Kim, Jung-Hwa;Kim, Dae-Ho;You, Jin-Hyun;Kim, Cheol-Hee;Kwon, Min-Chul;Hwang, Baik;Lee, Hyeon-Yong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.4
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pp.154-160
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2005
This study was performed to compare anticancer and immune activities between natural Artemisia capillaris Thunb. extract and tissue cultured plant extract (hairy root, in vitro culture, callus). The inhibitory effect of cancer cell growth, human B cell growth and productivity of cytokines were examined. Furthermore, HPLC analysis was performed to confirm the components. The anticancer activities increased by more than 55% with the cultured callus of Artemisia capillaris T. for four cancer cell lines(Lung carcunoma, Stomach adenocarcinoma, Hepatocillular carcinoma, Breast adenocarcinoma), showing higher effect than natural Artemisia capillaris T. The extracts from hairy root and in vitro culture of Artemisia capillaris T. significantly increased the immune B cell growth. The immune B cell growth effect of natural Artemisia capillaris T. was higher than that of the tissue culture plants such as hairy root, in vitro culture and callus. Both natural and tissue cultured plants showed similar effects on cytokine secretion. The similar peak size was observed between natural Artemisia capillaris T. and cultured callus in HPLC analysis. As a results, the biological activities were not observed the difference between natural Artemisia capillaris T. and cultured callus. Thus, the cultured callus will be altered natural Artemisia capillaris T. in the environmental side and the resources preservative side
Purpose: The HSV1-tk reporter gene system is the most widely used system because of its advantage that direct monitoring is possible without the introduction of a separate reporter gene in case of HSV1-tk suicide gene therapy. In this study, we investigate the usefulness of the reporter probe (substrate), $9-(4-[^{18}F]Fluoro-3-hydroxymethylbutyl)$guanine ($[^{18}F]FHBG$) for non-invasive reporter gene imaging using PET in HSV1-tk expressing hepatoma model. Materials and Methods: Radiolabeled FHBG was prepared in 8 steps from a commercially available triester. The labeling reaction was carried out by NCA nucleophilic substitution with $K[^{18}F]/K2.2.2.$ in acetonitrile using N2-monomethoxytrityl-9-14-(tosyl)-3-monomethoxytritylmethylbutyl]guanine as a precursor, followed by deprotection with 1 N HCl. Preliminary biological properties of the probe were evaluated with MCA cells and MCA-tk cells transduced with HSV1-tk reporter gene. In vitro uptake and release-out studies of $[^{18}F]FHBG$ were performed, and was analyzed correlation between $[^{18}F]FHBG$ uptake ratio according to increasing numeric count of MCA-tk cells and degree of gene expression. MicroPET scan image was obtained with MCA and MCA-tk tumor bearing Balb/c-nude mouse model. Results: $[^{18}F]FHBG$ was purified by reverse phase semi-HPLC system and collected at around 16-18 min. Radiothemical yield was about 20-25%) (corrected for decay), radiochemical purity was >95% and specific activity was around >55.5 $GBq/{\mu}\;mol$. Specific accumulation of $[^{18}F]FHBG$ was observed in HSV1-tk gene transduced MCA-tk cells but not in MCA cells, and consecutive 1 hour release-out results showed more than 86% of uptaked $[^{18}F]FHBG$ was retained inside of cells. The uptake of $[^{18}F]FHBG$ was showed a highly significant linear correlation ($R^2=0.995$) with increasing percentage of MCA-tk numeric cell count. In microPET scan images, remarkable difference of accumulation was observed for the two type of tumors. Conclusion: $[^{18}F]FHBG$ appears to be a useful as non-invasive PET imaging substrate in HSV1-tk expressing hepatoma model.
Park, Jin-Hong;Kim, Dae-Ho;Choi, Geun-Pyo;Ryu, Lee-Ha;Lee, Kang-Yoon;Lee, Hyeon-Yong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.12
no.4
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pp.304-308
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2004
Immune enhancing activities of water and ethanol extracts of Hypericum perforatum L. (HP) were examined. HP extracts inhibited the growth of human hepatocarcinoma, human gastric cancer cell and human breast cancer cells in concentration-dependent mammers over a concentration range of $0.05{\sim}1.0\;mg/ml$, showing inhibiton of more than 80% with the concentration of 1.0 mg/ml. However, HP the same concentration. Overall selectivity of the extracts on the three human cancer lines was over 3.5, which is higher than those from the conventional herbs. The growth of human immune B and T cells was enhanced up to 1.4 to 2.0 folds by the addition of the extracts for 4 days, compared to controls. Ethanol extracts of HP after 6 days incubation increased the secretions of tumor necrosis factor-alpha $(TNF-{\alpha})$ from T cells and interleukin-6 (IL-6) from B cells to 6.7 pg/cell and 6.8 pg/cell, respectively. These results suggest that HP has a potent immune enhancing effect.
The immune activation and anticancer activities of the water and ethanol extracts from Artemisia capillaris Thunb. were studied. The growth of human hepatocarcinoma and human gastric cancer cell was inhibited by the addition of $1.0\;mg/m{\ell}$ of the water extract, by about 77% and 95%, respectively. The growth of human breast cancer cells was also inhibited by addition of $0.5\;mg/m{\ell}$ of both water and ethanol extracts by 88%. The growth of human normal lung cell, HEL299 was inhibited by 15% indicating very low cytotoxicity of both extracts. Overall selectivity of the both extracts on several human cancer cell line was over 2.5. The growth of both human B and T cells was enhanced up to 1.6 to 2.1 times by adding the ethanol extracts. The secretion of cytokines, $TNF-{\alpha}$ and IL-6, from human B cells was also increased showing $68\;pg/m{\ell}$ and $67\;pg/m{\ell}$, respectively, compared to $35{\sim}40\;pg/m{\ell}$ of the control. In terms of the immune activity, there was not much difference between water and ethanol extracts of Artemisia capillaris Thunb. It implies that the extraction solvent could not differ the biological activities of the extracts. Based on these results, Artemisia capillaris Thunb. can be developed into a potentially useful cancer chemoprentive agent.
Koh, Eun Kyoung;Lee, Young Ju;Kim, Ji Eun;Kwak, Moon Hwa;Go, Jun;Son, Hong Joo;Lee, Hee Seob;Jung, Young Jin;Hwang, Dae Youn
Journal of Life Science
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v.24
no.6
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pp.595-602
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2014
Styela Clava tunic (SCT) has found some applications in many areas of medical treatment including as an anti-inflammatory compound, a wound healing film, in guided bone regeneration, and as a food additive. The protective effect of SCT aqueous extract (AE-SCT) on cell death induced by $H_2O_2$ treatment was investigated by measuring the changes in cell viability in HepG2 cells after AE-SCT treatment. High concentrations of antioxidant compounds including flavonoids (3.3 mg/g) and phenolics (32.3 mg/g) were detected in AE-SCT but no significant cytotoxicity was observed in HepG2 cells treated with AE-SCT. The viability of HepG2 cells was also not changed by treatment with different concentrations of AE-SCT after $H_2O_2$ treatment. However, cell viability was significantly increased in cells treated with three different concentrations of AE-SCT before $H_2O_2$ treatment. The greatest increase in cell viability was observed in the group treated with $50{\mu}g/ml$ AE-SCT, when compared with vehicle-treated group. FACS and DAPI staining analysis indicated that the decrease in number of dead cells was dependent on the concentration of AE-SCT. Alterations in the Bax/Bcl-2 ratio after $H_2O_2$ treatment were significantly restored by treatment with different concentrations of AE-SCT. These results indicate that AE-SCT, which contains high levels of antioxidants, may protect cells against death induced by $H_2O_2$ treatment.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.4
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pp.395-401
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2006
In this study, we investigated anticarcinogenic effects of extracts from Gloiopeltis tenax (GT). GT was extracted with methanol (GTM), which was then further fractionated into four fractions by using solvent fractionation method, affording methanol (GTMM), hexane (GTMH), butanol (GTMB) and aqueous (GTMA) soluble fractions. We determined the cytotoxic effects of these fractions on cancer cells by MTT assay. Among various fractions of GT, the GTMM showed the strongest cytotoxic effect at concentration of $150{\mu}g/mL$, displaying 95.97% on HepG2 cell lines and 93.64% on HT-29 cell lines, respectively. And, the anti-proliferative effect of GT was accompanied by a marked in increase of levels of Bad, Bax, Bok and Bak protein and activation of caspase-3, caspase-7 and PARP protein. Also, we observed quinone reductase (QR) induced effects in all fraction layers of GT on HepG2 cells. The QR induced effects of the GTMM and GTMB on HepG2 cells at concentration of $60{\mu}g/mL$ showing inductive indexes of 2.86 and 2.04 compared to the control value of 1.0.
In this study, antineoplastic activity against human hepatocellular carcinoma cell line(Hep G2) was tested in Gleditsiae Spina. Gleditsiae Spina was extracted with water, and the cytotoxic activity was tested using a calorimetric tetrazolium assay(MTT assay), the apoptosis was tested using a DNA electrophoresis and flow cytometry. The nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage was tested using a Griess method. Gleditsiae Spina extracts against the proliferation of Hep G2 cells not showed cytotoxicity at the concentration of less than $100{\mu}g/ml$, and Gleditsiae Spina extracts not showed the cytotoxicity of mitomycin C and the cytotoxicity of cisplatin on Hep G2 cells. Gleditsiae Spina extracts aginist the proliperation of BALB/c 3T3 cells not showed cytotoxicity, the proliperation of mouse thymocytes and splenocytes not showed cytotoxicity at the concentration of less than $100{\mu}g/ml$. Gleditsiae Spina extracts not showed nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage in vitro. Gleditsiae Spina was administered orally for 7 days at 300mg/kg increased nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage.
The 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (ABTS), nitric oxide (NO) scavenging activities and ferric- reducing/antioxidant power (FRAP) assay against extracts of Kalopanax pictus (KP) were measured. Radical scavenging and antioxidant activities were increased depend on the concentration and the effects were enhanced by ascorbic acid (AA). KP extracts and AA had a good anti-proliferating activity against HepG2 cells by MTT assay and induces cells apoptosis, which was demonstrated by flow cytometric analysis. KP extracts and AA caused the arrest of cell-cycle progression at either G0-G1-phase or G2/M-phase, which might be depending upon the KP extracts concentration. In addition, KP extracts and AA are effective in enhancing immunity and nitric oxide production by RAW 264.7 macrophages cells. KP extracts and AA inhibited tumor cell growth and exerted antioxidant effects as compared to controls. These results demonstrate that simultaneous AA and KP extracts treatment could be useful in preventing the oxidative damage and anti-proliferating HepG2 cells, and are effective in enhancing immunomodulatory and antioxidant activity.
The anti-cancer activities of Rhus verniciflua Stokes (GC), Ulmus davidiana var. japonica Nakai (UGP) and arsenium sublimatum (SS) extracts, which have been used Oriental medicine therapy for various diseases, were investigated. The treatment of GC, UGP and SS alone, and combined treatment with GC, UGP and SS did not affect the cell viability in the mouse normal cell lines (RAW 264.7 macrophages and C2C12 myoblasts). However, co-treatment with GC, UGP and SS markedly induces apoptosis in human gastric cancer AGS cells, but not in other various cancer cell lines (human lung cancer A549, colon cancer HCT116, liver cancer Hep3B and bladder T24 cells) as evidenced by formation of apoptotic bodies, chromatin condensation, and accumulation of annexin-V positive cells. Co-treatment with GC, UGP and SS effectively induced the expression levels of Fas and Fas ligand, and inhibited the levels IAP family proteins such as XIAP, cIAP-1 and survivin, and anti-apoptotic Bcl-xL proteins compared with treatment with either agent alone. Combined treatment also significantly induced the loss of mitochondrial membrane potential, which was associated with the activation of caspases (-3, -8, and -9) and degradation of poly (ADP-ribose) polymerase. However, the cytotoxic effects induced by co-treatment with GC, UGP and SS were significantly attenuated by pan-caspases inhibitor, z-VAD-fmk, indicating an important role for caspases. These results indicated that the caspases were key regulators of apoptosis in response to co-treatment of GC, UGP and SS in human gastric cancer AGS cells and further studies will be needed to identify the active compounds.
Kim, Soo-Hyun;Choi, Hyun-Jin;Chung, Mi-Ja;Cui, Cheng-Bi;Ham, Seung-Shi
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.10
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pp.1295-1301
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2009
This study was carried out to investigate the mutagenic, antimutagenic, cytotoxicity and antitumor effect of Codonopsis lanceolata (CL). CL was extracted with 70% ethanol and then further fractionated to hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. Antimutagenic, cytotoxicity and antitumor effects of CL extracts were measured by using Ames test, SRB method, and the tumor growth inhibition test. CL extracts did not show any mutagenicity in the Ames test; however, 70% ethanol extracts and its fractions had strong antimutagenic effects against mutation induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) and 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO). The ethyl acetate fraction of CL (200 ${\mu}g$/plate) showed approximately 72.1% inhibitory effect on the mutagenesis induced by 4NQO against TA98 strain, whereas 69.6% and 67.0% inhibitions were observed on the mutagenesis induced by MNNG and 4NQO against TA100 strain. In anticancer effects, the cytotoxicity of CL extract and its fractions against cancer cell lines including human cervical adenocarcinoma (HeLa), human hepatocellular carcinoma (HepG2), human breast adenocarcinoma (MCF-7), human lung carcinoma (A549) and transformed primary human embryo kidney (293) were investigated. The treatment of 1 mg/mL CL ethyl acetate fraction had the highest cytotoxicity of 74.5%, 70.7% and 80.3% against HeLa, MCF-7 and A549 cells, respectively. In contrast, the extract and its fractions showed only 2$\sim$31% cytotoxicity for a normal human kidney cell line (293). In vivo anticancer effect of CL extract was tested using Balb/c mice transplanted sarcoma-180 cells. CL ethyl acetate fraction showed the highest inhibition rate of 56.4% at the 50 mg/kg concentration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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