Paddy rice is rarely used as a feed because of its high fiber content. In this study, two experiments were conducted to study the effects of supplementing an enzyme complex consisting of xylanase, beta-glucanase and cellulase, to paddy-based diets on the performance and nutrient digestibility in meat-type ducks. In the both experiments, meat-type ducks (Cherry Valley) were randomly assigned to four treatments. Treatment 1 was a basal diet of corn-soybean; treatment 2 was a basal diet of corn-paddy-soybean; treatment 3, had enzyme complex added to the corn-paddy-soybean basal diet at levels of 0.5 g/kg diet; and treatment 4, had enzyme complex added to the corn-paddy-soybean diet at levels of 1.0 g/kg diet. The results showed that the enzyme complex increased the ADG, and decreased the ADFI and F/G significantly (p<0.05) in the ducks, and the ADFI for the ducks fed the corn-paddy-soybean diet showed no difference compared to the ducks fed corn-soybean diets at all stages of the experiment (p<0.05). When corn was partially replaced by paddy, the digestibility of CP and NDF was decreased and increased, respectively (p<0.05), and the level of enzyme complex had a significant effect on both CP and NDF digestibility (p<0.05). As for the AME, addition of enzyme complex increased it significantly (p<0.05), but both diet types and levels of enzyme complex had no effect (p>0.05). The outcome of this research indicates that the application of enzyme complex made up of xylanase, beta-glucanase, and cellulase, in the corn-paddy-soybean diet, can improve performance and nutrition digestibility in meat-type ducks.
This experiment was undertaken to investigate proper conditions for protoplast isolation from strains of Agaricus bisporus, Flammulina velutipes, Lentinus edodes, Pleurotus florida, Pleurotus ostreatus, Pleurotus sajor-caju and Volvariella volvacea. Combination of ${\beta}-D-glucanase$, novozym 234 and snail enzyme with 0.6M $MgSO_4$ in 0.05M Na-maleate buffer, pH 5.8 was the most effective for isolation of protoplasts. High yields of protoplasts were obtained from $4{\sim}5$ days old mycelia of P. florida and P. ostreatus on mushroom complete agar medium. Protoplasts were also obtained in good yield from other fungi but A. bisporus and V. volvacea. In the latter two cases protoplast release was observed; however, the yield was much lower than those of the other fungi.
Oh, Hong Rock;Aizono, Yasuo;Shimoda, Tadahisa;Masaru, Funatsu
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.12
no.4
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pp.387-394
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1983
The factor, which was capable of accelerating the yeast cell wall lysis of the zymolyase(${\beta}-1$, 3-glucanase), was purified to a homogeneous state from the protease fraction of the crude zymolyase by Sephadex G-75 gel filtration and preparative polyacrylamide gel disc electrophoresis. The molecular weight of the purified factor was estimated to be 40,500 by SDS-polylacrylamide gel disc electrophoresis and it's iso-electric point was pH 9.6. The factor was found to be a basic protease consisted of single polypeptide chain with 395 amino acid residues and it showed the $E_{280,cm}^{1%}$ of 11.9 and the molecular extinction coefficient of $4.83{\times}10^4$, respectively.
Pseudomonas sp. GRC3 produced extracellular chitinase(s) and ${\beta}$-1,3-glucanase(s), possible biocontrol agents. Both of enzymes appeared to inhibit the growth of plant phathogens, especially Phytophthora capsici. Antifungal activities of Pseudomonas sp. GRC3 determined was more than 78% inhibition rate against P. capsici.
BACKGROUND: Chemical fungicides not only may pollute the ecosystem but also can be environmentally hazardous, as the chemicals accumulate in soil. Biological control is a frequently-used environment-friendly alternative to chemical pesticides in phytopathogen management. However, the use of microbial products as fungicides has limitations. This study isolated and characterized a three-antifungal-enzyme (chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase)-producing bacterium, and examined the conditions required to optimize the production of the antifungal enzymes. METHOD AND RESULTS: The antifungal enzymes chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase were produced by bacteria isolated from an sawmill in Korea. Based on the 16S ribosomal DNA sequence analysis, the bacterial strain AM50 was identical to Streptomyces sp. And their antifungal activity was optimized when Streptomyces sp. AM50 was grown aerobically in a medium composed of 0.4% chitin, 0.4% starch, 0.2% ammonium sulfate, 0.11% $Na_2HPO_4$, 0.07% $KH_2PO_4$, 0.0001% $MgSO_4$, and 0.0001% $MnSO_4$ at $30^{\circ}C$. A culture broth of Streptomyces sp. AM50 showed antifungal activity towards the hyphae of plant pathogenic fungi, including hyphae swelling and lysis in P. capsici, factors that may contribute to its suppression of plant pathogenic fungi. CONCLUSION(S): This study demonstrated the multiantifungal enzyme production by Streptomyces sp. AM50 for the biological control of major plant pathogens. Further studies will investigate the synergistic effect, to the growth regulations by biogenic amines and antifungal enzyme gene promoter.
This study was carried out to isolate soil bacteria with antimicrobial activity and evaluate antimicrobial substances produced by isolated bacteria. Among many isolates Bacillus subtilis DS660 and Paenibacillus polymyxa DS842 showed high antimicrobial activities against 6 species of microbial residents on human skin and 3 species of pathogenic bacteria. DS660 and DS842 showed 15.3~26.8 and 11.3~27.5 mm of inhibition zone diameter, respectively on nutrient agar medium against most target bacteria and fungi. DS660 and DS842 produced $57{\pm}8$ and $170{\pm}15{\mu}mol/ml$ of siderophore, respectively as an antimicrobial substance. Analysis of ethyl acetate extract of culture supernatants of DS660 and DS842 suggested production of glycolipid biosurfactant which reduced surface tension of culture supernatant of DS660 and DS842 from 60.0 to 40.3 and 30.3 mN/m, respectively. DS660 and DS842 also showed $169.2{\pm}9.9$ and $357.2{\pm}13.7nmol/min/mg$ protein of ${\beta}-1,3$-glucanase activity, respectively, and hydrolyzed cell wall components of 3 bacterial species. These results suggest that B. subtilis DS660 and P. polymyxa DS842 may be utilized as an environment-friendly biocontrol agent against some skin microbes and pathogenic bacteria.
A series of experiment were carried out to separate the factor accelerating the lysis of cell wall of $Saccharomyces\;sak{\acute{e}}$ from the preparation of crude zymolyase obtained from Arthrobacter luteus. An attempt was also made to purify the enzyme which is essential for the study on the separation of the factor. The results are summarized as follows: 1. Crude zymolyase was fractionated 5 peaks $(A{\sim}E)$ containing three peaks $(A{\sim}C)$ passed through the column by the chromatography on Biogel CM-30. 2. Among the five peaks, peak E (protease fraction) was found to contain the factor accelerating the lytic activity of the zymolyase. 3. L-c fraction purified in almost free form from the nonlytic ${\beta}-1$, 3-glucanase, protease and inert protein by the affinity adsorption chromatography with Sephadex G-75 gel was obtained from zymolyase fraction (peak D). When it was subjected to polyacrylamide gel disc electrophoresis, only one clear protein band was observed at pH 4. 5, but still detected two or more band at pH 8. 3.
A gene coding $endo-{\beta}$,-1, 4 glucanase from Actinomyces sp. KNG40 and phytase from Hansenula polymorpha were cloned into Esherichia coli JM101 by using E. coli/Lactobacillus shuttle vector pNZ3004 and pNZ123. The plasmid p3PS(1-4) and p123(1-4) have slpA promoter and slpA signal sequence. So, I constructed expression vectors, p3PS(1-4)Endo, phy and p123(1-4)Endo, phy. These constructed vector was transformed in target host Lactobacillus gasseri and reutri. These transformed host expressed endoglucanase and phytase as extracellular fraction. In the enzyme activity of the same vector, host L, gasseri was higher activity than L. reuteri. This indicates that L. gasseri recongnize promoter and signal sequence very well.
Kim, Min Sik;Kim, Sinil;Ha, Byeong-Seok;Park, Hye-Young;BaeK, Seong-Yeol;Yeo, Soo-Hwan;Ro, Hyeon-Su
The Korean Journal of Mycology
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v.42
no.3
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pp.191-200
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2014
Nuruk samples collected from various regions in Korea were investigated in terms of fungal contents and diversity. In measurement of colony forming unit (CFU) in Nuruk suspensions on DRBC agar, Nuruk samples MS4, MS8, and MS10 were among the highest fungal density, with $1,278.9{\pm}21.6$ (${\times}10^4$), $1,868.0{\pm}27.7$ (${\times}10^4$), and $775.1{\pm}19.2$ (${\times}10^4$) were among the samples showing the highest fungal density. CFU per 20 mg Nuruk, respectively. The majority of fungal components were yeasts, including Pichia anomala, P. kudriavzevii, Kluyveromyces marxianus, and Saccharomycopsis fibuligera, whereas Aspergillus oryzae and Rhizopus oryzae, the representative Nuruk fungi, were predominant only in the low fungal density Nuruks (MS2, MS5, and MS11). Saccharification capability of the fungal isolates was assessed by measurement of amylase activity in the culture broth. The highest amylase activity was found in A. niger and A. luchuensis, followed by S. fibuligera. A. oryzae and R. oryzae showed fair amylase activity but significantly lower than those of the three fungal species. R. oryzae was suggested to play an additional role in degradation of ${\beta}$-glucan in crop component of Nuruk since R. oryzae was the only fungus that showed ${\beta}$-glucanase activity among the fungal isolates. To confirm the safety of Nuruk, aflatoxigenicity of the isolated Aspergillus was estimated using the DNA markers norB-cypA, aflR, and omtA. All of the isolates turned out to be non-aflatoxigenic as evidenced by the deletion of gene markers, norB-cypA and aflR, and the absence of aflatoxin in the culture supernatants shown by TLC analysis.
A fungal strain of Trichoderma having strong chitinolytic activity was isolated from field soil enriched with crabshell for several years. Based on 5.8S rRNA, partial 18S, 28S rRNA genes, ITS1, ITS2 sequence analysis and morphological characteristics, the fungus was identified as Trichoderma asperellum and named as Trichoderma asperellum T-5 (TaT-5). The fungus released lytic enzymes such as chitinase and ${\beta}$-1, 3-glucanse, and produced six antifungal substances in chitin broth medium. To demonstrate the protective effect of TaT-5 against damping-off in cucumber plant caused by Rhizoctonia solani, TaT-5 culture broth (TA), chitin medium (CM) and distilled water (DW) were applied to each pot at 10 days after sowing, respectively. Then, the homogenized hyphae of R. solani were infected to each pot at 1 week after TaT-5 inoculation. During experimental period, fresh weight of shoot and root in cucumber plant more increased at TA treatment compared to other treatments. PR-proteins (${\beta}$-1, 3-glucanase and chitinase) activities in cucumber leaves markedly increased at CM and DW treatments, but the activity slightly increased and then decreased at TA treatment at 3 days after infection of R. solani. The activity of PR-proteins activities in cucumber roots at all treatments decreased with time where the degree of decrement was more alleviated at TA treatment than CM and DW. These results suggest that the lytic enzymes (chitinase and ${\beta}$-1, 3-glucanse) and antifungal substances produced by TaT-5 can reduce the pathogenic attack by R. solani in cucumber plants.
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