250g내외의 횐쥐에게 Thiry-Vella fistula를 만든 후 수술과 비경구 영양 효과로 인하여 위축되는 소장의 누공에 각각 nucleosides/nucleotide혼합용액 (Nuc군)이나 glutamine(Gln군), glycine(Gly군)등을 투여하여 소장 점막의 위축 방지나 재생효과가 있는지를 알아보고 자 실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Thiry-Vella fistula 시술 후 9일 동안 2일에 한 번씩 총 4회 소장 누공으로 주입한 이미노산들과 nucleosides/nucleotide 혼합물의 효과는 누공의 소장 점막에 미치는 직접적인 효과와 비누공 부분에 대한 간접적인 효과로 나누어 볼 수 있다. Nucleosides/nucleotide 혼합물은 소장 누공으로 주입되어 직접 접촉되는 부분의 소장 DNA함량을 유의적으로 증가 시켰으며 단백질 함량도 높은 수치를 보여 주었고 조직 검사 결과 소장 융모의 길이와 표면적을 증가시킨 것으로 나타났다. 그러나 [$^3$H] thymidine incorporation의 결과는 대조군과 유의적인 차이를 보이지 않았다. Glycine은 소장 단백질과 DNA에 있어서 대조군보다는 높고 Nuc군보다는 낮은 경향을 보여 주었으나 [$^3$H]-thymidine incorporation은 누공과 비누공부분에서 모두 가장 높게 나타났으며 특히 비누공부분에서는 유의적으로 증가되어 있었다. Glutamine의 효과는 glycine 투여 효과와 비슷하거나 오히려 떨어지는 것으로 나타났다.
The in vitro predictive tests in cancer chemotherapy of cancer cell lines to anticancer drugs were determined using novel dye exclusion assay [NDEA], [3H] thymidine incorporation, and clonogenic assay [CA>. Antitumor effect of Bleomycin, Cis-platin, Vinblastine, Methotrexate to HEp-2, B16 cell lines using rapid assays was compared with [CA> in this study. In dye exclusion assay of B l6 cell line, cancer cells were sensitive to Bleomycin at all concentrations, to Vinblastine at the level of peak plasma concentration [PPC], ${\times}1/10$ [PPC](P<0.05). And Bleomycin revealed relatively good cytotoxicity than that of CDDP and vinblastine at ${\times}10$[PPC], (P<0.05). HEp-2 cells were resistive to methotrexate at the level of ${\times}100$[PPC] (P<0.05) In [3H] thymidine incorporation assay, B 16 cells were sensitive to Bleomycin, CDDP, Vinblastine at the level of [PPC], ${\times}10$ [PPC](P<0.01). Dose-dependent drugs of bleomycin, CDDP were more sensitive than Vinblastine at high concentration (P<0.05). In clonogenic assay, HEp-2 cell line was sensitive to three drugs of all concentrations except ${\times}10$ [PPC] of CDDP. B 16 cell line was sensitive to all drugs(P<0,01). In comparison of chemosensitivity tests among three assays, the results were correlated(${\gamma}=0.99$, P<0.05).
It was planned to investigate, in mice that received ACTH, the influence of Panax Ginseng upon DNA synthesis of submandibular gland by observing incorporation of $[^3H]$ thymidine into the tissue cells. Thirty male mice $(body\;weight:\;18{\sim}20\;g)$ were divided equally into the ginseng-ACTIH and the saline-ACTH groups. Each animal of the ginseng-ACTH and the saline-ACTH groups received every day (subcutaneously) 0.05 m1/10 g body weight of ginseng extract(4 mg of ginseng alcohol extract in 1 ml of saline) and the same amount of saline, respectively, for 5 days. On the 5th experimental day, all animals received 0.01 unit of ACTH intraperitoneally one hour after the last medication, and $1\;{\mu}Ci/g$ body weight of $[^3H]$ thymidine after one more hour. Five animals, at a time, of each group were sacrificed 1, 10, and 24 hr after $[^3H]$ thymidine administration, and the radioactivity of cells in their mandibular gland was measured autoradiographically in terms of the % number of radioactive cells in 1,000 cell counts (Radioactive Index, R.1.). Results obtained were as follows: 1. The radioactive indices obtained from submandibular gland of the saline-ACTH group 1, 10 and 24 hr after $[^3H]$ thymidine administration were $15.2{\pm}0.32,\;20.1{\pm}0.30,\;and\;24.5{\pm}0.52(mean{\pm}S.D.)$ in the mucous cells, $13.0{\pm}0.22,\;10.2{\pm}0.05,\;and\;7.5{\pm}0.42$ in the serous cells. and $10.5{\pm}0.40,\;13.6{\pm}0.32,\;and\;15.9{\pm}0.42$ in the duct cells, while the $mean{\pm}S.D.$ of the values obtained from the 3 cell types 1, 10 and 24 hr after $[^3H]$ thymidine were $10.9{\pm}0.28,\;12.4{\pm}0.31,\;and\;10.0{\pm}0.39.$ Thus the radioactive indices obtained from the ginseng-ACTH group were generally lower than those obtained from the saline-ACTH group. It is inferred from the above results that the ginseng tends to promote the suppressive action of ACTH upon DNA synthesis of cells in the mandibular gland.
The most significant direct role of estrogen in vivo is its ability to elicit receptor-mediated cellular proliferation in mammalian target tissues. However, the mechanism by which exogenously added estrogen causes the neoplastic transformation of renal cortical cells is yet to be uncovered. The present study was designed to evaluate interaction of $17{\beta}-estradiol\;(E_2)$ with epidermal growth factor (EGF) and insulin-like growth factor-I (IGF-I) on proliferation and $P_i$ uptake in primary cultured rabbit renal proximal tubular cells in phenol red-free, hormonally defined-medium. $[^3H]-thymidine$ incorporation increased markedly by about 133% and 141% more in the presence of $10^{-9}\;and\;10^{-6}\;M\;E_2$, respectively, than that of control. Cell count was 162% and 143% greater in the presence of $10^{-9}\;and\;10^{-6}\;M\;E_2$ , respectively, compared with control. Among all time points examined, there was an increase in $[^3H]-thymidine$ incorporation in the presence of $10^{-9}\;M\;E_2$ at day 9 or 13, respectively. However, $E_2$ ($10^{-9}\;M$) significantly drove up cell count to 160% of that of control at day 13, while it had a slight but statistically insignificant effect at day 9. $E_2-induced$ stimulation of $[^3H]-thymidine$ incorporation was completely reversed by $E_2$ antagonists (progesterone or tamoxifen). $E_2$ ($10^{-9}\;M$) or EGF ($10^{-8}\;M$) significantly stimulated $[^3H]-thymidine$ incorporation by 144% and 154% of control. $E_2$ plus EGF was synergistic on $[^3H]-thymidine$ incorporation (204% of control), while $E_2$ plus IGF-I showed a slight but no significant synergistic effect. Cell number also displayed similar pattern. $E_2$ ($10^{-9}\;M$) significantly stimulated $P_i$ uptake to 134% of control. $E_2$-induced stimulation of $P_i$ uptake was partially reversed by $E_2$ antagonists. EGF or IGF-I ($10^{-8}\;M$) significantly also increased $P_i$ uptake to 132% or 129% of control. $E_2$ plus EGF had synergistic effect on $P_i$ uptake, while $E_2$ plus IGF-I did not. In conclusion, $E_2$ may act not only directly interaction with its receptors but also indirectly as a modulator of EGF in proliferation and $P_i$ uptake of primary cultured rabbit renal proximal tubular cells.
The present study has been carried out to investigate the optimal condition on lymphocyte blastogenesis of rabbit lymphocytes, whole blood culture and microculture system in conjunction with a semiautomatic multiple sample harvester(SAMSH) was used to study the In vitro optimal condition of rabbit lymphocytes. Data were presented to show many variables that are involved in studying the phytohemagglutinin(PHA) and lipopolysaccharide(LPS) response of rabbit lymphocyte in a microculture system. Analysis indicated that the conditions for optimal PHA as measured by incorporation of $^3H$-TdR include: (1) use of RPMI-1640 as culture medium. (2) use of $6{\mu}g$ of PHA, per culture. (3) 48-hours culture period. Conditions for optimal stimulation with LPS mitogen were similar to those used for PHA.
본 실험은 백서의 간세포막에서 transferrin receptor(TfR)의 발현에 미치는 인삼 및 3'-methyl-4-dimethylaminobenzene(3'-Me-DAB)의 영향을 연구하기 위하여, 인삼, 3'-Me-DAB 또는 3'-Me-DAB처치후 인삼을 투여한 백서를 부분 간절제한 후 간조직에서 $[^{3}H]thymidine$및 transferrin수용체의 유전자 발현 실험, 그리고 간세포막에서$[^{3}H]thymidine$ 결합 실험을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 8주간 3'-Me-DAB를 투여한 백서에서 간조직의 조직학적 소견은 림프구의 침윤, 담관세포의 증식,교량성괴사 및 이상세포의 증식 소견을 보였다. 그러나 정상 또는 3'-Me-DAB를 투여한 백서에 인삼을 투여하였을 때 간조직의 조직학적 소견은 각각의 대조군에 비해 크게 변화되지 않았다. 2. 인삼 또는 3'-Me-DAB를 투여한 백서에서의 $[^{3}H]thymidine$ uptake는 대조군에서와 비슷하였으나, 부분간절제 수술 후 1일째 간에서는 수술 전보다 현저하게 증가되었다. 특히 3'-Me-DAB투여군의 간조직에서 더 증가되었으며, 이는 인삼 투여에 의해 억제되는 경향을 보였다. 3. 간세포막에서의 transferrin 결합량(Bmax) 및 Kd는 정상 백서에서 각각 6.87pmole/mg protein 및 10.64nM이었으며, 인삼 투여에 의해 크게 변동되지 않았다 그러나 3'-Me-DAB를 투여한 백서에서는 Bmax 및 Kd가 증가되었고, 이 증가는 인삼투여에 의해 감소되었다. 부분 간절제 수술 후 간세포막에서의 Bmax 및 Kd는 모든 그룹에서 수술 후 3일째에는 증가, 수술 후 5일째에는 감소되는 양상을 나타냈다. 그러나 3'-Me-DAB투여 후 간절제 수술군에서의 증가가 가장 컸으며, 이 증가효과는 인삼 투여에 의하여 억제되었다. 4. 부문 간절제 수술 후 간조직에서의 TfR mRrfA 발현은 수술 후 24시간에 최대로 증가되었으며, 이는 3'-Me-DAB를 투여한 백서에서 더 현저하였다. 그리고 인삼은 3'-Me-DAB투여 후 간절제 수술군에서 증가된 발현양을 약간 감소시켰다. 이상의 결과로 백서에서 부분 간절제 수술 및 발암 물질에 의해 간세포막 transffirin수용체는 친화력이 저하된 TfR이 증가될 수 있으며, 이는 일부 이 수용체의유전자 수준에서 조절될 수 있는 것으로 생각된다. 그리고 인삼은 발암물질 투여등으로 간세포의 증식이 촉진되었을 때, 간세포내 핵산 합성 및 TfR mRNA 발현 조절을 통하여 세포막의 TfR출현 및 세포증식을 억제시킬 수 있을 것으로 추측된다.
The movement of teeth during orthodontic treatment requires bone remodeling process in periodontal tissue. To find out the changes occuring in the cell itself, mechanical force was applied to the cultured periodontal ligament cells. Following results were obtained from measuring the changes in cyclic AMP and $PGE_2$, $^3H$-thymidine incorporation amount in time lapse after application of mechanical force. 1. When mechanical force was applied to cultured PDL cells, the amount of cAMP in cells were increased significantly after 15 min. of force application, but were decreased gradually as time lapsed. 2. When mechanical force was applied to cultured PDL cells, the amount of PGE2 were increased at 20,40,60 min. and was significantly increased at 20 min. 3. When mechanical force was applied to cultured PDL cells, the amount of $^3H$-thymidine incorporation was some increased, but was not statistically significant.
저령의 에틸아세테이트 추출물에서 4개의 분획을 제조한 후 백혈병 세포인 K-562, L-1210, HL-60와 U-937 세포의 세포생존 억제효능을 관찰하였다. Fr. 2는 L-1210, HL-60 세포 억제효능이 미비하였고, Fr. 3은 4종의 백혈병 세포주에 대하여 세포생존 억제효능이 있었다. 이 효능은 L-1210 세포에 대하여 가장 강하게 나타났다. 세포사멸 작용을 증명하는 DNA분절 현상을 L-1210 세포에서 관찰하였을 때, fr. 3을 30 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서 만 DNA분절 현상이 관찰되었다. Fr. 3에 대한 DNA합성 억제능을 [$^3$H]thymidine incorporation test로 관찰하였을 때 50 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서만 [$^3$H]thymidine incorporation이 저하되었다. 결론적으로 저령에는 백혈병세포인 L-1210과 HL-60의 세포생존 억제성분이 포함되어 있으며, 억제작용은 L-1210에 가장 뚜렷이 나타내었다. Fr. 3은 L-1210 세포에 대하여 DNA 합성능을 저해시켰고, Fr. 3가 L-1210 세포에 대하여 세포생존 억제작용을 나타내는 것은 계획된 세포사멸현상인 apoptosis에 의한 것으로 사료된다. 따라서 fr. 3에 대한 성분 연구가 요구되어진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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