산겨릅나무 $80^{\circ}C$ 열수 및 95% 에탄올 추출물을 제조하여 항산화 및 항염증 효과를 확인한 결과 추출물은 우수한 항산화 효과를 나타내었고 RAW 264.7 세포에서도 항염증 효과를 보였으며, 그중 95% 에탄올 추출물의 효능이 더 큰 것으로 나타났다. 따라서 효능이 더 뛰어난 산겨릅나무 에탄올 추출물을 이용하여 in vivo 실험에서 추출물의 세포 보호효과 및 항염증 효능을 재확인하였다. ICR mouse에 일주일간 100 mg/kg B.W 산겨릅나무 에탄올 추출물을 경구투여한 후 LPS를 처리하여 염증반응 및 산화적 스트레스를 유도시켜 Comet assay, serum tumor necrosis $factor(TNF)-{\alpha}$와 $interferon-{\gamma}$, 장점막세포에서의 $TNF-{\alpha}$와 interleukin-6에 대한 생성능을 측정한 결과 산겨릅나무 에탄올 추출물은 DNA 손상을 억제하였으며 사이토카인 생성을 유의적으로 억제하여 항산화와 항염증 효과를 보였다. 따라서 본 연구에서 사용한 산겨릅나무의 에탄올 추출물은 산화적 스트레스 및 염증을 억제하는 효과를 나타내는 세포보호 기능적 소재로서 가능성이 있는 것으로 생각한다.
Purpose : 자하거(Hominis Placenta; HP)는 건강한 사람의 태반을 홍제(烘製)하여 건조한 것으로 한의학에서는 기혈(氣血)을 대보(大補)하고 신정(腎精)을 보익(補益)시켜 구병(久病)으로 인한 신체허약(身體虛弱)이나 혹은 체질허약(體質虛弱)과 혈기부족(氣血不足) 및 신허정휴(腎虛精虧) 등 등(證)을 치료(治療)하는데 단미(單味) 또는 복방(複方)에 배오(配伍)하여 쓰여왔다. 또한 자하거는 면역학적으로 골대사 활성이 있는 것으로 알려져 있어 본 연구에서는 자하거의 항골다공증 활성을 분자세포생물학적으로 검정하고자 하였다. Methods : Osteoblast cells에서 자하거가 COX-2 mRNA의 발현과 $PGE_2$ 생합성을 억제시키는지를 관찰하기 위해 먼저 TNF-${\alpha}$, IL-${\beta}$ 와 IL-6를 처리한 후 $PGE_2$의 생합성과 더불어 COX-2 mRNA의 발현을 확인하였다. 그 후 TGF-${\beta}$, 자하거(紫河車)와 이 둘의 조합인 자하거+TGF-${\beta}$가 COX-2 mRNA 발현과 $PGE_2$ 생합성을 저해시키는지 관찰하였다. 또한 자하거가 IL-1${\beta}$로 유발된 흰쥐의 과칼슘혈증을 감소시키는지를 확인하였다. Results : IL-6, IL-1${\beta}$와 TNF-${\alpha}$를 동시에 처리하면 이것을 단독으로 처리한 것과 비교해 볼 때 $PGE_2$의 생합성과 더불어 COX-2 mRNA의 수치가 상승작용을 일으키며 증가하였다. TGF-${\beta}$, 자하거와 이 둘의 조합인 자하거+TGF-${\beta}$은 COX-2 mRNA 발현, $PGE_2$ 생합성 및 골재흡수를 감소시켰다. 자하거(紫河車)는 IL-1${\beta}$, TNF-${\alpha}$와 IL-6 각각 또는 이들의 조합으로 인해 증가하는 COX-2 mRNA 발현과 $PGE_2$ 생성을 감소시키는 반면 COX-1 mRNA 발현에는 유의성 있는 영향을 미치지 않았다. 한편 자하거는 농도의존적으로 IL-1${\beta}$로 유발된 흰쥐의 과칼슘혈증을 감소시켰다. 이러한 결과는 흰쥐의 두개골 골아세포에서 $PGE_2$ 생산에 대한 IL-${\beta}$, TNF-${\alpha}$, IL-6의 상승작용이 COX-2의 유전자 발현 증가에 기인함을 보여주었다. Conclusions : 이러한 결과들로부터 자하거가 골대사과정중 골재흡수를 억제하는데 효과적임을 밝히게 되었으며, 자하거의 골다공증의 억제기전이 골재흡수관련 단백질들의 전사조절에 있음을 최초로 해명하게 되었다.
Potassium cyanate는 무기화합물로 단백질의 번역 후 과정에서 카바밀화(carbamylation)을 유도할 수 있고 이러한 카바밀화 반응은 다양한 질병 및 조건에서 세포의 사멸과 관련이 있다. 이전 연구결과에서 KCN은 사람 대장암 세포주인 HCT 116세포의 방사선 감수성을 향상시키는 것을 확인하였지만 그 기전을 명확히 규명하기에는 많이 부족한 실정이다. 본 연구에서는 방사선에 다소 저항성을 가지는 대장암 세포에서 KCN이 방사선 감수성을 향상시키고 세포사멸 시키는 기전을 확인하기 위해 2 mM의 KCN 처리 후 저 선량의 광자선을 조사하여 세포주기, 세포 생존율, 세포 사멸 관련 단백질(caspase-1, PARP) 발현량, $TNF-{\alpha}$ 분비 및 $TNF-{\alpha}$ 관련 전사인자($NF-{\kappa}B$)의 연관성을 확인하였다. 그 결과 KCN 처리 후 광자선을 조사한 세포에서 caspase-3 및 PARP의 활성이 증가하고 이는 세포주기의 정지와 세포사멸을 유도하였다. 또한 이 과정에서 DNA 전사인자인 $NF-{\kappa}B$에 의해 세포 외로 $TNF-{\alpha}$를 지속적으로 분비하여 세포사멸에 관여함을 확인하였다. 이러한 결과들을 토대로 KCN이 radiosensitizer로서 작용할 수 있는 가능성이 있다고 사료된다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.135.2-135.2
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2003
We studied the effect of methanol extract of Pachydictyon coriaceum (PC) on atopic allergic reaction. PC dose-dependently inhibited interleukin (IL)-8 and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ secretion from the PMA- pius A23187- stimulated HMC-1. PC also dose-dependently inhibited the histamine and $\beta$-hexosaminidase release from mast cells. PC had no cytotoxic effect. (omitted)
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.136.1-136.1
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2003
We studied the effect of methanol extract of Sargassum hemiphylum(SH) on atopic allergic reaction. SH dose-dependently inhibited interleukin (IL)-8 and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ secretion from the PMA- plus A23187- stimulated HMC-1. SH also dose-dependently inhibited the histamine and $\beta$-hexosaminidase release from mast cells. (omitted)
This Experimental study was done to research effects of Fagopyrum esculentum Moench(Me-mil) Extract on the anti-allergic effects. The results were obtained as follows : 1. All concentrations of Fagopyrum esculentum Moench Extract(Flours and seeds) inhibit histamine release under the vascular permeability response to intracutanenous injection. The result is proportion to concentration. But, rutin can't get considerable result. 2. All concentrations of Fagopyrum esculentum Moench Extract inhibit histamine release under the vascular permeability response to intraperitoneal injection of SD Rat in comparison with Diphenhydramine which is typical anti-histamine drug. 3. All concentrations of Fagopyrum esculentum Moench Extract inhibit histamine release under the vascular permeability response to per-oral during the three or five days. 4. In the result of quantification of histamine induced Compound $\frac{48}{80}$, Flours and seeds of Fagopyrum esculentum Moench Extract inhibit histamine release. 5. Among the fracination of Fagopyrum esculentum Moench Extract, $CHCl_3$ fraction inhibit histamine release effectively. 6. In the result of genetic manifestative inhibition about the Human mast cell treated PMA and A23187, Fagopyrum esculentum Moench Extract effect in the IL-4 and TNF-${\alpha}$ except IL-5. According to the above results, it is suggested that Fagopyrum esculentum Moench(Me-mil) Extract has anti-allergic effect.
The effect of aqueous extract of Magnoliae Cortex (Magnoliaceae) (MCAE) on the immediate-type allergic reaction was investigated. MCAE inhibited compound 48/80 induced systemic anaphylactic reaction in rats. MCAE (0.1 and 1 g/kg) also significantly inhibited local immunoglobulin E (lgE)-mediated passive cutaneous anaphylactic (PCA) reaction. MCAE (0.001 to 1 mg/ml) dose-dependently inhibited the histamine release from rat peritoneal mast cells (RPMC) activated by compound 48/80 or anti-dinitrophenyl (DNP) 1gE. Moreover, MCAE (0.01 to 1 mg/ml) had a significant inhibitory effect on anti-DNP IgE-mediated tumor necrosis $factor-{\alpha}$$(TNF-{\alpha})$ production. These results indicate that MCAE inhibits immediate-type allergic reaction in vivo and in vitro.
Objectives: The purpose of this study is to determine the stimulatory effects of herbal medicines extracts on cytokines release of immune response in immune cells, RAW 264.7 and TK-1 cell. Methods: In a total of 18 extracts, 9 water extracts and 9 ethanol extracts, of herbal medicines, the quantities of polyphenolic compounds were measured and anti-oxidation activities were determined by colorimetric assay. The herbal medicine extracts were treated on RAW 264.7 and TK-1, respectively, and then the releasing changes of tumor necrosis factor-${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), interleukin-6, and interleukin-10 from both immune cells were determined by the enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The polyphenol contents were measured to be 1.56~0.64 mg/g of solids in the two types of extracts with 9 kinds of herbal medicines, while antioxidant activities were found to be 95.62~31.46% as compared with ascorbic acid control. In RAW 264.7 cells treated with herbal medicines extracts, the secretion of $TNF-{\alpha}$ increased to 1.31~1.18 fold, and the amounts of IL-6 were 68.4~97.9% compared with the control group treated with LPS alone. In particular, the secretion amount of anti-inflammatory cytokine IL-10 was suppressed by treatment using herbal medicine extracts. In the case of TK-1 cells, $TNF-{\alpha}$ secretion was suppressed according to the concentrations of herbal extract. The released amounts of IL-10 were shown at 10~40 pg/ml, and increased in a dose-dependent manner. Conclusions: Herbal medicines extracts act on macrophages inducing the secretion of inflammatory cytokine, thereby enhancing the activity of innate immunity. When acting on T cells involved in adaptive immunity, the secretion of anti-inflammatory cytokine is increased to induce the inhibition of the innate immune response.
Objectives : This study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-pruritic effects of WSY-1075 composited with Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Ginseng Radix, Cervi parvum Cornu and Cinnamomi Cortex in rat peritoneal mast cells (RPMCs) and scratching mouse model. Methods : WSY-1075 was prepared by extracting with 30% ethanol. In the present study, we investigated the effect of WSY-1075 on the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and histamine in rat peritoneal mast cells (RPMCs) activated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187, and on the scratching behavior in mice treated with pruriogens. Results : WSY-1075 was not cytotoxic effect in used all concentration. PMA plus A23187 treatment significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 production compared with media control in RPMCs. However, TNF-${\alpha}$, $IL1{\beta}$ and IL-6 production increased by PMA plus A23187 treatment were significantly inhibited by WSY-1075 (200 ${\mu}g/mL$ and 400 ${\mu}g/mL$). WSY-1075 also inhibited the histamine release from RPMCs stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Moreover, WSY-1075 administration had an inhibitory effects on the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80, histamine, serotonin and substence P) in ICR mice. Conclusion : These results suggest that WSY-1075 administration (200 mg/kg or 400 mg/kg) has the anti-inflammatory and anti-pruritic effects on the activated rat peritoneal mast cell and mouse pruritus. WSY-1075 has a potential use as a composition of medicinal plants for treatment against inflammation- and pruritus-related disease.
Amentoflavone is naturally occurring bioflavonoid that is found in a number of plants. In this paper, the anti-inflammatory activity of amentoflavone in LPS-stimulated macrophages and its mode of action were examined. Using LPS-stimulated RAW264.7 macrophage cells, we found that amentoflavone exerted anti-inflammatory activities through inhibition of nitric oxide (NO) production and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and macrophage inflammatory protein (MIP)-2 secretion. Amentoflavone (1.0-20 ${\mu}M$) gradually inhibited nitrite production without cytotoxicity. Amentoflavone (1.0 and 10 ${\mu}M$) effectively suppressed both TNF-${\alpha}$ and MIP-2 cytokine release from LPS-stimulated RAW264.7 cells. The expression of mIL-$1{\beta}$ and mMIP-2 cytokine mRNAs was completely inhibited while expression of mMIP-1 was effectively suppressed and mTNF-${\alpha}$ expression was slightly inhibited by 10 ${\mu}M$ amentoflavone. We also demonstrated that the innate immune response to amentoflavone involves the toll-like receptor (TLR) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways. LPS-induced upregulation of p38 MAPK phosphorylation was significantly reduced by 10 ${\mu}M$ amentoflavone. These results suggest that amentoflavone exhibits effective anti-inflammatory activities through regulation of TLR4 and phosphorylation of p38 MAPKs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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