LS), and three hams (10.62 kg) treated with LS and 100 ppm $NaNO_2$ (LS+$NaNO_2$). Fatty acid composition analysis revealed significantly (p<0.05) higher saturated fatty acid and lower (p<0.05) unsaturated fatty acid in the HS+$NaNO_2$ group compared with the other groups. Glutamate, alanine and lysine free amino acids were higher than the other free amino acids. The processing conditions did not significantly affect the free amino acids of biceps femoris muscles, except for the proline content (p>0.05). In sensory evaluation, the fermentation aroma of the LS group was higher than that of the HS group. The aerobic counts consistently ranged from from $2.3{\times}10^2$ to $1.11{\times}10^4$ CFU/g. Escherichia coli including strain O157:H7, Staphylococcus aureus, and Salmonella spp. were not detected.
A continuous fermentation process was carried out to enhance hyaluronic acid (HA) production using Streptococcus zooepidemicus cells. During the 1st stage continuous operation from 8 h with a dilution rate of 0.029/h (D1), HA was produced in the range of 7.5-10 g/l. During the 2nd stage from 44 h with a dilution rate of 0.036/h (D2), HA production (8.28 g/l) was initially reduced to a small extent due to increase of dilution rate from D1 to D2, and then a new pseudo-steady state was formed within a few hours with a concurrent small variations of HA production. The HA amount produced during the latter part of the 2nd stage was stably maintained in the range of 8.28-9.48 g/l, about 4.7% less amount compared to the 1st stage. Due to 24% increase of dilution rate from D1 to D2, however, maximum volumetric productivity (DP) amounting to 0.341 g/l/h was obtained at 96 h during the 2nd stage. This maximum productivity obtained from the continuous culture turned out only a small increase (3%) as compared to the corresponding batch fermentation. However, it should be noted that, in the case of batch process, one run typically consists of serial stages of growth culture plus one final production culture. This implies that, if the continuous fermentation that practically needs no dead time necessary for the multi-stage growth cultures is run for longer period, the total amount of the accumulated HA would be far greater than the amount obtained from the corresponding batch culture performed for the identical period.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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