$AF_2$를 0%(control), 0.04%(group I), 0.2%(group II) 첨가(添加)한 식이(食餌)를 4주간(週間) 동안 백서(白鼠)에 투여하여 체중(體重)의 변화(變化), 최종기간(最終期間)의 장기중량(臟器重量), 혈청(血淸) 및 간(肝) 조직내(組織內) 지질구성(脂質構成) 중(中) cholesterol, phospholipid, triglyceride를 정량비교(定量比較) 관찰(觀察)하여 다음과 같은 결론(結論)을 얻었다. 1. 체중변화(體重變化) : 대조군(對照群)과 I, II 군(群)의 체중변화(體重變化)에서는 거의 차이(差異)가 없었다. 2. 장기중량(臟器重量) : 장기(臟器) 중(中) 간(肝) 중량(重量)만이 대조군(對照群)에 비(比)해 I, II 군(群)이 모두 높았으며, 비(脾), 심(心), 신(腎), 등(等)은 유의(有意)한 차(差)가 없었다. 3. 혈청내(血淸內) 지질(脂質) 변화(變化) : 대조군(對照群)에 비(比)해 I, II 군(群)의 phospholipid 함량(含量)은 낮아지고, cholesterol, triglyceride 함량(含量)은 I, II 군(群)이 비례적(比例的)으로 높아지는 경향(傾向)을 보였다. 4. 간(肝) 조직내(組織內) 지질(脂質) 변화(變化) : 대조군(對照群)에 비(比)해 I, II 군(群)의 phospholipid, triglyceride, 함량(含量)은 변화(變化)가 없으나, cholesterol 함량(含量)만이 I, II 군(群)이 비례적(比例的)으로 높아졌다. 이상(以上)의 결과(結果)로써 $AF_2$가 백서(白鼠)의 간(肝) 중량(重量) 및 cholesterol 함량(含量)에 유의(有意)할 만한 변화(變化)를 일으킴을 발견(發見)할 수 있으며, II 군(群)이 I 군(群)에 비(比)하여 현저(顯著)하게 높음을 알 수 있는 것으로 미루어 보아 최소한(最小限) 간(肝)에 독성(毒性)으로 작용(作用)한다고 생각(生覺)된다.
홍삼분말이 $B(\alpha)P$의 투여에 의한 간 독성이 유발된 생쥐에서의 글루타치온 및 과산화지질 함량, 항산화효소 활성에 미치는 영향을 살펴보았다. $B(\alpha)P$ 투여에 의해 증가된 혈청내 ALT와 AST의 활성이 홍삼분말 전 처리군에서는 감소하였다. 간 조직중의 글루타치온 함량은 $B(\alpha)P$ 단독군에서는 감소되었다가 홍삼분말 투여시 유의적인 증가를 보였고, 지질과산화물 함량은 $B(\alpha)P$ 투여시 증가되었다가 홍삼분말의 투여시 유의적으로 감소되었다. 간 조직중의 SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성도 $B(\alpha)P$ 투여로 유의적으로 증가되었다가, 홍삼분말의 투여로 이들 활성이 유의적으로 감소하였다. 반면, GST 활성은 $B(\alpha)P$ 단독군에서는 감소되었다가 홍삼분말 투여시 유의적인 증가를 보였다. 이상의 결과로 홍삼분말은 항산화효소의 활성에 의한 $B(\alpha)P$에 의한 간 손상에 대한 보호효과를 가지는 것으로 사료된다.
목적 : 이 연구의 목적은 적출간 관류법을 통하여 염화니켈과 염화카드뮴의 간 독성을 비교하는 데에 두었다. 방법 : AST(aspartate aminotransferase ferase), ALT(alanine aminotransferase), LDH(lactate dehydrogenase) 등의 간기능을 나타내는 생화학적 지표와 관류속도를 간독성 지표로 이용하였으며 산소 소모율은 생존력을 나타내는 지표로 이용하였다. $300({\pm}50)g$ 정도의 흰쥐를 대조군과 각 노출군($50{\mu}M$ 및 $200{\mu}M$의 염화니켈과 염화카드뮴)에 5마리씩 총 25마리를 무작위로 할당하였다. Krebs-Ringer bicarbonate buffer solution을 관류액 용도로 제조하여 간문맥에 투입하고 간세포를 통과하여 vena cava로 배출되는 관류액을 일정한 시간 간격을 두고 계속적으로 채취하였으며 채취한 관류액은 간독성 지표를 측정하는 데에 이용하였다. 결과 : AST, ALT, LDH 모두 염하니켈 보다는 염화카드뮴 투여군에서 시간의 경과에 따라 큰 폭으로 증가하였으며 반복 측정된 2요인 분산분석을 실시한 결과, 통계적으로 유의한 차이를 나타냈다. 생존력은 두 물질 모두에서 시간의 경과에 따라 감소하는 경향을 나타냈다. 결론 : 결론적으로, 이 실험상에서는 염화니켈 보다 염화카드뮴의 간독성이 더욱 강한 것으로 드러났다. 적출간 더욱 강한 것으로 드러났다. 적출간 관류법의 특성상 급성 간독성 평가에서 적절한 기법으로 보이며 국내 연구에서도 이 방법이 널리 이용되기를 기대한다.
흰점박이꽃무지(Protaetia brevitarsis)는 간 질환의 치료를 위해 민간요법 뿐만 아니라 한방에서는 이용하는 전통약물로 알려져 있다. 본 연구는 사염화탄소와 에탄올로 간 손산을 유도한 흰쥐에서 흰점박이꽃무지 추출물(PBE)의 영향을 조사하였다. 사염화탄소는 이물질대사효소(cytochrome P_450, cytochrome b$_{5}$, cytochrome b$_{5}$ reductase), TBARS, 혈청 AST와 ALT, 간 무게비에서 유의한 변화가 확인되는 간독성이 유발하였으며, 에탄올은 혈청 AST와 TBARS의 변화는 유도하지 않았으나 이물질대사효소, ALT, 체중 당 무게비가 유의한 변화를 나타내었다. PBE로 전 처리한 실험군은 이물질대사효소(cytochrome P_450, cytochrome b$_{5}$, cytochrome b$_{5}$, reductase), 혈청 TBARS, AST와 ALT, 간무게비에서 어떠한 유의적인 변화도 관찰되지 않았다. 이러한결과는 적어도 이 실험조건에서는 PBE가 사염호탄소 혹은 에탄올로 유도한 간 독성에 대하여 보호 또는 회복효과가 없다고 판단된다.
싸리버섯 메탄올 추출물이 간독성 물질인 B$({\alpha})$P을 투여한 마우스에서 간 손상 억제 효과 및 cytochrome P-450 1A1 발현에 미치는 영향을 살펴보았다. B$({\alpha})$P 투여로 인한 혈청 ALT와 AST의 활성, 간 조직증의 lipid peroxide 함량, cytochrome P-450 함량, AD 및 AH 활성이 유의적으로 증가하였으며 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여시 이들 활성 및 함량이 유의적으로 감소하였다. 반면, 간 조직중의 GSH 함량, GST, r-glutamylcysteine synthetase의 활성은 B$({\alpha})$P만 투여한 군에 비해 싸리버섯 메탄올 추출물을 투여시 증가하였다. 또한 immuno blotting 결과로부터 B$({\alpha})$P 투여에 의해 현저히 증가되었던 cytochrome P-450 1A1 isozyme 단백질 함량이 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여로 감소됨을 확인하였다. 이와 같은 결과로부터 싸리버섯 메탄올 추출물은 B$({\alpha})$P에 의한 간 손상에 대한 보호 효과가 있는 것으로 사료된다.
본 연구는 손바닥 선인장 투여 후 급성 $CCl_4$ 로 처리한 흰쥐의 간과 혈청을 사용하여, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, total lipid, triglyceride (TG)를 간조직중에서 MDA를 측정함으로써 과산화지질 활성도와 콜레스테롤의 양을 조사하였다 OFC군은 손바닥 선인장 200mg/kg을, CTA 군은 saline을 2주간 매일 투여한 다음 간 손상의 유도는 사염화탄소를 olive oil에 1:1 비율로 용해시켜 체중 1kg당 50% $3.3m\ell$ 의용량을 복강으로 해부하기 24시간 전에 반 투여, 12시간 전에 나머지 반 투여하였다. 그 후 10시간 절식 후 혈액과 간을 채취하여 관찰하였다. 간 조직 중의 과산화지질 함량은 CTA 군은 NCT 군에 대하여 31.9% 증가를 보였으나, OFC 군에서는 CTA 군에 대해 32.6% 감소하는 경향을 나타내었다. 혈중 total lipid와 TG의 양은 손바닥 선인장을 투여한 군 (OFC) 이 CTA 군에 비해 각각 16.8%, 52.3%의 유의성 있는 감소를 보였다. Total cholesterol과 LDL-cholesterol은 OFC 군이 CTA 군에 대해 각각 12.7% 17.4% 정도로 크게 감소되는 것으로 나타났다. HDL-cholesterol은 CTA 군이 NCT 군에 대해 42.8% 감소하였으나, 손바닥 선인장을 투여함으로써 CTA 군에 대해 19.7% 증가를 나타냈다. 동맥경화지수는 CTA 군이 NCT 군에 비해 3.6배 높고, OFC 군이 CTA 군에 비해 1.8배 낮은 것으로 나타났다. 이상의 결과로, 손바닥 선인장을 투여한 후 간 독성을 유발하였을 때 과산화지질 및 콜레스테롤이 유의적인 수준으로 억제되었다.
스티렌은 플라스틱과 같은 생활용품에 광범위하게 사용되며, 건강에 위해를 야기시킬 수 있다. 스티렌이 간 조직 중 항산화계 효소 활성에 미치는 영향을 확인하기 위해 50 mg/kg, 200 mg/kg 및 400 mg/kg 용량을 4일 동안 1일 2회 복강 투여하였다. 혈청 ALT 및 AST 활성 변동은 대조군에 비해 400 mg/kg 투여군에서 각각 약 1.2배 (p<0.05) 및 약 43.3% (p<0.05) 유의하게 증가하였다. 이는 투여용량이 증가할수록 간손상이 심화되었다는 것을 의미한다. MDA 함량 변동은 대조군에 비해 400 mg/kg 투여군에서 약 37.1% (p<0.05) 증가하였고, XO 활성도는 200 mg/kg 투여군에 비해 400 mg/kg 투여군에서 약 15.2% 증가하였고, CYPdAH 활성도는 약 40.4% (p<0.05) 유의하게 증가하였다. 생성된 과잉의 활성산소종을 제거하기 위한 항산화계 효소인 GPx, CAT, SOD 및 GST 활성도는 대조군에 비해 400 mg/kg 투여군에서 각각 약 33.0% (p<0.05), 약 41.2% (p<0.05), 약 47.2% (p<0.05) 및 약 27.6% (p<0.05) 유의하게 감소하였다. GSH 함량은 200 mg/kg 투여군에 비해 400 mg/kg 투여군에서 34.5% (p<0.05) 유의하게 감소하였고, 소모된 GSH 함량은 스티렌과 스티렌 중간대사산물에 의한 것으로 생각된다. 이상의 결과로 보아 스티렌의 대사과정에서 생성된 과잉의 활성산소종과 독성 중간대사산물에 의해 간 손상이 유발되었고, 이는 해독에 관여하는 항산화 효소계와 불균형과 관련이 있을 것으로 생각된다.
t-BHP는 대표적인 산화스트레스에 의한 간 손상 모델이며, 본 연구자는 랫드에 기능성이 강화된 기능성 들깻잎 추출물(P. frutescens leaf extract, PLE)을 250, 500 또는 1000 mg/kg body weight (b.w.)으로 6일간 경구 투여하고 t-BHP의 복강 주사로 간 손상을 일으킨 후 기능성 들깻잎 추출물이 간에서 산화스트레스를 얼마나 억제하여 주는지를 혈액의 간 손상 지표인 lactate dehydrogenase (LDH), aspartate aminotransferase (AST) 그리고 alanine aminotransferase (ALT)를 측정하였으며, 간 조직에서 항산화 바이오 마커인 reduced glutathione (GSH), 지질과산화물의 척도인 malondialdehyde (MDA)를 통해서 측정하였다. 산화스트레스에 의한 간 손상시 GSH는 아무것도 처리하지 않은 정상 대조군($146.0{\pm}5.4$ mM GSH/g protein)에 비해 t-BHP로 산화스트레스를 유발한 그룹에서 $128.6{\pm}6.8$ mM GSH/g protein로 감소하였다. 반면 기능성 들깻잎 추출물을 250, 500 그리고 1000 mg/kg b.w. 을 투여한 그룹에서는 $129.3{\pm}2.6$ mM GSH/g protein, $151.9{\pm}6.8$ mM GSH/g protein, $171.9{\pm}5.2$ mM GSH/g protein로 농도 의존적으로 GSH 함량이 회복되는 경향을 나타내며, 500 mg/kg b.w. 투여군부터 정상 대조군의 GSH 함량과 비슷한 수준을 나타내었다. 또한, 간 조직에서 산화스트레스에 의하여 발생된 지질과산화물을 측정하였을 때 t-BHP에 의하여 산화스트레스만 유발한 그룹은 $834.0{\pm}154.7{\mu}M/g$ protein 로 정상 대조군의 $385.6{\pm}39.7{\mu}M/g$ protein 보다 2.17배 높은 MDA를 생성한 것으로 지질과산화가 많이 일어난 것을 확인하였으나, 기능성 들깻잎 추출물을 투여한 그룹의 MDA의 생성량은 $669.2{\pm}145.0$, $595.1{\pm}142.6$, $415.9{\pm}133.8{\mu}M/g$ protein 로 농도에 따라 감소하는 경향을 확인하였다. 랫드의 간 조직에서, 독성을 유발하는 t-BHP를 복강 투여 후 기능성 들깻잎 추출물을 경구 투여하였을 때 지질과산화의 지표인 MDA의 감소와 항산화의 지표인 GSH 함량이 증가하였다. 조직병리학적 확인을 위하여 간 조직을 H&E 염색 후 광학현미경으로 관찰하였을 때, t-BHP만 처리한 음성 대조군의 경우 간 세포의 괴사와 조직의 변형을 확인할 수 있었지만 기능성 들깻잎 추출물을 처리하였을 경우 모두 정상 상태의 조직을 관찰할 수 있었다. 위의 결과들을 종합하였을 때, t-BHP가 간에서 산화스트레스를 유발하여 간 손상을 야기시키고, 간 조직의 인지질 막 손상을 줄 수 있으며, 기능성 들깻잎 추출물은 간 손상에 대한 보호 효과가 있음을 확인하였다.
나프탈렌(Naphthalene)과 같은 다환방향족탄화수소류(Polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)는 수계에 유입되어 해양생물들에게 영향을 미치게 된다. 나프탈렌은 유류속의 PAHs 내에서 함량이 가장 높으며, 독성이 강하다. 본 연구에서는 대조구(0 ${\mu}g/L$), 1000, 1800, 3200, 5600, 10000 ${\mu}g/L$의 6개 나프탈렌 농도구를 설정하고 넙치 치어에 대한 나프탈렌의 24시간 반수치사농도(24h-$LC_{50}$)을 구했으며, 아가미, 간, 신장, 근육내의 나프탈렌 농도를 분석하였다. 넙치 치어의 24h-$LC_{50}$은 Large 그룹에서 2410.76 ${\mu}g/L$, Small 그룹에서 2230.67 ${\mu}g/L$을 나타내었다. 각 조직에서의 나프탈렌 농도는 간 및 신장에서 아가미 및 근육보다 높았다.
본 연구에서는 암모니아에 의해 손상된 사람의 간세포주 Hep G2 cell과 rat의 hepatocyte에 대하여 metronidazole이 간 세포 손상을 억제하는 효과가 있음을 밝혔다. Metronidazole은 암모니아에 의한 세포 생존율 감소, 배지내의 암모니아 수준 및 지질과산화 증가 및 항산화 효소 발현 감소 그리고 세포 내 DNA 손상과 세포사멸을 억제하였다. 따라서 metronidazole은 암모니아로부터 기인하는 세포손상을 감소시켜 간세포 기능을 보호함으로써 간 기능의 저하로 발생한 과암모니아혈증에 효과적인 치료제로서의 가능성을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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