The purpose of this study was to determine the inhibitory effect of a glycoprotein isolated from Cudrania tricuspidata Bureau (CTB glycoprotein, 75 kDa) on immunoglobulin E (IgE)-induced allergic inflammation in RBL-2H3 cells. This experiment evaluated the production of intracellular reactive oxygen species (ROS), the activities of mitogenactivated protein kinase (MAPK), transcription factor (c-jun), and cyclooxygenase (COX)-2, and histamine release in cells. The results showed that the CTB glycoprotein inhibited histamine release and COX-2 expression induced by IgE in the cells. The CTB glycoprotein also had suppressive effects on the expressions of ERK1/2, p38 MAPK, c-jun, and the production of intracellular ROS in IgE-treated RBL-2H3 cells. The activities of c-jun and COX-2 were collectively blocked by ERK1/2 inhibitor (PD98059) and p38 MAPK inhibitor (SKF86002), respectively. Hence, we speculate that CTB glycoprotein might be a component with potential use in the preparation of health supplements for the prevention of allergic diseases.
The objective of this study was to evaluate the effects of glycoprotein isolated from Morus indica L. (MIL) on plasma cholesterol levels and on the activities of hepatic detoxicant enzymes in ICR mice. MIL glycoprotein evidenced good scavenging activities against lipid peroxyl radicals. When the mice were treated with Triton WR-1339, the levels of total cholesterol (TC) and low-density lipoprotein (LDL)-cholesterol in plasma increased significantly by 53.9 and 47.5 mg/dL, respectively, as compared to the controls. However, when pretreated with MIL glycoprotein $(100{\mu}g/mL)$, ICR mice showed marked reductions to 55.4 and 47.0 mg/dL, as compared to Triton WR-1339 treatment alone. Interestingly, high density lipoprotein cholesterol levels were unchanged. These results indicate that the MIL glycoprotein is capable of scavenging lipidperoxyl radicals, lowering plasma lipid levels, and increasing the activities of detoxicant enzymes in the mouse liver.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.25
no.2
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pp.240-248
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1996
To clarify the potentiality of sea cucumbers as dietary food, the effects of those glycoprotein on dietary proteins and physicochemical properties of those proteins were studied. Crude glycoprotein was efficiently extracted using 20mM sodium phosphate beffer(pH 7.0) and by salting out with 80% ammoniym sulfate saturation. The fractions obtained through the DEAE-cellulose ion exchange chromatography was identified as glycoprotein by Schiff's reagent and SDS polyacrylanide gel electro-phoresis. The yields of each glycoprotein from the three kinds of sea cucumbers were 0.814(red), 0.184(blue) and 0.232(black) and the molecular weights of the glycoproteins subunits were ranged from 20,000 dalton(blue and black) to 29,000 dalton(red), respectively. The electrophoretic patterns of the glycoprotein isolates were similar to each other and any significant difference in amino acid pattern was observed. Predominant arnino scids were Asx(aspartic acid and asparagine) and Glx(glutamic acid and glutamine) ; in contrast, histidine and methionine were below 2% as compared to total amino acids. water holding capacities of the glycoprotein isolates from red, blue and black cucumbers were equally 100% and emulsion activities ranged from 53% to 64%. In addition the emulsion stabilities were 7.04, 1.37 and 2.44, respectively. In vitro digestibility of some proteins(casein, SPI and squid) was decreased as increasing the level of the freeze dried sea cucumber powder and glycoprotein isolates. But squid protein was not affected.
본 연구에서는 $CD4^+$ T 세포를 일회성으로 감염시킬 수 있고 $CD4^+$ T 세포에 HIV-1 envelope 유전자를 전달할 수 있는 바이러스 입자를 생산하는 HIV-1 complementation system을 개발하였고 이 system을 이용하여 $CD4^+$ T 세포에 선택적으로 HIV-1 envelope 당단백질을 발현시켰다. 이 system은 Gag/Gag-Pol expressor와 Env expressor로 구성되어있다. Gag/Gag-Pol expressor는 바이러스 입자 생산에 필요한 구조단백질과 기능단백질을 발현시키지만 packaging signal이 결핍되어 바이러스 입자로 유전자가 들어가지 못하도록 제조되었다. Env expressor는 Tat, Rev와 envelope 당단백질을 발현시키고 packaging signal을 갖고 있어 바이러스 입자로 envelope 유전자가 들어가도록 제조되었다. Gag/Gag-Pol expressor로부터 Gag와 Gag-Pol의 발현은 Rev 단백질을 요구하였고 Env expressor로부터 Rev 단백질 이 제공될 때 Gag와 Gag-Pol 단백질은 효율적으로 발현되었다. Gag/Gag-Pol과 Env expressor로 cotransfection된 COS-1 세포에서 $CD4^+$ T 세포를 일회성으로 감염시킬 수 있는 바이러스 입자가 생산되었다. 생산된 바이러스 입자는 $CD4^+$ T 세포에 HIV-1 envelope 유전자를 전달하여 envelope 당단백질을 발현시켰고 복제 가능한 자손 바이러스의 생성을 유도하지 못하였다. 본 연구에서 개발된 방법은 $CD4^+$ T 세포에서 envelope 당단백질의 기능을 분석하고 관심 있는 유전자를 $CD4^+$ T 세포에 전달하는 바이러스 입자의 생산에 이용할 수 있다.
근세포 융합에 있어서 당단백질의 역할을 세포내 glycosylation의 저해제인 tunicamycin을 이용하여 검토하였다. 근세포가 읖합하기 전 여러 시기에 tunicamycin을 0.04091m숙 농도로 처리하면 세포내 glycosylation과 근세포 융합은 크게 감소되지만, 단백질 합성률과 creatine kinase 활성은 별로 변하지 않는 점으로 미루어 보아 근세포 표면의 당단백질은 세포간의 recognition과 adhesion에 관여하는 것으로 추정할 수있었다. 따라서, 표지된 Con A 염색법을 써서 근세포 원형질막의 당단백질의 변화를 검토해 본 결과 tunicamycin을 처리한 경우 원형질막 당단백질의 대부분이 감소됨을 볼 수 있었으며, 아울러 근세포내 단백질의 분해속도는 증가하고 fibronectin은 감소하는 현상을 관찰할 수 있었다. 한편, fibronectin(20 ug/ml) 을 tunicamycin과 같이 처리한 경우에는 융합이 억제되지 않았다. 이상의 결과들은 tunicamycin이 근세포가 adhesion하는데 필요한 세포막표면의 fibronectin의 유용성을 감소시킴으로써 근세포의 융합을 억제할 가능성을 제시하는 것이다.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.4
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pp.917-923
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1999
To confirm therapeutic functionality of Urechis unicinctus which have been favored as a special seafood in Korea, the antitumor and immunological effect of those glycoprotein were studied. 4mg/kg dose of glycoprotein from Urechis unicinctus was most effective in solid tumor growth inhibition (43.63%) of sarcoma 180 cells. However, in case of mice injected with more than dose of 20mg/kg, tumor growth was not inhibited. The higher prolongation ratios were achieved at levels of 2mg/kg with 31.2% and 4mg/kg with 28.9%. The cytotoxic effect of glycoprotein on sarcoma 180 cells was increased slightly as administering level was increased. Number of total peritoneal exudate cells in all the glycoprotein administered groups increased remarkably meaning that Urechis unicinctus gly coprotein could help to improve immunity. Notable body weight change was not resulted in the glycoprotein treated mice compared with control group, but the ratios of both liver or spleen to body weight were increased in mice injected with 20mg/kg and 40mg/kg. These results suggest that the glycoprotein from Urechis unicinctus could stimulate immunity of the mouse bearing tumor cells. Furthermore, the number of leucocytes was also increased by 38.78% at the dose of 20mg/kg and by 46.30% of control at 40mg/kg, while the lower level of 2mg/kg or 4mg/kg showed no effect in increasing leucocyte number. The biochemical values such as GOT and GPT in serum were not changed in mice injected with glycoprotein in comparision with control group.
Glycoprotein (60 kDa) isolated from Ficus Carica Linnoeus (FCL glycoprotein) was examined by evaluating its hypolipidemic effects on plasma cholesterol levels and hepatic detoxicant enzyme activities in ICR mice. FCL glycoprotein $(100{\mu}g/mL)$ had strong scavenging activities (38%) against lipid peroxyl radicals. When mice were treated with Triton WR-1339 (400 mg/kg), levels of total cholesterol (TC) and low-density lipoprotein (LDL)-cholesterol in plasma significantly increased by 53.9 and 47.5 mg/dL, respectively, compared to the control, whereas, when pretreated with FCL glycoprotein $(100{\mu}g/mL)$, decreased remarkably by 55.4, and 47,0 mg/dL, compared to Triton WR-1339 treatment alone. Interestingly, high-density lipoprotein (HDL)-cholesterol level did not change. Body and liver weights did not change significantly after Triton WR-1339 treatment in presence of FCL glycoprotein. FCL glycoprotein $(100{\mu}g/mL)$ stimulated activities of antioxidative detoxicant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx), whereas GPx activity significantly increased compared to the control. These results suggest FCL glycoprotein has abilities to scavenge lipid peroxyl radicals, lower plasma lipid levels, and stimulate detoxicant enzyme activity in mouse liver.
Ephedra sinica Stapf, known as a medicinal plant, inhibited not only syncytium formation, but also trafficking of viral glycoprotein, hemagglutinin-neuramidase (HN) to the cell-surface. Trafficking of viral glycoprotein to the surface of infected-cells results in syncytium formation in Newcastle disease virus (NDV)-infected baby hamster kidney (BHK) cells. Viral glycoprotein in the infected-cell is processed within the endoplasmic reticulum during routing into surface. The processing of viral glycoprotein like a N-linked oligosaccharide trimming by ${\alpha}$-glucosidase in cell is necessary for virus infection. Methanol extracts showed inhibitory activities ($IC_{50}$$15{\mu}g/mL$) against ${\alpha}$-glucosidase. This suggested that E. sinica extracts inhibited the cell-surface expression of NDV-HN glycoprotein without significantly affecting HN glycoprotein synthesis in NDV-infected BHK cells.
Trafficking process of viral glycoprotein to cell surface results in the syncytium formation when baby hamster kidney (BHK) cells was infected by Newcastle disease virus (NDV). Rhus chinensis gall, well-known as a medicinal plant, inhibited not only syncytium formation, but also trafficking of glycoprotein, hemagglutinin-neuramidase (HN) to the cell-surface. Modification of viral glycoprotein is processed within the endoplasmic reticulum and golgi body during trafficking into surface. R. chinensis gall extracts showed the strong inhibitory activities ($IC_{50}$$12.5{\mu}g/mL$) against ${\alpha}-glucosidase$, when compared with the ${\beta}-glucosidase$. And this inhibitory activities is increased by the samples in a dose-depedent pattern. These data showed that the extracts of R. chinensis gall inhibited the cell-surface expression of NDV-hemagglutinin-neuramidase glycoprotein without significantly affecting HN glycoprotein synthesis in NDV-infected BHK cells.
The present study investigated anti-oxidative and anti-inflammatory activity of glycoprotein isolated from Morus Indica Linne (MIL glycoprotein). We found that MIL glycoprotein has a molecular weight of 32 kD and consists of carbohydrate (40.03%) and protein (59.97%), and that it has a strong scavenging activity against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical $({\cdot}OH)$, and superoxide anion $(O_2{\cdot}\;^-)$ radicals. In addition, MIL glycoprotein had a stable character and an optimal DPPH radical scavenging activity in the alkaline and neutral pH solution, and up to at 105. However, the results indicated that it has a minimal scavenging activity in the metal ionic solution ($Ca^{2+}$, $Mn^{2+}$, and $Mg^{2+}$) in the presence of EDTA. In addition, we further investigated whether MIL glycoprotein scavenges oxygen radicals and blocks inflammation-related signals in the bisphenol A (BPA)-stimulated Raw 264.7 cells. The results in this study showed that it has a character to scavenge the productions of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) dose-dependently. Also it blocked the activities of inflammation-related signals such as nuclear factor-kappa B ($NF-{\kappa}B$) and inducible nitric oxide synthase (iNOS). For example, it had an inhibitory effect on the activation of $NF-{\kappa}B$ (p50) and iNOS proteins at 200 ${\mu}g/mL$ MIL glycoprotein. Here, we speculate that MIL glycoprotein is one of natural antioxidants and of modulators of the BPA-induced inflammation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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